肠侵袭性大肠杆菌（EIEC）检测试剂盒(荧光-PCR法)

产品特点：

1、公司产品仅用于科研不需要单独纯化线粒体，柱式法纯化，操作简单快捷。

2、得到的mtDNA可以直接用于PCR和酶切。

3、每107个动物细胞一般能得到100ng左右的mtDNA，每克组织一般能得到3～5μg mtDNA。

注意：本产品只适合于动物材料，不适合于植物材料，因为植物线粒体DNA一般都十分巨大,非常难提。

操作流程:

1.从室温平衡20min后的铝箔袋中取出所需板条，剩余板条用自封袋密封放回4℃。

2.设置标准品孔和样本孔，标准品孔各加不同浓度的标准品50μL；

3.样本孔中加入待测样本50μL；空白孔不加。

4.除空白孔外，标准品孔和样本孔中每孔加入辣根过氧化物酶（HRP）标记的检测抗体100μL，用封板膜封住反应孔，37℃水浴锅或恒温箱温育60min。

5.弃去液体，吸水纸上拍干，每孔加满洗涤液（350μL），静置1min，甩去洗涤液，吸水纸上拍干，如此重复洗板5次（也可用洗板机洗板）。

6.每孔加入底物A、B各50μL，37℃避光孵育15min。

7.每孔加入终止液50μL，15min内，在450nm波长处测定各孔的OD值。

产品组成:

下列是公司正热销的产品：

基质金属蛋白酶（MMP）明胶酶谱法（zymography）5次Antibiotic agar  GROVE and RANDALL medium 琼脂1号二甲酚橙四钠

电泳分析试剂盒Antibiotic agar No.2 GROVE and RANDALL medium No.2 琼脂2号苯甲酸

蛋白电泳染色试剂专题Antibiotic agar No.5 GROVE and RANDALL medium No.5琼脂5号二十七烷

名称规格Antibiotic agar 1 GROVE and RANDALL medium 1 琼脂11号人黑色素（MSH）ELISA试剂盒,MSH ELISA kit

通用型蛋白电泳考马斯亮蓝染色试剂盒10次Antibiotic agar 2 GROVE and RANDALL medium 2 琼脂12号人抗网硬蛋白抗体（ARA）ELISA试剂盒, ARA ELISA kit

麦黄酮蛋白电泳考马斯亮蓝染色试剂盒10次Antibiotic Brothe 肉汤人抗天然脱氧核糖核酸抗体（n-DNA-Ab）ELISA试剂盒,n-DNA-Ab ELISA

蛋白电泳硝酸银染色试剂盒10次APT agar APT琼脂人抗核小体抗体IgG（AnuA-IgG）ELISA试剂盒,AnuA-IgG ELISA KIT

蛋白电泳尼罗红染色试剂盒20次Arginie broth acc.to SCHUBERT (ABGP medium) 精氨酸肉汤人沙眼衣原体抗体（CT）ELISA试剂盒,CT ELISA

蛋白电泳SYPRO橙色染色试剂盒10次Ass agar（D.S.T agar）Antibiotic sulfonamide sensitivity-test agar人戊型肝炎病IgM（HEV-IgM）ELISA试剂盒,HEV-IgM ELISA

蛋白电泳伊红黄色染色试剂盒10次磺灵敏性测试琼脂人丙型肝炎IgG（HCV-IgG）ELISA试剂盒,HCV-IgG ELISA

蛋白电泳固绿染色试剂盒10次Azide dextrose broth 叠氮葡萄糖肉汤人磷脂酰肌醇蛋白聚糖3（GPC-3）ELISA试剂盒,GPC-3 ELISA

蛋白电泳丽春红染色试剂盒10次Bacillus cereus selective supplement 蜡状芽孢杆菌选择添加剂人胆固醇酯转移蛋白（CETP）ELISA试剂盒,CETP ELISA 96T/48T

铜蛋白电泳染色试剂盒10次BAIRD-PARKER agar Staphylococcus selective agar base acc.to人色素C（Cyt-C）ELISA试剂盒,Cyt-C ELISA

蛋白杂交试剂专题BAIRD-PARKER 贝尔德-帕克琼脂/葡萄状球菌选择培养基人吡哆醛/吡哆醇维生素B6激酶（PDXK）ELISA试剂盒,PDXK ELISA

名称规格BAT Agar BAT琼脂（脂环芽孢杆菌培养基）人尿激酶（UK）ELISA试剂盒,
肠侵袭性大肠杆菌（EIEC）检测试剂盒(荧光-PCR法)Kim-1(Human Kidney injury molecule 1) ELISA Kit  人肾损伤分子1硬脂酸甲酯 CP,45%（GC）

AQP-5(Human Aquaporin 5) ELISA Kit  人水通道蛋白5硬脂酸甲酯 分析标准品,>99.5% (GC)

AQP-4(Human Aquaporin 4) ELISA Kit  人水通道蛋白4色标Standard for GC,≥99.5% (GC)

AQP-3(Human Aquaporin 3) ELISA Kit  人水通道蛋白3硬脂酸甲酯 95%

AQP-2(Human Aquaporin 2) ELISA Kit  人水通道蛋白2油酸甲酯 CP，≥60.0% (GC)

AQP-1(Human Aquaporin 1) ELISA Kit  人水通道蛋白14-雄烯-4--3,17-二酮 99%

AQP-0(Human Aquaporin 0) ELISA Kit  人水通道蛋白0(R)-(+)-苎烯 97%

RF(Human rheumatoid factor) ELISA Kit  人类风湿因子四烷络合物 1M solution in THF

使用方法:

一:培养细胞预处理

1. 用自备的0.25%胰酶消化液处理约107个培养细胞,离心收集后弃上清。

2. 用PBS或TBS等缓冲液洗涤细胞两次,离心得到的细胞沉淀直接用于mtDNA提取。

二:组织细胞预处理

3. 用剪刀将1g新鲜的动物组织剪碎(芝麻大小*),转移到1.5mL塑料离心管中,用于mtDNA提取。注意:*不要使用冻存的动物组织,因为冻凝过程中形成的冰晶会将线粒体刺破,使其DNA释放出来被胞浆中的DNA酶降解,影响回收率。

三:血液预处理

4. 将3-5mL抗凝外周血静置30分钟或低速离心5分钟,取白细胞层。

5. 用自备PBS洗涤白细胞两次,得到的白细胞沉淀用于mtDNA提取。

柱式动物线粒体DNA提取试剂盒(PCR级)四:mtDNA提取

5.在细胞沉淀或剪碎的组织中加入250μL冰浴的溶液A,充分吹打分散。如果是剪碎的组织,不要等成块的组织溶解即可继续下步操作。

6. 加入250μL常温的溶液B(如果溶液B有沉淀,用前须37℃加热溶解后冷却到室温方可使用),温和反复颠倒混匀10次。千万不要剧烈振荡。

7. 冰上放置6-8分钟。注意不要超过8分钟。

8. 加入350μL冰浴的溶液C,温和混匀4-6次,可见白色沉淀物产生,然后放冰上放置20-25分钟。

9.室温12000~15000g离心10分钟,小心将上清液转移到离心吸附柱中。由于此时的溶液比重较大,有时候出现沉淀漂浮是正常现象,取上清时避开漂浮的沉淀即可。

10. 静置5分钟以让DNA与离心吸附柱充分结合,此步十分重要。

11.室温12000~15000g离心1分钟,弃收集管中的废液。

12. 加入500μL的通用洗柱液,室温12000~15000g离心1分钟,弃收集管中废液。

注意:通用洗柱液中含乙醇,用后需要将盖拧紧存放,否则乙醇会挥发。

13. 重复上步1次。

14.室温12000~15000g离心1分钟,甩干残留液体。此步不能省略,否则残留乙醇会影响DNA的后续使用(如DNA上样时不能沉淀到加样孔中)。

15. 将离心吸附柱置于一个新的1.5mL塑料离心管中,加入30-50μL 65-80℃预热的DNA洗脱液,室温放置2分钟。常温的DNA洗脱液也可以用于洗脱,但产量稍微有所降低。

16.室温12000~15000g离心1分钟,离心管底溶液即mtDNA。

17. 由于本公司离心吸附柱结合DNA能力较强,如果再加30-50μL DNA洗脱液到离心吸附柱中,往往还能洗脱下很多mtDNA(相当于次洗脱的20-30%),但注意不要使用上步得到的mtDNA溶液来洗脱。

18. 12000~15000g离心1分钟,离心管底溶液即线粒体DNA。每107个动物细胞一般能得到100ng左右的mtDNA,每克组织一般能得到3-5μg mtDNA。如果DNA需要浓缩,可以使用本公司的核酸浓缩剂。

19. 由于DNA机械断裂,电泳时DNA可能不呈现专一的带,但此mtDNA溶液可以直接用于PCR。

产品留言

标题

联系人

联系电话

内容

验证码

点击换一张

注：1.可以使用快捷键Alt+S或Ctrl+Enter发送信息!
2.如有必要,请您留下您的详细联系方式!