(1)原代细胞的培养方法
器官培养是指从供体取得器官或组织块后，不进行组织分离而直接在体外的特定环境条件下培养，器官培养可保持器官组织的相对完整性，可用于重点观察细胞间的联系、排列情况和相互影响，以及局部环境的生物调节作用。
组织来源
巩膜组织
规格
5×10⁵Cells/T25培养瓶
细胞分类
大鼠原代细胞
培养条件
气相：空气，95%；CO2，5%
生长特性
贴壁
细胞形态
成纤维细胞样
细胞简介：
大鼠巩膜成纤维细胞分离自巩膜组织，巩膜是眼球壁的主要组成之一。是眼球纤维膜的后5/6部分。前方联接角膜，后方与视神经的鞘膜延续。巩膜在视神经穿出部附近厚，愈前愈薄，在肌腱附着处又复增厚。其与角膜交界处，外面有环形的角膜沟，深部有巩膜静脉窦。小儿的巩膜为浅蓝色，成年为白色，老年因脂肪沉着而带黄色。巩膜结构坚韧，有支持和保护眼内组织的作用。成纤维细胞是疏松结缔组织的主要细胞成分，由胚胎时期的间充质细胞分化而来；成纤维细胞较大，轮廓清楚，多为突起的纺锤形或星形的扁平状结构，其细胞核呈规则的卵圆形，核仁大而明显。成纤维细胞功能活动旺盛，细胞质嗜弱碱性，具明显的蛋白质合成和分泌活动，在一定条件下，它可以实现跟纤维细胞的互相转化；成纤维细胞对不同程度的细胞变性、坏死和组织缺损的修复有着十分重要的作用。刚分离的成纤维细胞呈圆形、折光性良好，悬浮于培养基中。30min细胞贴壁，其中部分开始伸出伪足，表现为小的突起；6h后细胞基本贴壁完全，伸展成梭形，胞核清晰，分布较均匀，散在生长，不聚集成团；细胞生长迅速，5-7天即呈融合状态，细胞排列紧密，有的交叉重叠生长，平坦、胞体较大，细胞质透明，细胞核较大，呈椭圆形，颜色淡。细胞融合，并彼此连接成网状；细胞呈突起的纺锤形或星形的扁平分布。
方法简介：
公司实验室分离的大鼠巩膜成纤维细胞采用混合胶原酶消化法结合差速贴壁法制备而来，细胞总量约为5×10?cells/瓶。
质量检测
公司实验室分离的大鼠巩膜成纤维细胞经Vimentin荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、、酵母和等。
培养信息：
包被条件 贴壁不包被
培养基 含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等
换液频率 每2-3天换液一次
生长特性 贴壁
细胞形态 成纤维细胞样
传代特性 可传2-3代左右
消化液 0.25%胰蛋白酶
培养条件 气相：空气，95%；CO2，5%
小鼠谷光甘肽合成酶(GSS)elisa检测试剂盒
蛛受体3抗体
LPHN3
细胞质FMR1相关蛋白抗体
CYFIP1
小鼠4-羟基壬烯酸(HNE)elisa检测试剂盒
APC蛋白标记试剂盒
全组织冯库萨（VON KOSSA）钙染色试剂盒
鸡HSP60抗体(IgG)elisa检测试剂盒
核孔蛋白样蛋白2抗体
NUPL2
血红蛋白ζ链/Hemoglobin ζ 抗体
HBZ
端粒结合蛋白2抗体 Anti-TRF2
蛋白激酶C beta 1/2抗体 Anti-PKC beta 1/2
磷酸化酶激酶γ2 Anti-PHKG2
信号诱导增殖相关蛋白1样蛋白2抗体 Anti-SIPA1L2
磷酸化活化复制因子2抗体
phospho-ATF2 (Ser480)
嗅觉受体5M11抗体
OR5M11
锌指蛋白BED5抗体 Anti-ZBED5
神经毒性因子ICP34.5（人单纯疱疹Ⅰ型）抗体 Anti-HSV 1
锌指蛋白754抗体 Anti-Rex1/Zinc finger protein 754
神经突触相关蛋白SLITRK6抗体 Anti-SLITRK6
大鼠Smad1 elisa分析检测试剂盒
大鼠巩膜成纤维细胞大鼠白介素2可溶性受体β链(sIL-2Rβ)elisa分析检测试剂盒
sIL-2Rβ ELISA kit
人肌养蛋白(dystrophin)elisa分析检测试剂盒
HumandystrophinELISAKit
原代细胞的分离方法：
一、悬浮细胞的分离方法