(1)原代细胞的培养方法
器官培养是指从供体取得器官或组织块后，不进行组织分离而直接在体外的特定环境条件下培养，器官培养可保持器官组织的相对完整性，可用于重点观察细胞间的联系、排列情况和相互影响，以及局部环境的生物调节作用。
组织来源
椎间盘组织
规格
5×10⁵Cells/T25培养瓶
细胞分类
人原代细胞
培养条件
气相：空气，95%；CO2，5%
生长特性
贴壁
细胞形态
梭形、多角形
细胞简介：
人椎间盘纤维环细胞分离自椎间盘组织；椎间盘是位于脊柱两椎体之间，由软骨板、纤维环、髓核组成的一个密封体。上下有软骨板，是透明软骨复盖于椎体上，下面骺环中间的骨面。上下的软骨板与纤维环一起将髓核密封起来。纤维环由胶原纤维束的纤维软骨构成，位于髓核的四周。纤维环的纤维束相互斜行交叉重叠，使纤维环成为坚实的组织，能承受较大的弯曲和扭转负荷。纤维环的前侧及两侧较厚，而后侧较薄。纤维环的前部有强大的前纵韧带，后侧的后纵韧带较窄、较薄。纤维环细胞密度为9000个细胞/mm3，其外层的细胞呈梭型，主要属于纤维细胞，内层细胞呈圆形，主要属于软骨细胞。在培养的情况下，用透射电镜观察则有许多共同的超微结构表现，它们的核较圆，核仁较明显。细胞质内可见大量的附有核糖体颗粒的粗面内质网和滑面内质网。细胞质内线粒体多，为椭圆形，有的可看到双层单位膜，由单位膜包绕初级深酶体和次级深酶体。细胞质内有一系列的扁平囊及小泡主成的高尔基复合体和分泌颗粒，纤维环细胞合成分泌蛋白多糖及胶原纤维的能力很旺盛，保证纤维环生理代谢活动所需的构造物质的供给。一但这种供给减少，纤维环的生物性能就会减弱，椎间盘开始退变。
方法简介：
公司实验室分离的人椎间盘纤维环细胞采用胶原酶-中性蛋白酶联合消化法并结合软骨细胞培养基培养筛选制备而来，细胞总量约为5×10?cells/瓶。
质量检测
公司实验室分离的人椎间盘纤维环细胞经Ⅰ型胶原蛋白荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、、酵母和等。
培养信息：
培养基 含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等
换液频率 每2-3天换液一次
生长特性 贴壁
细胞形态 梭形、多角形
传代特性 可传5代左右；3代以内状态佳
消化液 0.25%胰蛋白酶
培养条件 气相：空气，95%；CO2，5%
BMP-9ELISAKit
仓鼠前列腺素E2(PGE2)elisa分析检测试剂盒
PGE2 ELISA Kit
人毒蕈碱型乙酰胆碱受体M2(mAChRM2)自身抗体elisa分析检测试剂盒
HumanmuscarinicacetylcholinereceptorM2(mAChRM2)autoantibodyELISAkit
小鼠白介素27(IL27)elisa检测试剂盒
大鼠1,25二羟基维生素D3(1,25 DHVD3)elisa检测试剂盒
钙钠交换体（NCX）蛋白表达ELISA定量检测试剂盒
犬I 型胶原蛋白elisa检测试剂盒
INTS1蛋白抗体
INTS1
炭疽杆菌致死因子LF抗体
Anthrax lethal factor
（AMYLASE）定性检测试剂盒
兔γ-谷氨酰转移酶1(GGT1)elisa检测试剂盒
大鼠尿调蛋白(UMOD)elisa检测试剂盒
细胞凋亡诱导（DNA合成抑制）试剂盒
多通道膜蛋白PTCHD2抗体
PTCHD2
癌胚抗原相关细胞粘附分子16抗体
CEACAM16
泛素蛋白连接酶2N抗体 Anti-Ube2N/UBC13
原钙粘蛋白γB1抗体 Anti-PCDHGB1
细胞膜调控蛋白Paralemmin 1抗体 Anti-Paralemmin 1
粘结蛋白SA1抗体 Anti-SA1/Nuclear protein stromal antigen 1
碱性磷酸酶（AP）标记的羊抗鸡IgG H&L
人椎间盘纤维环细胞大鼠单核细胞趋化蛋白3(MCP3)elisa检测试剂盒
小鼠嗜环蛋白/亲环素A(CyPA)elisa检测试剂盒
人REST协阻抑因子3(RCOR3)elisa分析检测试剂盒
组织EPHB4激酶活性定量检测试剂盒（A/B/C）
原代细胞的分离方法：
一、悬浮细胞的分离方法