(1)原代细胞的培养方法
器官培养是指从供体取得器官或组织块后,不进行组织分离而直接在体外的特定环境条件下培养,器官培养可保持器官组织的相对完整性,可用于重点观察细胞间的联系、排列情况和相互影响,以及局部环境的生物调节作用。
组织来源
心脏组织
规格
5×10⁵Cells/T25培养瓶
细胞分类
人原代细胞
培养条件
气相:空气,95%;CO2,5%
生长特性
贴壁
细胞形态
成纤维细胞样
细胞简介:
人心肌成纤维细胞分离自心脏组织;心脏由心肌细胞和非心肌细胞组成,非心肌细胞占细胞总数的70%,其中90%以上的非心肌细胞由心肌成纤维细胞组成。成纤维细胞(Fibroblast)是疏松结缔组织的主要细胞成分,由胚胎时期的间充质细胞分化而来。成纤维细胞较大,轮廓清楚,多为突起的纺锤形或星形的扁平状结构,其细胞核呈规则的卵圆形,核仁大而明显。成纤维细胞功能活动旺盛,细胞质嗜弱碱性,具明显的蛋白质合成和分泌活动,在一定条件下,它可以实现跟纤维细胞的互相转化;成纤维细胞对不同程度的细胞变性、坏死和组织缺损的修复有着十分重要的作用。刚分离的心肌成纤维细胞呈圆形、折光性良好,悬浮于培养基中。30min细胞贴壁,其中部分开始伸出伪足,表现为小的突起;6h后细胞基本贴壁完全,伸展成梭形,胞核清晰,分布较均匀,散在生长,不聚集成团;细胞生长迅速,5-7天即呈融合状态,细胞排列紧密,有的交叉重叠生长,平坦、胞体较大,细胞质透明,细胞核较大,呈椭圆形,颜色淡。细胞融合,并彼此连接成网状;细胞呈突起的纺锤形或星形的扁平分布。近年来,人们逐渐了解到非心肌细胞不仅对心肌细胞具有结构上的支持、保护作用,而且还具有自分泌和旁分泌功能,影响心肌细胞的结构和生理功能;心肌成纤维细胞主要功能为对心肌细胞起结构支持作用并负责细胞基质外的合成,当心肌损伤时能产生旁分泌生长因子。心肌成纤维细胞是心脏结缔组织中常见的细胞,可合成和分泌胶原纤维、弹性纤维、网状纤维及有机基质,并且在外伤等因素刺激下,部分纤维细胞可重新转变为幼稚的成纤维细胞,其功能活动也得以恢复,参与组织损伤后的修复。因此,对心肌成纤维细胞的生理学研究成为现代心血管领域研究的一个重点。
方法简介:
公司实验室分离的人心肌成纤维细胞采用胶原酶-胰蛋白酶联合消化结合差速贴壁法制备而来,细胞总量约为5×10?cells/瓶。
质量检测
公司实验室分离的人心肌成纤维细胞经Vimentin荧光鉴定,纯度可达90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、、酵母和等。
培养信息:
培养基 含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等
换液频率 每2-3天换液一次
生长特性 贴壁
细胞形态 成纤维细胞样
传代特性 可传5代左右;3代以内状态佳
消化液 0.25%胰蛋白酶
培养条件 气相:空气,95%;CO2,5%
大鼠促卵泡素(FSH)elisa检测试剂盒
Menin抑癌蛋白抗体
Menin
DNAJC22蛋白抗体
DNAJC22
水土中亚硝酸盐含量测试盒
冰冻切片组织TNF BETA蛋白表达NBT显色光学显微镜检测试剂盒
小鼠N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶(NAG)elisa检测试剂盒
D-二聚体D-Dimer试剂盒 R1:18ml×1 R2:6ml×1 胶乳增强
磷酸葡萄糖酸内酯酶抗体
PGLS
源盒蛋白C6抗体
HOXC6
前列腺癌和结肠癌相关蛋白 Anti-TPD52/Prostate and colon associated protein
抑癌蛋白DLP1 Anti-PDSS2
脯氨酸脱氢酶抗体 Anti-PRODH
导向蛋白3B抗体 Anti-Semaphorin 3B
碱性磷酸酶(AP)标记的兔抗小鼠k链
Rabbit Anti-Mouse Kappa light chain / AP
磷酸化红细胞膜条带4.1蛋白抗体
phospho-EPB41 (Tyr418 + Tyr660)
锌指蛋白370抗体 Anti-ZDHHC7/ZNF370
磷酸化IKB alpha抗体 Anti-phospho-NFKBIA(Tyr305)
复制因子A蛋白2 Anti-RPA32/RPA2
发育多能性相关蛋白3抗体 Anti-Stella/DPPA3
大鼠Ⅱ型胶原(Col Ⅱ)elisa分析检测试剂盒
人心肌成纤维细胞即用型TB培养基 5个/包
Borrelia burgdorferi RFLP基因分析试剂盒
小鼠成纤维细胞生长因子10(FGF10)elisa分析检测试剂盒
大鼠CD63分子(CD63)elisa检测试剂盒
原代细胞的分离方法:
一、悬浮细胞的分离方法