Bescript One Step RT-PCR Kit使用说明书
Item:V003 （100次×25μl体系/反应）
试剂盒组成
100次
One Step Probe Mix
1000μl
One Step Enzyme Mix
500μl
产品描述
Bescript One Step RT-PCR Kit是一种一步法反转录定量扩增的qPCR预混试剂盒，由反转录酶、RNA酶抑制剂、BesTaq DNA热启动酶、dNTPs、Mg2+以及相关缓冲液组成。使用本产品进行RT-qPCR反应，只需在此基础上再加入引物、探针、模板和**DEPC水即可。
n 特异性高：采用热启动酶可抑制非特异性反应，并保证多重反应的灵敏性。
n 灵敏度好：对HCV RNA检测灵敏度为：20IU/mL。
n 使用方便：RT和qPCR在同一管中连续进行，快速简便、无污染。
n 通用性好：兼容所有的荧光PCR仪。
储存条件
-20℃保存12个月，使用前充分溶解混匀。
短期使用可放4℃保存，避免反复冻融。
使用方法
1. 反应液配制
反应液成分
体积
终浓度
10μl
1×
5μl
正向引物（10μM）
0.5μl
200nM
反向引物（10μM）
探针（10μM）
0.25μl
100nM
模板
总计
补ddH2O至25μl
2. PCR循环条件的设定
步骤
温度
时间
循环数
1
反转录
50℃
20min
1 cycle
2
预变性
95℃
5min
3
变性
10s
40 cycles
4
退火、延伸
60℃
45s
步骤4收集荧光信号
3. 实验结果分析
根据扩增曲线的结果进行荧光定量PCR数据分析。
注意事项
1. 本制品不含内参ROX染料。
2. 请穿实验服并戴一次性手套操作。