产品特点：
1、公司产品仅用于科研不需要单独纯化线粒体，柱式法纯化，操作简单快捷。
2、得到的mtDNA可以直接用于PCR和酶切。
3、每107个动物细胞一般能得到100ng左右的mtDNA，每克组织一般能得到3～5μg mtDNA。
注意：本产品只适合于动物材料，不适合于植物材料，因为植物线粒体DNA一般都十分巨大,非常难提。
|
产品名称
|
转基因植物Cry1A(c)基因检测试剂盒(荧光-PCR法)
|
|
规格
|
50T
|
|
货号
|
FS-01P99818
|
操作流程:
1.从室温平衡20min后的铝箔袋中取出所需板条，剩余板条用自封袋密封放回4℃。
2.设置标准品孔和样本孔，标准品孔各加不同浓度的标准品50μL；
3.样本孔中加入待测样本50μL；空白孔不加。
4.除空白孔外，标准品孔和样本孔中每孔加入辣根过氧化物酶（HRP）标记的检测抗体100μL，用封板膜封住反应孔，37℃水浴锅或恒温箱温育60min。
5.弃去液体，吸水纸上拍干，每孔加满洗涤液（350μL），静置1min，甩去洗涤液，吸水纸上拍干，如此重复洗板5次（也可用洗板机洗板）。
6.每孔加入底物A、B各50μL，37℃避光孵育15min。
7.每孔加入终止液50μL，15min内，在450nm波长处测定各孔的OD值。
产品组成:
|
成分
|
规格
|
|
溶液A
|
13ml
|
|
溶液B
|
13ml
|
|
溶液C
|
18ml
|
|
离心吸附柱
|
50套
|
|
通用洗柱液
|
50ml
|
|
DNA洗脱液
|
10ml
|
|
说明书
|
1份
|
使用方法:
一:培养细胞预处理
1. 用自备的0.25%胰酶消化液处理约107个培养细胞,离心收集后弃上清。
2. 用PBS或TBS等缓冲液洗涤细胞两次,离心得到的细胞沉淀直接用于mtDNA提取。
二:组织细胞预处理
3. 用剪刀将1g新鲜的动物组织剪碎(芝麻大小*),转移到1.5mL塑料离心管中,用于mtDNA提取。注意:*不要使用冻存的动物组织,因为冻凝过程中形成的冰晶会将线粒体刺破,使其DNA释放出来被胞浆中的DNA酶降解,影响回收率。
三:血液预处理
4. 将3-5mL抗凝外周血静置30分钟或低速离心5分钟,取白细胞层。
5. 用自备PBS洗涤白细胞两次,得到的白细胞沉淀用于mtDNA提取。
柱式动物线粒体DNA提取试剂盒(PCR级)四:mtDNA提取
5.在细胞沉淀或剪碎的组织中加入250μL冰浴的溶液A,充分吹打分散。如果是剪碎的组织,不要等成块的组织溶解即可继续下步操作。
6. 加入250μL常温的溶液B(如果溶液B有沉淀,用前须37℃加热溶解后冷却到室温方可使用),温和反复颠倒混匀10次。千万不要剧烈振荡。
7. 冰上放置6-8分钟。注意不要超过8分钟。
8. 加入350μL冰浴的溶液C,温和混匀4-6次,可见白色沉淀物产生,然后放冰上放置20-25分钟。
9.室温12000~15000g离心10分钟,小心将上清液转移到离心吸附柱中。由于此时的溶液比重较大,有时候出现沉淀漂浮是正常现象,取上清时避开漂浮的沉淀即可。
10. 静置5分钟以让DNA与离心吸附柱充分结合,此步十分重要。
11.室温12000~15000g离心1分钟,弃收集管中的废液。
12. 加入500μL的通用洗柱液,室温12000~15000g离心1分钟,弃收集管中废液。
注意:通用洗柱液中含乙醇,用后需要将盖拧紧存放,否则乙醇会挥发。
13. 重复上步1次。
14.室温12000~15000g离心1分钟,甩干残留液体。此步不能省略,否则残留乙醇会影响DNA的后续使用(如DNA上样时不能沉淀到加样孔中)。
15. 将离心吸附柱置于一个新的1.5mL塑料离心管中,加入30-50μL 65-80℃预热的DNA洗脱液,室温放置2分钟。常温的DNA洗脱液也可以用于洗脱,但产量稍微有所降低。
16.室温12000~15000g离心1分钟,离心管底溶液即mtDNA。
17. 由于本公司离心吸附柱结合DNA能力较强,如果再加30-50μL DNA洗脱液到离心吸附柱中,往往还能洗脱下很多mtDNA(相当于次洗脱的20-30%),但注意不要使用上步得到的mtDNA溶液来洗脱。
18. 12000~15000g离心1分钟,离心管底溶液即线粒体DNA。每107个动物细胞一般能得到100ng左右的mtDNA,每克组织一般能得到3-5μg mtDNA。如果DNA需要浓缩,可以使用本公司的核酸浓缩剂。
19. 由于DNA机械断裂,电泳时DNA可能不呈现专一的带,但此mtDNA溶液可以直接用于PCR。下列是公司正热销的产品：
细胞半胱氨酸蛋白酶-6（CASPASE-6）活性荧光定量检测试剂盒20次乳糖复发酵培养基 3-[（3-胆固醇氨丙基）二甲基氨基]-2-羟基-1-丙磺酸
组织半胱氨酸蛋白酶-6（CASPASE-6）活性荧光定量检测试剂盒20次去氧胆酸盐琼脂 戊烷磺酸钠
细胞半胱氨酸蛋白酶-7（CASPASE-7）活性比色法定量检测试剂盒20次MR-VP培养基 3-苯丙醇
组织半胱氨酸蛋白酶-7（CASPASE-7）活性比色法定量检测试剂盒20次结晶紫中性红胆盐琼脂 (VRBA) 葡萄糖固态中
细胞半胱氨酸蛋白酶-7（CASPASE-7）活性荧光定量检测试剂盒20次西蒙氏枸橼酸盐琼脂 胰酪胨大豆多粘菌素肉汤基础 用于蜡样芽孢杆菌的MPN值测定 （SN标准）
组织半胱氨酸蛋白酶-7（CASPASE-7）活性荧光定量检测试剂盒20次肠道菌计数琼脂 (VRBDA) 强化梭菌培养基（RCM）用于梭菌的分离培养（Merck方法）
细胞半胱氨酸蛋白酶-8（CASPASE-8）活性比色法定量检测试剂盒20次菌种保存培养基 3 %NaCl胰胨水
组织半胱氨酸蛋白酶-8（CASPASE-8）活性比色法定量检测试剂盒20次乳糖蛋白胨培养液 白桦脂酸 Betulinic acid
细胞半胱氨酸蛋白酶-8（CASPASE-8）活性荧光定量检测试剂盒20次Cary-Blair 氏运送培养基 DL-高半胱氨酸
组织半胱氨酸蛋白酶-8（CASPASE-8）活性荧光定量检测试剂盒20次哥伦比亚血琼脂基础核糖核酸酶T1
细胞半胱氨酸蛋白酶-9（CASPASE-9）活性比色法定量检测试剂盒20次亮绿乳糖培养基 柠檬酸锌
组织半胱氨酸蛋白酶-9（CASPASE-9）活性比色法定量检测试剂盒20次肠道菌增菌肉汤(EE肉汤) 人食欲素/阿立新B（OX-B）ELISA试剂盒,OX-B ELISA kit
细胞半胱氨酸蛋白酶-9（CASPASE-9）活性荧光定量检测试剂盒20次TTC营养琼脂 人抗胰蛋白酶（AT）ELISA试剂盒,AT ELISA
组织半胱氨酸蛋白酶-9（CASPASE-9）活性荧光定量检测试剂盒20次LB肉汤 人EB病IgM（EBv IgM）ELISA试剂盒,EBv IgM ELISA
细胞半胱氨酸蛋白酶-10（CASPASE-10）活性比色法定量检测试剂盒20次LB营养琼脂 大鼠柠檬酸合酶（CS）ELISA试剂盒,
转基因植物Cry1A(c)基因检测试剂���(荧光-PCR法)CC16 ELISA Kit 大鼠克拉拉蛋白氯化钴试纸 100条/盒
EPI ELISA Kit 大鼠肾上腺素邻苯二甲酸二正戊酯 CP,97%
MPO-ANCA IgG ELISA Kit 大鼠髓过氧化物酶特异性抗中性粒胞质抗体IgG邻苯二甲酸二正戊酯 98%
C3 ELISA Kit 大鼠补体蛋白3邻苯二甲酸二正戊酯 分析标准品
AZT ELISA Kit 大鼠叠氮胸苷二癸 97%
DA ELISA Kit 大鼠多巴铅试剂 AR
U-TSH ELISA Kit 大鼠高灵敏度促甲状腺2.4-二酚 Indicator（剧品）
u-T4 ELISA Kit 大鼠高敏甲状腺素砷试剂 AR,99.0%
- 温馨提示：为规避购买风险，建议您在购买前务必确认供应商资质与产品质量。
- 免责申明：以上内容为注册会员自行发布，若信息的真实性、合法性存在争议，平台将会监督协助处理，欢迎举报