商品属性:
货号
规格
产品名称
A-PJ1117-100U
100U
南极热敏UDG
A-PJ1117-500U
500U
储存条件:
南极热敏UDG置于-20°C 可保存 2 年。
产品介绍:
南极热敏 UDG 是来源于嗜冷海洋**经大肠杆菌表达纯化的的重组蛋白。 该酶能有效地水解单链或双链DNA 上的尿嘧啶,产生的缺嘧啶位点,在高温或高 pH下,极易水解断裂。该酶对 RNA 无活性,主要用于 PCR扩增产物的防污染。大肠杆菌来源的尿嘧啶-DNA 糖基化酶较为耐热,经 95℃10min 处理仍会残留有少量的尿嘧啶-DNA 糖基化酶活性,导致含有 dU 碱基的 PCR 产物的降解。 而来源于嗜冷海洋**的热敏型 UDG 在 50℃5min 即完全失活,在进行 PCR 扩增前,在 PCR 混合液中添加尿嘧啶-DNA 糖基化酶(热敏性),25℃ 2min 即可消除以往 PCR 产物的残留污染,由于尿嘧啶-DNA 糖基化酶(热敏性)在 PCR 循环的 94℃变性一步便可被灭活,因此不会影响新的含 dU 的 PCR 产物。
活性定义:
在标准反应体系下,37°C 每分钟催化 60 pmol尿嘧啶从含尿嘧啶的双链 DNA 上释放所需要的酶量为一个活性单位。 反应 Buffer: ThermoLabile Uracil DNA Glycosylase (UDG)与绝大多数的 PCR 聚合酶反应缓冲液都是兼容的,但在高离子浓度(>100 mM)下活性会受到抑制。在防污染 PCR 中的使用浓度推荐为 10 mU-50 mU/μ(l 25℃下作用 2min 即可),在不同的缓冲系统下可能会有差别。 酶储存液:20 mM Tris-HCl, 50 mM NaCl, 1 mM DTT, ,50% Glycerol, 0.1% (w/v) Triton X-100, pH 7.5。 热失活:50°C,5min。
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