首页 >>> 产品目录 >>> PCR相关试剂 >>> 蛋白相关
仪表展览网 >>> 展馆展区 >>> pCold-SUMO-10His原核蛋白表达试剂盒
> pCold-SUMO-10His原核蛋白表达试剂盒

产品资料

pCold-SUMO-10His原核蛋白表达试剂盒

pCold-SUMO-10His原核蛋白表达试剂盒
  • 如果您对该产品感兴趣的话,可以
  • 产品名称:pCold-SUMO-10His原核蛋白表达试剂盒
  • 产品型号:A-PJ1109
  • 产品展商:抚生
  • 产品文档:无相关文档
简单介绍
pCold-SUMO-10His原核蛋白表达试剂盒公司正在出售的产品:快速病毒DNA/RNA 纯化试剂盒(磁珠法)pBM17A Toposmart Cloning Kit(T载体 TOPO克隆载体)Hi T7 RNA PolymeraseTth RecA蛋白凝血块DNA提取试剂盒快捷型植物基因组 DNA 提取试剂盒Green qPCR MasterMix(Low ROX) 低ROX校正qPCR荧光定量Mix-染料法
产品描述

商品属性:


货号

规格

产品名称

A-PJ1109-1 kit

1 kit

pCold-SUMO-10His原核蛋白表达试剂盒

产品介绍:


pCold-SUMO-10His原核蛋白表达试剂盒本试剂盒所包含的原核表达载体(pCold-SUMO-10His)是在 pCold-SUMO 载体基础上改造而成( **),

该载体启动子(CS Promoter)来源于南极嗜冷**,在低温下(15 度)才能启动蛋白的表达。低温下**生长缓慢,使得蛋白合成速度减慢,从而*大限度的提高了蛋白正确折叠的几率,提高了蛋白可溶性表达,增强了活性蛋白的表达比率。该表达系统所包含的 SUMO tag 可以极大地提高小分子量蛋白的表达量,而且进一步提高了蛋白的可溶表达几率。同时,TEE 信号肽可增强冷启动子调控下目的蛋白的高表达。
改进后的 pCold-SUMO-10His 载体,其 SUMO 蛋白标签含有 10 个组氨酸标签(10His tag),使其结合 Ni-NTA 的能力更强。与较早版本的 pCold-SUMO 表达系统相比,pCold-SUMO-10His 表达系统在保留了原有统的蛋白可溶性能**能力、高特异性剪切能力的情况下,对 Ni-NTA 结合能力的得到明显提高。其对 Ni-NTA 结合能力的提高,

在以下三个方面改善了**重组蛋白的性能:

(1)提高了粗蛋白样品中目标蛋白的捕获能力,从而提高纯化产量;

(2)在蛋白纯化过程中可以
使用更高浓度的咪唑进行漂洗,去杂蛋白的能力明显提升,从而获得更高纯度的重组蛋白;

(3)在重组蛋白酶切去除 SUMO标签后,利用 Ni-NTA 去除 SUMO 标签更为彻底,获得纯度更高的无标签目标蛋白。
关于宿主菌的使用:本试剂盒配备了两种宿主表达菌感受态细胞,Lyophilized Arctic (DE3)感受态和 LyophilizedBL21(DE3) Chaprone 感受态,两种感受态均为冻干品形式可长期保存在-20℃,效价无明显下降(2~10X10e5 cfu/μg)。
通常在质粒载体的构建完成,并测序验证后,可将重组质粒转入该感受态进行蛋白表达。该宿主菌仅为蛋白表达**用,不可以进行载体构建和质粒的提取制备。由于 pCold-SUMO 系统的高可溶性表达特性,在大多数情况下重组蛋白在 LyophilizedArctic (DE3)感受态即可获得理想的可溶表达,因此**实验请选用 Lyophilized Arctic (DE3)感受态宿主菌。

在 LyophilizedArctic (DE3)感受态宿主菌可溶表达效果不理想的情况下,再选用操作相对复杂的、带有辅助折叠伴侣分子的 LyophilizedBL21(DE3)Chaprone 宿主菌,该系统可获得*佳的可溶表达。除此外,pCold-SUMO 系统在常规 BL21(DE3)、BL21(DE3)plys等宿主菌内均可获得可观的可溶性表达。
关于蛋白酶的使用:试剂盒配备了 SUMO 蛋白酶(酵母来源,也称为 UIP 蛋白酶)和 rTEV 蛋白酶,在**步载体构建过程中需要评估、考虑两个蛋白酶的使用策略。SUMO 蛋白酶识别蛋白结构,切割活性高、酶切完全,对于需要去除 Tag的重组蛋白其是优选。个别情况下 SUMO 标签的结构会受到 C 端重组目标蛋白的影响,使得 SUMO 蛋白酶对重组融合蛋白的切割效率降低、甚至是无效,此时再选用 rTEV 蛋白酶进行酶切。由于 rTEV 蛋白酶识别氨基酸序列,个别重组融合蛋白会包埋识别序列,因此也会导致蛋白酶切效率下降。由于重组融合蛋白结构的无法预测性,因此在实��过程中两种蛋白酶的酶切均需要测试。无论如何,通常 SUMO 蛋白酶具有更高的效率,是优选。本试剂盒配备的 SUMO 蛋白酶可以识别 SUMO标签结构(SDSEVNQEAKPEVKPEVKPETHINLKVSDGSSEIFFKIKKTTPLRRLMEAFAKRQGKEMDSLRFLYDGIRIQADQTPEDLDMEDNDIIEAHREQIGG)切割位点位于 QIGG 之后。SUMO 蛋白酶含有双 His 标签,保证了 SUMO 蛋白酶高亲力的结合 Ni-NTA,以*大限度的去除 SUMO 蛋白酶(分子量约 26kD)。rTEV 蛋白酶可以识别 SUMO 标签后面的 Glu-AsnLeu-Tyr-Phe-Gln-Gly (ENLYFQG)氨基酸序列,并在识别位点 Gln-Gly(QG)之间进行切割,从而去除 SUMO 标签。rTEV 蛋白酶含有 6XHis 标签(分子量约 30kD),可使用 Ni-NTA 纯化介质去除。
本试剂盒配备的 pCold-SUMO-10His-Positive Plasmid 为蛋白表达阳性质粒,该质粒含有 43kD 的目标蛋白,其与SUMO 标签(19kD)融合后分子量约为 62kD。该表达质粒在 Arctic (DE3)中即可获得良好的表达。其可以仅可做为表达、酶切实验的阳性对照品。

 

公司正在出售的产品:


pBM40 Toposmart Cloning Kit(TOPO克隆载体 真核表达)

同性螺杆菌PCR试剂盒

HotStart Bst4.2 DNA/RNA聚合酶(8U/ul)无甘油

犬腺病毒PCR检测试剂盒直销

2×Taq PCR MasterMix( 含绿染料 ) 5×Taq Mix预混液

猪内源性逆转录病毒PCR检测试剂盒

2×Pfu PCR MasterMix(含染料)2×Taq Mix高保真预混液

大肠杆菌0157荧光PCR检测试剂盒

Hi T7 RNA Polymerase

麻疹病毒RT-PCR试剂盒

Gibson无缝克隆试剂盒

禽轮状病毒RT-PCR试剂盒(停)

Elite唾液保存液

禽脑脊髓炎病毒(AEV)核suan检测试剂盒

E.coli MutL protein

麻风杆菌PCR检测试剂盒

Dnase I(Rnase free)

驴源性成分PCR试剂盒

CTAB 植物基因组 DNA 快速提取试剂盒(磁珠法)

病毒H/H亚型(AIV-H/H)核suan检测试剂盒

Bst 4.0 HNB Bead

转基因植物NOS基因PCR检测试剂盒

Bst 2.1 DNA/RNA polymerase

迟现抗原4ELISA试剂盒

6min Fast 1st cDNA Synthesis Kit

沉默调节蛋白5ELISA试剂盒

4×Taq PCR MasterMix(purple)

pCold-SUMO-10His原核蛋白表达试剂盒CREB/ATFBZIP转录因子ELISA试剂盒

2min DNA/RNA直提试剂盒

穿孔suELISA试剂盒

 

产品留言
标题
联系人
联系电话
内容
验证码
点击换一张
注:1.可以使用快捷键Alt+S或Ctrl+Enter发送信息!
2.如有必要,请您留下您的详细联系方式!
  • 温馨提示:为规避购买风险,建议您在购买前务必确认供应商资质与产品质量。
  • 免责申明:以上内容为注册会员自行发布,若信息的真实性、合法性存在争议,平台将会监督协助处理,欢迎举报
产品留言
标题
内容
联系人
联系电话
电子邮件
公司名称
联系地址
验证码
点击换一张
注:1.可以使用快捷键Alt+S或Ctrl+Enter发送信息!
2.如有必要,请您留下您的详细联系方式!