Perfect SYBR Green Master Mix使用说明书
Item: V001
产品描述
Perfect SYBR Green Master Mix是一种即用型的2×预混液,由BesTaq DNA热启动酶、SYBR GreenⅠ、dNTPs、Mg2+以及相关缓冲液组成,只需加入引物、模板和无菌水即可进行qPCR反应。
n 特异性高:热启动及优化好的缓冲液可防止非特异性扩增和引物二聚体。
n 灵敏度好:可**定量低至10拷贝的模板。
n 线性范围广:可**定量9个数量级。
n 通用性好:cDNA、gDNA、质粒DNA、病毒DNA均可作为模板,并兼容所有的荧光PCR仪。
n 使用方便:实验过程无需冰上操作。
储存条件
-20℃保存12个月,使用前充分溶解混匀。
短期使用可放4℃保存,避免反复冻融。
注意事项
1. SYBR Green I 强光下易分解,使用时避免长时间强光照射本产品。
2. 本制品不含内参ROX染料。
使用方法
1. 反应液配制
反应液成分
体积
终浓度
Perfect SYBR Green Master Mix
12.5μl
1×
正向引物(10μM)
0.5μl
200nM
反向引物(10μM)
模板*
5μl
总计
补ddH2O至25μl
*gDNA的模板用量不超过500ng,cDNA不超过50ng。
2. PCR循环条件的设定
步骤
温度
时间
循环数
1
预变性
95℃
5min
1 cycle
2
变性
10s
40 cycles
3
退火、延伸
60℃
45s
反应结束后应进行熔解曲线分析
3. 实验结果分析
根据扩增曲线和熔解曲线的结果进行荧光定量PCR数据分析。