马动脉炎病毒(EAV)检测试剂盒(荧光-PCR法)

产品特点：

1、公司产品仅用于科研不需要单独纯化线粒体，柱式法纯化，操作简单快捷。

2、得到的mtDNA可以直接用于PCR和酶切。

3、每107个动物细胞一般能得到100ng左右的mtDNA，每克组织一般能得到3～5μg mtDNA。

注意：本产品只适合于动物材料，不适合于植物材料，因为植物线粒体DNA一般都十分巨大,非常难提。

操作流程:

1.从室温平衡20min后的铝箔袋中取出所需板条，剩余板条用自封袋密封放回4℃。

2.设置标准品孔和样本孔，标准品孔各加不同浓度的标准品50μL；

3.样本孔中加入待测样本50μL；空白孔不加。

4.除空白孔外，标准品孔和样本孔中每孔加入辣根过氧化物酶（HRP）标记的检测抗体100μL，用封板膜封住反应孔，37℃水浴锅或恒温箱温育60min。

5.弃去液体，吸水纸上拍干，每孔加满洗涤液（350μL），静置1min，甩去洗涤液，吸水纸上拍干，如此重复洗板5次（也可用洗板机洗板）。

6.每孔加入底物A、B各50μL，37℃避光孵育15min。

7.每孔加入终止液50μL，15min内，在450nm波长处测定各孔的OD值。

产品组成:

下列是公司正热销的产品：

载玻片细胞RHO 蛋白表达NBT显色光学显微镜检测试剂盒10/20次人脑血管平滑肌微小RNA人纤溶酶原激活物抑制因子（PAI）ELISA试剂盒,

冰冻切片组织RHO 蛋白表达NBT显色光学显微镜检测试剂盒10/20次人脑血管周微小RNA人Agouti相关蛋白（AGRP）ELISA试剂盒,

石蜡切片组织RHO 蛋白表达NBT显色光学显微镜检测试剂盒10/20次人脉络丛内皮微小RNA人着丝粒蛋白B（CENP-B）ELISA试剂盒,

细胞RHO 蛋白表达比色法定量检测试剂盒10/50 次人脉络丛上皮微小RNA小鼠白介素8（IL-8/CXCL8）ELISA试剂盒,

细胞RHO 蛋白表达荧光定量检测试剂盒10/50 次人脉络丛成纤维微小RNA大鼠c-Jun氨基末端激酶（JNK）ELISA试剂盒,

RHO 蛋白表达西方杂交分析试剂盒5次人脑膜微小RNA大鼠糖原磷酸化酶同工酶BB（GP-BB）ELISA试剂盒,

RHO 蛋白共沉淀分析试剂盒5次人神经元微小RNA大鼠基质金属蛋白酶5（MMP-5）ELISA试剂盒,

RHO 蛋白表达elisa试剂盒25次人小脑颗粒微小RNA山羊生长释放多肽（GHRP）ELISA试剂盒,

细胞TRAIL 蛋白表达流式细胞仪检测试剂盒10/20次人海马趾神经元微小RNA兔子胰岛素（INS）ELISA试剂盒,

载玻片细胞TRAIL 蛋白表达荧光显微镜检测试剂盒10/20次人少突胶质前体微小RNA亚硫酸盐-多粘菌素-磺嘧啶琼脂基础   用于产气荚膜梭菌的平板计数（GB标准）

细胞CREB蛋白表达流式细胞仪检测试剂盒10/20次人少突胶质前体-悬浮生长微小RNA缓冲李氏菌增菌肉汤基础用于李氏菌的增菌培养（MercK标准）

载玻片细胞CREB蛋白表达荧光显微镜检测试剂盒10/20次人雪旺微小RNA朝藿定B Epimedin B

冰冻切片组织CREB蛋白表达荧光显微镜检测试剂盒10/20次人神经束膜微小RNA人脑钠素/脑钠尿肽（BNP）ELISA试剂盒,BNP ELISA kit

石蜡切片组织CREB蛋白表达荧光显微镜检测试剂盒10/20次人星形胶质微小RNA人膀胱癌抗原（UBC）ELISA试剂盒,UBC ELISA kit

载玻片细胞CREB蛋白表达NBT显色光学显微镜检测试剂盒10/20次人小脑星形胶质微小RNA人脱氧胶原吡啶交联（DPD）ELISA试剂盒,DPD ELISA
马动脉炎病毒(EAV)检测试剂盒(荧光-PCR法)MAG Ab(Human myelin associated glycoprotein antibody) ELISA Kit  人抗髓鞘相关糖蛋白抗体庖肉牛肉粒 BR

ANGA(Human neutrophil granules antibody) ELISA Kit  人抗中性粒颗粒抗体庖肉培养基基础 BR

ANA(Human neutrophil antibody) ELISA Kit  人抗中性粒抗体十六烷基溴化铵琼脂 BR

Apo A1(Human apolipoprotein A1 antibody) ELISA Kit  人抗载脂蛋白抗体A1蜡样芽孢杆菌显色培养基 BR

AIRA(Human insulin receptor antibody) ELISA Kit  人抗胰岛素受体抗体大肠杆菌O157：H7显色培养基 BR

AGPA/PCA(Human gastric parietal cell antibody) ELISA Kit  人抗胃壁抗体弧菌显色培养基 BR

ARA(Human gastric parietal cell antibody) ELISA Kit  人抗网硬蛋白抗体溴化十六烷基铵琼脂培养基（药典） BR

MCV(Human mutated citrullinated vimentin antibody) ELISA Kit  人抗突变型瓜氨酸波形蛋白抗体阪崎肠杆菌显色培养基 BR

使用方法:

一:培养细胞预处理

1. 用自备的0.25%胰酶消化液处理约107个培养细胞,离心收集后弃上清。

2. 用PBS或TBS等缓冲液洗涤细胞两次,离心得到的细胞沉淀直接用于mtDNA提取。

二:组织细胞预处理

3. 用剪刀将1g新鲜的动物组织剪碎(芝麻大小*),转移到1.5mL塑料离心管中,用于mtDNA提取。注意:*不要使用冻存的动物组织,因为冻凝过程中形成的冰晶会将线粒体刺破,使其DNA释放出来被胞浆中的DNA酶降解,影响回收率。

三:血液预处理

4. 将3-5mL抗凝外周血静置30分钟或低速离心5分钟,取白细胞层。

5. 用自备PBS洗涤白细胞两次,得到的白细胞沉淀用于mtDNA提取。

柱式动物线粒体DNA提取试剂盒(PCR级)四:mtDNA提取

5.在细胞沉淀或剪碎的组织中加入250μL冰浴的溶液A,充分吹打分散。如果是剪碎的组织,不要等成块的组织溶解即可继续下步操作。

6. 加入250μL常温的溶液B(如果溶液B有沉淀,用前须37℃加热溶解后冷却到室温方可使用),温和反复颠倒混匀10次。千万不要剧烈振荡。

7. 冰上放置6-8分钟。注意不要超过8分钟。

8. 加入350μL冰浴的溶液C,温和混匀4-6次,可见白色沉淀物产生,然后放冰上放置20-25分钟。

9.室温12000~15000g离心10分钟,小心将上清液转移到离心吸附柱中。由于此时的溶液比重较大,有时候出现沉淀漂浮是正常现象,取上清时避开漂浮的沉淀即可。

10. 静置5分钟以让DNA与离心吸附柱充分结合,此步十分重要。

11.室温12000~15000g离心1分钟,弃收集管中的废液。

12. 加入500μL的通用洗柱液,室温12000~15000g离心1分钟,弃收集管中废液。

注意:通用洗柱液中含乙醇,用后需要将盖拧紧存放,否则乙醇会挥发。

13. 重复上步1次。

14.室温12000~15000g离心1分钟,甩干残留液体。此步不能省略,否则残留乙醇会影响DNA的后续使用(如DNA上样时不能沉淀到加样孔中)。

15. 将离心吸附柱置于一个新的1.5mL塑料离心管中,加入30-50μL 65-80℃预热的DNA洗脱液,室温放置2分钟。常温的DNA洗脱液也可以用于洗脱,但产量稍微有所降低。

16.室温12000~15000g离心1分钟,离心管底溶液即mtDNA。

17. 由于本公司离心吸附柱结合DNA能力较强,如果再加30-50μL DNA洗脱液到离心吸附柱中,往往还能洗脱下很多mtDNA(相当于次洗脱的20-30%),但注意不要使用上步得到的mtDNA溶液来洗脱。

18. 12000~15000g离心1分钟,离心管底溶液即线粒体DNA。每107个动物细胞一般能得到100ng左右的mtDNA,每克组织一般能得到3-5μg mtDNA。如果DNA需要浓缩,可以使用本公司的核酸浓缩剂。

19. 由于DNA机械断裂,电泳时DNA可能不呈现专一的带,但此mtDNA溶液可以直接用于PCR。

产品留言

标题

联系人

联系电话

内容

验证码

点击换一张

注：1.可以使用快捷键Alt+S或Ctrl+Enter发送信息!
2.如有必要,请您留下您的详细联系方式!