(1)原代细胞的培养方法
器官培养是指从供体取得器官或组织块后，不进行组织分离而直接在体外的特定环境条件下培养，器官培养可保持器官组织的相对完整性，可用于重点观察细胞间的联系、排列情况和相互影响，以及局部环境的生物调节作用。
组织来源
肺动脉
规格
5×10⁵Cells/T25培养瓶
细胞分类
大鼠原代细胞
培养条件
气相：空气，95%；CO2，5%
生长特性
贴壁
细胞形态
成纤维细胞样
细胞简介：
大鼠肺动脉平滑肌细胞分离自肺动脉组织；肺动脉亦称肺动脉干。在呼吸空气的脊椎动物中，把静脉血由心脏导向肺脏的动脉。肺动脉起于右心室，在主动脉之前向左上后方斜行，在主动脉弓下方分为左、右肺动脉，经肺门入肺。肺动脉干位于心包内，为一粗短的动脉干。起自右心室，在升主动脉前方向左后上方斜行，至主动脉弓下方分为左、右肺动脉。左肺动脉较短，在左主支气管前方横行，分二支进入左肺上、下叶。右肺动脉较长而粗，经升主动脉和上腔静脉后方向右横行，至右肺门处分为三支进入右肺上、中、下叶。肺动脉平滑肌细胞是肺血管的重要结构细胞之一，在调控肺血管的收缩和舒张功能中有重要作用。肺动脉平滑肌细胞原代分离培养3天后，可见细胞贴壁伸展，细胞形态大小不一，呈梭形、不规则形、三角形或扇形，核卵圆形、居中；2周后细胞汇合，多数细胞伸展呈长梭形，胞浆丰富，有分枝状突起，细胞平行排列成单层或部分区域多层重叠生长，高低起伏；细胞密度低时，常交织成网状；密度高时，则排列为旋涡状或栅栏状。传代后细胞生长较快，4-6天即可汇合，并保持上述形态学特征和生长特点。肺动脉平滑肌细胞的异常是肺动脉高压发展的重要病理学特征，其凋亡和增殖失衡是肺血管重塑的关键。研究表明，急性和慢性缺氧均可导致肺动脉高压，即缺氧性肺动脉高压，推断缺氧可能是通过促进肺动脉平滑肌细胞的增殖而参与缺氧性肺动脉高压的发展。肺动脉平滑肌细胞主要功能：①细胞表面表达介质（ICAM-1和VCAM-1）参与血管壁炎症反应；②是多数重要动脉的靶细胞。肺动脉平滑肌细胞与主要病生理变化：①平滑肌增生易致肺动脉高压；②先天性肺动脉狭窄；③肺动脉栓塞。
方法简介：
实验室分离的大鼠肺动脉平滑肌细胞采用中性蛋白酶 - 胶原酶联合消化法制备而来，细胞总量约为5×10⁵cells/瓶。
质量检测
实验室分离的大鼠肺动脉平滑肌细胞经α-SMA荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、、酵母和等。
培养信息：
培养基：含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等
换液频率：每2-3天换液一次
生长特性：贴壁
细胞形态：成纤维细胞样
传代特性：可传3代左右
消化液：0.25%胰蛋白酶
培养条件：气相：空气，95%；CO2，5%
大鼠肺动脉平滑肌细胞体外培养周期有限；建议使用配套的生长培养基及正确的操作方法来培养，以此保证该细胞的佳培养状态。
pYES＋目的基因
KIAA2013蛋白抗体
KIAA2013
抗受体1B抗体
AVPR1B
细胞凋亡检测
10倍酵母菌SD-LEU培养基
鱼前列腺素E2(PGE2)elisa分析检测试剂盒
大鼠酸性磷酸酶（ACP）elisa检测试剂盒
NCKAP5蛋白抗体
NCKAP5
5号染色体开放阅读框49抗体
C5orf49
胚胎干细胞相关蛋白TXNDC9抗体 Anti-TXNDC9
转录调节因子MAZR抗体 Anti-PATZ1
鸟氨酸氨基甲酰转移酶抗体 Anti-OTC
磷酸化S6核糖体蛋白抗体 Anti-Phospho-RPS6 (Ser235+Ser236)
轴突相关粘附分子抗体
Contactin 4 + 6
周期素D相互作用蛋白1抗体
DMTF1
转录辅助因子退变样蛋白3抗体 Anti-VGLL3
神经生长因子β抗体 Anti-NGF-β
肿瘤血管内皮标记蛋白2抗体 Anti-RASD2/Tumor endothelial marker 2
ATP结合转运因子2抗体 Anti-TAP2/ABCB3
大鼠层粘连蛋白亚基γ-2(LAMC2)elisa分析检测试剂盒
大鼠肺动脉平滑肌细胞猴白介素1a(IL1A)elisa分析检测试剂盒
IL1A ELISA kit
人多药耐药相关蛋白(MRP)elisa分析检测试剂盒
MRPELISAKit
原代细胞的分离方法：
一、悬浮细胞的分离方法