(1)原代细胞的培养方法
器官培养是指从供体取得器官或组织块后，不进行组织分离而直接在体外的特定环境条件下培养，器官培养可保持器官组织的相对完整性，可用于重点观察细胞间的联系、排列情况和相互影响，以及局部环境的生物调节作用。
组织来源
卵巢组织
规格
5×10⁵Cells/T25培养瓶
细胞分类
人原代细胞
培养条件
气相：空气，95%；CO2，5%
生长特性
贴壁
细胞形态
成纤维细胞样
细胞简介：
人卵巢成纤维细胞分离自卵巢组织；卵巢是雌性动物的生殖器官，卵巢的功能是产生卵以及类固醇。卵巢的位置与睾丸相同，仅左侧发育（右侧已退化），呈葡萄状，均为处于不同发育时期的卵泡，卵泡呈黄色，卵巢表面密布血管。卵巢的大小与年龄和产卵期有关。大多数脊椎动物有两个卵巢，但是部分鱼类的两个卵巢融合为单个结构，而所有鸟类只有左侧卵巢有机能。卵巢是位于两侧的一对卵圆形的生殖器官，它的外表有一层上皮组织，其下方有薄层的结缔组织。卵巢的内部结构可分为皮质和髓质。皮质位于卵巢的周围部分，主要由卵泡和结缔组织构成；髓质位于中央，由疏松结缔组织构成，其中有许多血管、管和神经。成纤维细胞（Fibroblast）是疏松结缔组织的主要细胞成分，由胚胎时期的间充质细胞分化而来；成纤维细胞较大，轮廓清楚，多为突起的纺锤形或星形的扁平状结构，其细胞核呈规则的卵圆形，核仁大而明显。成纤维细胞功能活动旺盛，细胞质嗜弱碱性，具明显的蛋白质合成和分泌活动，在一定条件下，它可以实现跟纤维细胞的互相转化；成纤维细胞对不同程度的细胞变性、坏死和组织缺损的修复有着十分重要的作用。刚分离的卵巢成纤维细胞呈圆形、折光性良好，悬浮于培养基中。30min细胞贴壁，其中部分开始伸出伪足，表现为小的突起；6h后细胞基本贴壁完全，伸展成梭形，胞核清晰，分布较均匀，散在生长，不聚集成团；细胞生长迅速，5-7天即呈融合状态，细胞排列紧密，有的交叉重叠生长，平坦、胞体较大，细胞质透明，细胞核较大，呈椭圆形，颜色淡。细胞融合，并彼此连接成网状；细胞呈突起的纺锤形或星形的扁平分布。卵巢成纤维细胞大多分布于卵巢表面，其主要特点和功能：①成纤维细胞在体外易于培养；②卵巢损伤后，成纤维细胞能修复和重塑卵巢；③能在卵巢炎症时有效控制炎症扩散。
方法简介：
公司实验室分离的人卵巢成纤维细胞采用胰蛋白酶-胶原酶混合消化法结合差速贴壁法制备而来，细胞总量约为5×10?cells/瓶。
质量检测
公司实验室分离的人卵巢成纤维细胞经Vimentin荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、、酵母和等。
培养信息：
培养基 含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等
换液频率 每2-3天换液一次
生长特性 贴壁
细胞形态 成纤维细胞样
传代特性 可传5代左右；3代以内状态佳
消化液 0.25%胰蛋白酶
培养条件 气相：空气，95%；CO2，5%
牛Ⅲ型前胶原氨基末端肽(PⅢNP)elisa检测试剂盒
整合素α9抗体
Integrin alpha 9
膜粘连蛋白9抗体
Annexin A9
PDGF-A蛋白表达西方杂交分析试剂盒
γ氨基丁酸(GABA)elisa分析检测试剂盒
北方杂交完全试剂盒
小鼠骨涎蛋白(BSP)elisa检测试剂盒
MRGPRH蛋白抗体
MRGPRH
20号染色体开放阅读框144抗体
C20ORF144
转导素β1X连锁蛋白抗体 Anti-TBL1X
结合蛋白4抗体 Anti-RBP4
核孔蛋白50抗体 Anti-NUP50
滑膜肉瘤X断点蛋白5抗体 Anti-SSX5
泛素蛋白连接酶G2抗体
Ube2G2
防御素β-113/β-defensin 113抗体
DEFB113
丝裂原活化蛋白激酶激酶4抗体 Anti-SEK1/MKK4/MAP2K4
磷酸化一氧化氮合成酶3（内皮型）抗体 Anti-Phospho-eNOS (Thr495)
磷酸化蛋白激酶C mu型抗体 Anti-phospho-PRKD1(Tyr463)
味觉受体蛋白家族2亚基60抗体 Anti-T2R60
大鼠甘油三酯(TG)elisa分析检测试剂盒
人卵巢成纤维细胞白细胞介素17受体E样蛋白抗体
IL17REL
1号染色体开放阅读框149抗体
C1orf149
原代细胞的分离方法：
一、悬浮细胞的分离方法