1、简介
黄曲霉**M1属于黄曲霉**一类结构相似的化合物中的一种,在湿热地区食品和饲料中出现黄曲霉**的机率*高。
黄曲霉**(Aflatoxin,AF)主要是黄曲霉菌和寄生曲霉菌的代谢产物,之所以广受重视是因为它是人类癌症的一个重要的致癌源。至今已分离出的黄曲霉**及其衍生物有20多种,在天然食物中以黄曲霉**B1*为多见。在AF中,已知毒性大小顺序为AFB1>AFM1>AFG1>AFB2>AFG。
2、来源
黄曲霉** M1(Aflatoxin M1,AFM1)是动物摄入黄曲霉**B1(Aflatoxin B1,AFB1)后在体内经羟基化形成的代谢产物,毒性仅次于AFB1,WHO将其列为ⅡB类致癌物。AFM1主要存在于动物的乳、肾脏、肝脏、蛋、肉和尿中,其中以乳中*为常见。
若把发霉的谷物作为饲料,其中的黄曲霉**在24 h之后就能进入奶中。黄曲霉**被动物食用后,一部分会蓄积在动物的体内,另外一部分则会转化到乳汁和尿液中,转化率一般为3.45%~11.39%,排出AFM1的量为AFB1摄入量的1%~3%。
3、性质及危害
黄曲霉**M1一旦产生便很难消除,因为它对光、热和酸都比较稳定,熔点(裂解温度)在299 ℃。牛奶常见的3种**方法都对它无可奈何。
黄曲霉**M1进入人或动物体内后,除抑制DNA、RNA合成外, 也抑制肝脏蛋白质合成,导致人体中毒。其危害主要表现在3个方面:损害组织器官;致癌、致畸、致突变,引发动物及人类的肝癌、肾癌和胃癌等;抑制**机能。其毒性是***的10倍,砒霜的68倍,主要危害的部位在肝脏。
乳业专家王丁棉表示,牛奶中的黄曲霉**来源于奶牛的饲料中,即使超量一点点,随着人在食物中的摄入,慢慢在人体积累也会致癌。
4、限量
牛奶中AFM1限量取决于科学、社会和经济方面的诸多因素,这些因素相互影响、制约,综合地决定牛奶中AFM1限量值。目前,世界各国对食品中AFM1的含量都制定出了严格的限量标准。牛奶中AFM1限量值采用0.05 μg/kg的国家*多,为34个,其中绝大部分国家是欧盟成员国以及与欧盟有贸易的非洲、亚洲、拉丁美洲部分国家,欧盟对婴幼儿配方食品,包括婴幼儿配方牛奶限量0.025 μg/kg。另一个限量值为0.5 μg/kg,有22个国家,包括美国、中国以及若干亚洲和欧洲国家。还有4个国家分别采用15、5、0.2 μg/kg以及不得检出。
5、检测方法
(1)同位素稀释液相色谱-串联质谱法:试样中的黄曲霉M1和M2用甲醇-水溶液提取,上清液用水或磷酸盐缓冲液稀释后,经**亲和柱净化和富集,净化液浓缩、定容和过滤后液相色谱分离,串联质谱检测,同位素内标法定量。
优点:具有预处理简单、检测速度快、灵敏度高,可以满足少量和批量样品的检测需要;
缺点:对于仪器要求较高,成本也较高。
(2)高效液相色谱法:试样中的黄曲霉M1和M2用甲醇-水溶液提取,上清液缓冲液稀释后,经**亲和柱净化和富集,净化液浓缩、定容和过滤后液相色谱分离,荧光检测器检测,外标法定量。
优点:灵敏度高、选择性强、分离能力强、干扰峰少。
(3)酶联**吸附筛查法:样品中的黄曲霉**与酶标板上固定的抗原特异性竞争抗体,在固相载体表面形成抗原抗体复合物。洗除多余抗体成分,加入酶标Ⅱ抗,与抗体反应通过酶催化显色剂显色,根据显色的深浅来判断样品中黄曲霉**的含量。
优点:使用**,操作简便、快捷,适合大批量样品筛查。
缺点:适用酶、抗体对保存条件、时间有一定要求。
(4)胶体金法:此法将检测样品液加入速测卡上的样品孔,检测液中的AFM1与金标卡上的金标抗体结合形成复合物,若AFM1在检测液中浓度低于设定检测灵敏度值(阴性样本),未结合的金标抗体流到T区时,被固定在膜上的抗原捕获,形成一条可见的T线;若AFM1 浓度高于设定检测灵敏度值,金标抗体即与AFM1全部形成复合物,不再与T线处抗原结合,T线不可见。C线为质控线,出现则说明该速测卡有效。
优点:方便快捷;
缺点:主要用于定性。
6、总结
乳及乳制品特别是生乳的贮存条件特殊,不宜长时间运输贮存,快速检测对大规模监测具有重要意义。同时,快速的现场检测可以提高检测效率,加大监测范围和力度,保证牛奶质量**。
采用快速检测技术(*好是胶体金速测卡)初步筛查后,再用定量法对快速法筛选出的阳性或超标样品进一步确证,这可能是解决大批量牛奶检测的*好方法。