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产品资料

pBM27 Toposmart Cloning Kit(gateway系统入门 TOPO克隆载体)

pBM27 Toposmart Cloning Kit(gateway系统入门 TOPO克隆载体)
  • 如果您对该产品感兴趣的话,可以
  • 产品名称:pBM27 Toposmart Cloning Kit(gateway系统入门 TOPO克隆载体)
  • 产品型号:A-Hc2207
  • 产品展商:抚生
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简单介绍
pBM27 Toposmart Cloning Kit(gateway系统入门 TOPO克隆载体)公司正在出售的产品:T5核酸外切酶外泌体RNA提取试剂盒核酸提取试剂盒(带证,拭子预充)测序后纯化试剂盒 ( 磁珠法)Green qPCR MasterMix(通用型) 荧光定量qPCR Mix(通用)HotStart Bst 4.2 Basic Mix(可冻干)热敏双链DNA特异性核酸酶(HL dsDNase)
产品描述

商品属性:


货号

规格

产品名称

A-Hc2207-20 次 ×3

20 次 ×3

pBM27 Toposmart Cloning Kit(gateway系统入门 TOPO克隆载体)

A-Hc2207-20 次

20 次

pBM27 Toposmart Cloning Kit(gateway系统入门 TOPO克隆载体)

储存条件:


pBM27 Toposmart Cloning Kit(gateway系统入门 TOPO克隆载体)-20℃保存

产品介绍:


利用痘苗病毒的拓扑异构酶I(Topoisomerase I)的切割再连接的特点将PCR产物定向克隆到线性化的pBM27载体中。适用于克隆由Pfu、sPfu、KOD、Xerox、Phusion和Q5等高保真DNA聚合酶扩增的平末端PCR产物。pBM27载体类似于invitrogen公司的pENTR/D-TOPO入门载体,具有attL1和attL2,为gateway系统中的入门载体。引物M13F(-21)和M13R可用于菌落PCR和测序鉴定。

 

产品特点:


(1)连接反应仅需 5 分钟。
(2)只适合平末端 PCR 产物的快速、高效、定向克隆。
(3)载体采用了新的制备工艺,零背景,无需蓝白斑筛选
(4)可在基因的 C 端中融合 Flag 标签序列。
(5)载体为壮观霉素抗性。

注意事项:


(1) 引物要求:PCR 引物 5���端不能进行磷酸化修饰,普通商业化引物即可。上游引物的 5’端添加 CACC 四个碱基(CACC 为真核表达所必需的 Kozak 序列)。如果目的蛋白需要在 C 端带 FLAG 标签,下游引物则需要去掉基因本身的终止密码子(3 个碱基),目的蛋白的翻译终止由 FLAG 标签的终止密码子 TAA(位于 Xho I 酶切位点前)来实现。
(2) DNA 聚合酶:选用 Pfu、sPfu、Phusion、Q5、KOD 和 Xerox 等高保真 DNA 聚合酶用于 PCR 扩增。
(3)连接时间:5-15 分钟,一般为 15 分钟。
(4)连接温度:室温 (22℃-37℃),可使用PCR仪控温。*佳反应温度为25℃。若片段有高GC等复杂结构,可在37℃反应。
(5)产物要求:为保证PCR产物完整,建议72℃后延伸5-10分钟。连接前使用琼脂糖凝胶电泳检测PCR产物的质量和纯度,如PCR产物为非单一性条带,目的片段一定要切胶回收。如PCR产物为单一条带,无引物二聚体,可以取1-3?l的PCR产物直接连接。但若扩增模板为质粒DNA,应注意质粒的抗性。由于pBM27载体为壮观霉素抗性,以壮观霉素抗性的模板质粒扩增的PCR产物应切胶回收后再连接。
(6)片段用量:胶回收的DNA片段一般使用量为50-100ng。对照片段为5’端带CACC四个碱基的全长EGFP基因的平末端产物。
(7)往M13F(-21)和M13R引物干粉管加120?l**水即为5?M浓度的引物。

公司正在出售的产品:


5‘ DNA 腺苷化试剂盒

酯化梭状芽孢杆菌PCR试剂盒

微量细胞RNA提取试剂盒(磁珠法)

菊花染料法PCR鉴定试剂盒

Tth MutL Protein

牛呼吸道合胞病毒PCR检测试剂盒

Tli (exo-) DNA Polymerase(5U/ul)

莱氏泰勒虫PCR检测试剂盒

唾液DNA提取试剂盒

口蹄疫病毒SAT1亚型RT-PCR试剂盒

拭子DNA磁珠法提取试剂盒

人核糖核suanmeiP基因PCR试剂盒

染料法荧光定量PCR试剂盒(化学修饰)

人疱疹病毒6PCR检测试剂盒

平板涂布玻璃珠(无菌)

狂犬病病毒通用PCR检测试剂盒

链霉亲和素磁珠

溃蚀齿密螺旋体PCR检测试剂盒

甲酰胺嘧啶-DNA糖基化酶(Fpg)

人通用PCR检测试剂盒

高纯质粒小提中量快速提取试剂盒

禽结核杆菌PCR检测试剂盒

冻干品Benzonase核酸酶

磁珠法拭子微生物核酸提取试剂盒(预装)

半乳糖变旋meiELISA试剂盒

测序后纯化试剂盒 ( 磁珠法)

pBM27 Toposmart Cloning Kit(gateway系统入门 TOPO克隆载体)CD160分子ELISA试剂盒

WB Super RIPA Lysis Buffer

胞浆抗蛋白水解mei2ELISA试剂盒

 

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