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产品名称
A-Hc2235-100U
100U
Topoisomerase I (Vaccinia virus)
储存条件:
Topoisomerase I (Vaccinia virus)储存:-20°C 可保存 3 年。 产品介绍: 该 Topoisomerase I 来源于牛痘病毒(vaccinia virus),通过基因重组方案制备纯化。其能解旋DNA的超螺旋结构,除此外其能识别并切割双链 DNA 末端 [5’C(T)CCTT↓],并且与 DNA 形成共价连接形成稳定复合物。该共价复合物遇到DNA 的5’-OH基团后,重新连接形成完整 DNA 链。因此,使用该酶可作为 DNA 连接的有效工具,可用于 DNA 的载体连接(TOPO 克隆载体制备)、接头连接(NGS 建库)等实验。 应用: DNA-载体连接 接头连接 储存: -20°C 可保存 3 年。 TOPO 酶保存液:20mM Tris-HCl,pH7.8,150mM NaCl, 0.1% Tween20,50%甘油。 反应实例 1(质粒解旋) 10×TOPO Buffer 2.5 μl 超螺旋质粒 DNA 1-20 μg Vaccinia TOPO (5pmol/μl) 1 μl ddH2O Up to 25 ul 37°C 孵育 5-15min。 反应实例 2(接头连接) 10×TOPO Buffer 2.5 μl 2 M NaCl 2.5 μl 接头 A(含 CCCTT) 5-100 pmol 接头 B(含 5‘OH) 5-100 pmol Vaccinia TOPO (5pmol/μl) 1 μl ddH2O Up to 25 ul 37°C 孵育 5-15min。 注意:(1)双链接头 A 通常 5’做 NH2 封闭修饰,以防止自连接;接头 A 的 CCCTT 后通常包含 5-12bp 尾巴,再长的尾巴会导致连接效率大幅下降; (2)双链接头 B 的 5’端必须包含-OH。 (3)由于该酶应用广泛,在不同的实验中使用策略不同,需要灵活运用。该类实验请根据文献)进行调整。 公司正在出售的产品:
产品介绍:
该 Topoisomerase I 来源于牛痘病毒(vaccinia virus),通过基因重组方案制备纯化。其能解旋DNA的超螺旋结构,除此外其能识别并切割双链 DNA 末端 [5’C(T)CCTT↓],并且与 DNA 形成共价连接形成稳定复合物。该共价复合物遇到DNA 的5’-OH基团后,重新连接形成完整 DNA 链。因此,使用该酶可作为 DNA 连接的有效工具,可用于 DNA 的载体连接(TOPO 克隆载体制备)、接头连接(NGS 建库)等实验。
应用:
DNA-载体连接 接头连接
储存:
-20°C 可保存 3 年。 TOPO 酶保存液:20mM Tris-HCl,pH7.8,150mM NaCl, 0.1% Tween20,50%甘油。 反应实例 1(质粒解旋) 10×TOPO Buffer 2.5 μl 超螺旋质粒 DNA 1-20 μg Vaccinia TOPO (5pmol/μl) 1 μl ddH2O Up to 25 ul 37°C 孵育 5-15min。 反应实例 2(接头连接) 10×TOPO Buffer 2.5 μl 2 M NaCl 2.5 μl 接头 A(含 CCCTT) 5-100 pmol 接头 B(含 5‘OH) 5-100 pmol Vaccinia TOPO (5pmol/μl) 1 μl ddH2O Up to 25 ul 37°C 孵育 5-15min。 注意:(1)双链接头 A 通常 5’做 NH2 封闭修饰,以防止自连接;接头 A 的 CCCTT 后通常包含 5-12bp 尾巴,再长的尾巴会导致连接效率大幅下降; (2)双链接头 B 的 5’端必须包含-OH。 (3)由于该酶应用广泛,在不同的实验中使用策略不同,需要灵活运用。该类实验请根据文献)进行调整。
公司正在出售的产品:
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