(1)原代细胞的培养方法
器官培养是指从供体取得器官或组织块后，不进行组织分离而直接在体外的特定环境条件下培养，器官培养可保持器官组织的相对完整性，可用于重点观察细胞间的联系、排列情况和相互影响，以及局部环境的生物调节作用。
组织来源
脊髓组织
规格
5×10⁵Cells/T25培养瓶
细胞分类
大鼠原代细胞
培养条件
气相：空气，95%；CO2，5%
生长特性
贴壁
细胞形态
成纤维细胞样
细胞简介：
大鼠脊髓成纤维细胞分离自脊髓组织；脊髓是细细的管束状的神经结构，位于脊柱的椎管内且被脊椎保护；是源自脑的神经系统延伸部分。神经系统的细胞依靠复杂的联系来处理传递信息。脊髓的主要功能是传送脑与外周之间的神经信息。人和脊椎动物神经系统的一部分，在椎管里面，上端连接延髓，两旁发出成对的神经，分布到四肢、体壁和内脏。脊髓的内部有一个H形（蝴蝶型）灰质区，主要由神经细胞构成；在灰质区周围为白质区，主要由有髓神经纤维组成；脊髓是许多简单反射的。脊髓两旁发出许多成对的神经（称为脊神经）分布到全身皮肤、肌肉和内脏器官。脊髓是周围神经与脑之间的通路，也是许多简单反射活动的低级。按脊神经的出入可把脊髓也分为相应的31节，31对脊神经就是由不同的脊椎发出的。成纤维细胞（Fibroblast）是疏松结缔组织的主要细胞成分，由胚胎时期的间充质细胞分化而来；成纤维细胞较大，轮廓清楚，多为突起的纺锤形或星形的扁平状结构，其细胞核呈规则的卵圆形，核仁大而明显。成纤维细胞功能活动旺盛，细胞质嗜弱碱性，具明显的蛋白质合成和分泌活动，在一定条件下，它可以实现跟纤维细胞的互相转化；成纤维细胞对不同程度的细胞变性、坏死和组织缺损的修复有着十分重要的作用。刚分离的脊髓成纤维细胞呈圆形、折光性良好，悬浮于培养基中。30min细胞贴壁，其中部分开始伸出伪足，表现为小的突起；6h后细胞基本贴壁完全，伸展成梭形，胞核清晰，分布较均匀，散在生长，不聚集成团；细胞生长迅速，5-7天即呈融合状态，细胞排列紧密，有的交叉重叠生长，平坦、胞体较大，细胞质透明，细胞核较大，呈椭圆形，颜色淡。细胞融合，并彼此连接成网状；细胞呈突起的纺锤形或星形的扁平分布。脊髓成纤维细胞在生理条件下的主要功能包括：构造和维持组织的正常形态；合成和释放细胞外基质；组织损伤后及时大量聚集修复损伤组织。
方法简介：
公司实验室分离的大鼠脊髓成纤维细胞采用胰蛋白酶-胶原酶混合酶消化后差速贴壁制备而来，细胞总量约为5×10?cells/瓶。
质量检测
公司实验室分离的大鼠脊髓成纤维细胞经Vimentin荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、、酵母和等。
培养信息：
培养基 含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等
换液频率 每2-3天换液一次
生长特性 贴壁
细胞形态 成纤维细胞样
传代特性 可传5代左右；3代以内状态佳
消化液 0.25%胰蛋白酶
培养条件 气相：空气，95%；CO2，5%
E-CadELISAKit
蝶蛹金小蜂卵黄蛋白原(Vtg)elisa分析检测试剂盒
Vtg ELISA Kit
人白介素1β前体(pro-IL1B)elisa分析检测试剂盒
pro-IL1BELISAKit
小鼠Ⅱ型前胶原羧基端原肽(PⅡCP)elisa检测试剂盒
DNA萃取试剂专题
细胞CDK6蛋白表达荧光定量检测试剂盒
酸性木聚糖酶测试盒
细胞抗原Ly6D抗体
LY6D
细胞因子样蛋白1抗体
CYTL1
神经突触相关蛋白SLITRK5抗体 Anti-SLITRK5
受体结合丝氨酸苏氨酸激酶5抗体 Anti-RIP5/RIPK5
磷酸化钠离子/氢离子交换蛋白3抗体 Anti-phospho-NHE3(Ser552)
宫颈癌抑制蛋白4抗体 Anti-ZAK/HCCS4
分泌性磷蛋白24抗体
SPP24
中胚层分化蛋白1抗体
MESDC1
磷酸化丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶II β(casein kinase IIβ)抗体 Anti-phospho-CK II beta (Ser209)
肝糖原磷酸化酶抗体 Anti-PYGL
蛋白激酶A抗体 Anti-PKA/PKAcat/PKACB
精子形成相关凋亡蛋白7抗体 Anti-TSARG7
生物素化兔IgG
大鼠脊髓成纤维细胞猴谷胱甘肽S转移酶A1(GSTA1)elisa分析检测试剂盒
GSTA1 ELISA kit
人二肽基肽酶Ⅳ(DPPⅣ)elisa分析检测试剂盒
DPPⅣELISAKit
原代细胞的分离方法：
一、悬浮细胞的分离方法