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细胞简介:
大鼠胚胎成纤维细胞分离自胚胎;成纤维细胞(Fibroblast)是疏松结缔组织的主要细胞成分,由胚胎时期的间充质细胞分化而来。成纤维细胞较大,轮廓清楚,多为突起的纺锤形或星形的扁平状结构,其细胞核呈规则的卵圆形,核仁大而明显。成纤维细胞功能活动旺盛,细胞质嗜弱碱性,具明显的蛋白质合成和分泌活动,在一定条件下,它可以实现跟纤维细胞的互相转化;成纤维细胞对不同程度的细胞变性、坏死和组织缺损的修复有着十分重要的作用。刚分离的胚胎成纤维细胞呈圆形、折光性良好,悬浮于培养基中。30min细胞贴壁,其中部分开始伸出伪足,表现为小的突起;6h后细胞基本贴壁完全,伸展成梭形,胞核清晰,分布较均匀,散在生长,不聚集成团;细胞生长迅速,5-7天即呈融合状态,细胞排列紧密,有的交叉重叠生长,平坦、胞体较大,细胞质透明,细胞核较大,呈椭圆形,颜色淡。细胞融合,并彼此连接成网状;细胞呈突起的纺锤形或星形的扁平分布。细胞呈突起的纺锤形或星形的扁平分布。该细胞常用作ES细胞培养常用的饲养层细胞,能产生抑制ES细胞自主分化和促进ES细胞增殖的因子,故能有效地促进ES细胞的增殖并维持其未分化特性和多潜能性,且分泌效果优于外源添加的一些因子,而且可以为ES细胞的培养提供类似于体内的微环境,故在研究哺乳动物ES细胞中得到广泛使用。
商品属性:
产品名称
大鼠胚胎成纤维细胞
种属
大鼠
组织来源
胚胎组织
规格
5×10⁵Cells/T25培养瓶
货号
A01X1754
细胞形态
成纤维细胞样
培养条件
气相:空气,95%;CO2,5%
生长特性
贴壁
方法简介:
公司实验室分离的大鼠胚胎成纤维细胞采用胰蛋白酶-胶原酶混合消化法结合差速贴壁法制备而来,细胞总量约为5×10?cells/瓶。 质量检测 公司实验室分离的大鼠胚胎成纤维细胞经Vimentin荧光鉴定,纯度可达90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、、酵母和等。
质量检测
公司实验室分离的大鼠胚胎成纤维细胞经Vimentin荧光鉴定,纯度可达90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、、酵母和等。
培养信息:
培养基 含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等
换液频率 每2-3天换液一次
生长特性 贴壁
细胞形态 成纤维细胞样
传代特性 可传5代左右;3代以内状态佳
消化液 0.25%胰蛋白酶
培养条件 气相:空气,95%;CO2,5%
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信号转导和转录激活因子5b抗体 Anti-STAT5b
蛋白质磷酸酶2B抗体 PP2A β PP2A-β Anti-PP2A beta/PPP2CB
蛋白酶体PSMα7抗体 Anti-PSMA7/Proteasome 20S alpha 7
端粒酶相关蛋白2/端粒酶逆转录酶抗体 Anti-TERT
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信息
原代细胞的培养条件:
① 静置贴壁细胞(包括半贴壁细胞的培养)培养 a 细胞要通过充分漂洗,以尽量除去消化液的毒性 b 细胞接种时浓度要稍大一些,至少为5×108细胞/L。 c 培养基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培养。 d 胎牛血清浓度为10%-80%。 e 应在37℃5% CO2的培养箱中培养。。 f 在起始的2天中尽量减少振荡,以防止刚贴壁的细胞发生脱落,漂浮。 g 待细胞基本贴壁伸展并逐渐形成网状,应将原代细胞换液 h 用骨髓或外周血中的悬浮细胞经静置培养1周时,应将细胞悬液经低速离心后换液。 ② 悬浮细胞的培养要求 a 原代培养时要尽量去除红细胞 b 短期培养,可在含10%小牛血清的RPMI1640培养基中进行 c 细胞浓度可在5-8×109/L范围内,进行分瓶试验。 d 长期培养时,细胞中要加入生长因子,白血病细胞中要加入少量的原患者血清,以利细胞生长。 f 细胞换液一般每隔3天需半量换液一次 g 细胞传代一般待细胞增殖加快、细胞密度较高时才能进行。