(1)原代细胞的培养方法
器官培养是指从供体取得器官或组织块后，不进行组织分离而直接在体外的特定环境条件下培养，器官培养可保持器官组织的相对完整性，可用于重点观察细胞间的联系、排列情况和相互影响，以及局部环境的生物调节作用。
组织来源
食管
规格
5×10⁵Cells/T25培养瓶
细胞分类
人原代细胞
培养条件
气相：空气，95%；CO2，5%
生长特性
贴壁
细胞形态
成纤维细胞样
细胞简介：
人食管成纤维细胞分离自食管组织；食管是咽和胃之间的消化管，食管在系统发生上起初很短，随着颈部的伸长和心肺的下降，而逐渐增长。食管可分为颈段、胸段和腹段。脊椎动物食管的颈段位于气管背后和脊柱前端，胸段位于左、右肺之间的纵膈内，胸段通过膈孔与腹腔内腹相连，腹段很短与胃相连。在发育过程中，食管的上皮细胞增殖，由单层变为复层，食管使管腔变狭窄，甚至一度闭锁，以后管腔又重新出现。哺乳动物的食管结构上由内向外分四层：黏膜层、黏膜下层、肌层和外膜。其中，黏膜层，包括上皮、固有层和黏膜肌层。食管的外膜，由疏松结缔组织构成，富有血管、管及神经。主要包含食管成纤维细胞，成纤维细胞（Fibroblast）是疏松结缔组织的主要细胞成分，由胚胎时期的间充质细胞分化而来。成纤维细胞较大，轮廓清楚，多为突起的纺锤形或星形的扁平状结构，其细胞核呈规则的卵圆形，核仁大而明显。成纤维细胞功能活动旺盛，细胞质嗜弱碱性，具明显的蛋白质合成和分泌活动，在一定条件下，它可以实现跟纤维细胞的互相转化；成纤维细胞对不同程度的细胞变性、坏死和组织缺损的修复有着十分重要的作用。刚分离的表皮成纤维细胞呈圆形、折光性良好，悬浮于培养基中。30min细胞贴壁，其中部分开始伸出伪足，表现为小的突起；6h后细胞基本贴壁完全，伸展成梭形，胞核清晰，分布较均匀，散在生长，不聚集成团；细胞生长迅速，5-7天即呈融合状态，细胞排列紧密，有的交叉重叠生长，平坦、胞体较大，细胞质透明，细胞核较大，呈椭圆形，颜色淡。细胞融合，并彼此连接成网状；细胞呈突起的纺锤形或星形的扁平分布。
方法简介：
实验室分离的人食管成纤维细胞采用胰蛋白酶 - 胶原酶混合消化法结合差速贴壁法制备而来，细胞总量约为5×10⁵cells/瓶。
质量检测
实验室分离的人食管成纤维细胞经Vimentin荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、、酵母和等。
培养信息：
培养基：基础培养基，含FBS、bFGF、Insulin、Penicillin、Streptomycin等
换液频率：每2-3天换液一次
生长特性：贴壁
细胞形态：成纤维细胞样
传代特性：可传3-5代左右；3代以内状态佳
消化液：0.25%胰蛋白酶
培养条件：气相：空气，95%；CO2，5%
人食管成纤维细胞体外培养周期有限；建议使用配套的生长培养基及正确的操作方法来培养，以此保证该细胞的佳培养状态。
F0F1-ATP酶/ATP合成酶测试盒 20管/10样
人超敏热休克蛋白60(HSP-60)elisa检测试剂盒
细胞磷酸二酯酶1（PDE1）活性酶连续循环光谱法定量检测试剂盒
小鼠糖皮质受体α(GR-α)elisa分析检测试剂盒
大鼠胶质细胞系来源的神经营养因子(GDNF)elisa分析检测试剂盒
驴雌二醇(E2)elisa分析检测试剂盒
冰冻切片游离毛地黄皂苷法（DIGITONIN）舒尔茨染色试剂盒
小鼠环磷酸腺苷(cAMP)elisa检测试剂盒
大鼠胞外铜锌超氧化物歧化酶(Cu/Zn-SOD/SOD3)elisa分析检测试剂盒
Avi-Tag 抗体 Avi-Tag
B细胞新型蛋白1抗体 BCNP
赖氨酸甲基化抗体 Methylated Lysine (di methyl , mono methyl )
亮氨酸拉链抑癌蛋白2抗体 LZTS2
α-乳清蛋白单克隆抗体 alpha Lactalbumin
样物质结合蛋白/细胞粘附分子样蛋白抗体 OPCML
细胞角蛋白2e抗体 Cytokeratin 2e
细胞色素P450ⅡE1抗体 CYP2E1
KRBA2蛋白抗体 KRBA2
MAP激酶相互作用丝氨酸/苏氨酸激酶1抗体 MNK1
热休克蛋白-22抗体 HSP22
溶菌酶样蛋白1抗体 LYZL1
干扰素-γ/IFN-γ抗体 IFN gamma
谷氨酸受体2B抗体 NMDAR2B
着丝粒蛋白T抗体 CENPT
肿瘤蛋白D53抗体 TPD52L1
大鼠膀胱肿瘤抗原(BTA)elisa检测试剂盒
人食管成纤维细胞大鼠细胞色素P450(CYP450)elisa检测试剂盒
细胞内核酸氧化8-羟基鸟苷（8-OHG）比色法测定试剂盒
一氧化氮NO测试盒化学法测NO2－ 50管/24样 比色法
可溶性总蛋白制备试剂盒
原代细胞的分离方法：
一、悬浮细胞的分离方法