琼脂糖凝胶电泳仪的使用步骤

琼脂糖凝胶电泳仪的使用步骤

        琼脂糖凝胶是以琼脂糖为载体制备的凝胶。琼脂糖分为普通琼脂糖和化学修饰后熔点较低的低熔点琼脂糖。琼脂糖的熔点在 62-65°C 之间。熔化后，在37°C可保持液体数小时，在30°C固化。成胶。它主要用于凝胶中染色体DNA的原位消化和DNA片段的回收。由于其孔径较大，琼脂糖凝胶常用于分离大分子蛋白质和 DNA。
        琼脂糖是琼脂分离制备的链状多糖，其结构单元为D-半乳糖和3.6-脱水L半乳糖。许多琼脂糖链在氢键和其他力的作用下盘绕形成绳状琼脂糖束，形成大的网状凝胶。因此，该凝胶适用于免     疫复合物、核酸和核蛋白的分离、鉴定和纯化。在临床生化试验中，常用于LDH、CK等酶的检测。
        琼脂糖凝胶电泳仪使用步骤：
         1、用蒸馏水清洗制胶工具，准备制胶板，用琼脂封住模具边缘，套上梳子；
         2.根据分离量根据样品量制备适当浓度的琼脂糖凝胶。准确称取一定量的干琼脂糖粉，加入适量体积的锥形瓶中，加入一定量的电泳缓冲液，放入微波炉中加热融化，冷却片刻；
         3、将融化的琼脂溶液摇匀，倒入电泳槽中，等待凝固；
         4.室温固化约30-40分钟后，小心拔出梳子，将固化的凝胶放入电泳槽中，准备上样；
         5、将电泳缓冲液倒入电泳槽中，在凝胶面以下约1mm处，去除凝胶孔中的气泡；
         6. 加载样品，在5ul DNA样品中加入1ul样品缓冲液和染料，用抓斗混合，加入到凝胶孔内；
         7、装完样品后，打开电源，红色正极，黑色负极，DNA样品负极移到正极，样品孔一侧为负极，电压40-50v ，电压约30分钟；
         8、当电压结束时，关闭电源，观察凝胶成像仪上的电压位置，并比较标记来判断大小。