分子生物学实验室常用仪器使用方法与保养
分子生物学实验室常用仪器使用方法与保养
分子生物学操作涉及一系列仪器。使用不当会导致实验失败、降低仪器使用寿命或损坏仪器。因此,在操作前仔细了解各种仪器的使用方法和注意事项,是使后续实验更加有效的必要准备。
冷冻离心机
低温分离技术是分子生物学研究中不可缺少的方法。基因片段的分离、酶蛋白的沉淀和回收,以及其他生物样品的分离和制备都离不开低温离心技术。因此,低温离心机已成为分子生物学研究的重要工具。
如何使用:
1、离心机应放置在水平、坚固的地板或平台上,尽量使机器处于水平位置,以免离心时机器振动。
2、打开电源开关,按要求安装所需转子,将用托盘天平预平衡的样品放在转子样品架上(离心管必须与样品同时平衡),盖上盖子.
3、按功能选择键可设置各种要求:温度、速度、时间、加减速。对于计算机控制的机器,您需要按保存按钮来记忆输入的信息。
4、按启动键,离心机将执行上述参数运行,并在预定时间自动停机。
5. 离心机完全停止转动后,打开盖子,取出离心后的样品,用干净的软布擦拭转子和离心腔内壁,待离心腔内温度与离心腔温度平衡后盖上盖子。室内温度。
笔记:
1、机体应始终处于水平位置,外部供电系统的电压要匹配,并需要良好的接地线。
2、开机前检查转子是否安装牢固,机腔内是否有异物。
3、样品应进行预平衡,离心管用于离心时,应同时平衡离心管和样品。
4、对挥发性或腐蚀性液体进行离心时,应使用带盖的离心管,不得有液体外漏,以免腐蚀机腔或引起事故。
5、擦拭离心腔时要轻柔,以免损坏离心腔内的温度传感器。
6、每次操作后,应做好使用记录,并定期检查和维修机器性能。
7、离心过程中如发现异常现象,应立即关闭电源,并报告相关技术人员维修。
附录:相对离心力与每分钟转速的换算
离心机的转速在以往的实验数据中一般用每分钟转数表示。由于离心力不仅是速度的函数,也是离心半径的函数,即当速度相同时,离心半径越大,精神力越强。因此,仅用速度来表示离心力是不够科学的。近年来,用相对离心力(RCF)来表示更为合理。现在在国际数据中,已经用相对离心力代替了。
数字pH计:
一、准备工作
1、仪器应平放在适合使用环境的工作台上,并按视角支撑好支架。
3、pH值定位测量方法:
(1)两点定位法(高精度测量法)
(1) 连接电极线,将参比电极和活化超过24小时的干净PH电极移入**个标准缓冲液pH1(例如pH1=4.00)中,待仪器响应后稳定,调节定位旋钮,直到仪器显示“0.00”;
(2)将电级系统从**标准溶液中取出使用 用离子水冲洗干净后,用滤纸吸去电级表面的水分,然后转移到第 二标准溶液中(例如, pH2=9.18)。待仪器响应稳定后,调节斜度旋钮使仪器显示(△pH=pH1-pH2=9.18-4.00=5.18)此后斜度旋钮不能再移动,除非更换电极系统;
(3)斜率调整完成后,重新调整定位旋钮,使仪器显示第 二标准溶液的实际pH值(9.18)。定位结束于 2 点;
(4) 将电极从第 二个标准溶液中取出,冲洗干净,吸干,转移到待测溶液中。仪器响应稳定后,显示的值为待测溶液的pH值。
(2) 单点定位法(粗测法)
(1)调节温度补偿旋钮至溶液温度值;
(2) 将斜率补偿旋钮向左 旋到底;
(3) 接通电源 将液位系统移入标准溶液中(一点法只使用一种标准溶液,如pH=4.00),调节定位旋钮使仪器显示“4.00”;
(4)取出水平仪,冲洗吸水后移至待测溶液中,仪器响应稳定后显示的数值即为待测溶液的pH值。
三、温度测量
1. 将功能选择设置为温度文件。
2. 将温度探头插入插孔,将温度探头置于环境条件或溶液中。仪器响应稳定后,仪器显示值为环境条件或溶液温度值。
四。预防措施
1. 仔细使用仪器前的准备工作。
2、仪器上电后或测量过程中,显示不稳定或乱跳,应断电检查,如电压、加热时间和电极系统是否正常。
3、使用不同的电极时,要注意排除离子的干扰,选择好的盐桥,必要时使用离子强度固定剂。
4、电极系统从**溶液中取出移入第 二溶液前,必须用去离子水或双蒸水清洗干净,然后用滤纸吸去表面水分,以免影响测量的准确性结果。
5、仪器应存放在干燥、清洁、无腐蚀的地方。每次测量后应关闭电源,取出电极和温度探头并妥善保管。清洗干净后,可将玻璃电极浸入去离子水中备用(注意水面不能低于玻璃泡)。清洁甘汞电极后,戴上橡胶帽,存放在配套的盒子中。当甘汞电极漏液或未饱和及盐桥中断时,应及时补充饱和的内部填充液。
6、该类仪表采用大规模集成电路,输入电阻高。维修和焊接仪器内部任何部件时,应使用45W以下接地线良好的烙铁,不带接地线的烙铁应与电源断开。插头是焊接的。
分光光度计
不同的物质对不同波长的入射光有不同程度的吸收,从而形成特征吸收光谱。分光光度法不仅适用于可见光区,还可以扩展到紫外光区和红外光区,给科研实验带来极大的方便。下面重点介绍分光光度计的使用和注意事项。
使用规则
1、打开稳压器电源,待稳压器输出电压稳定到200V后打开光度计电源,仪器自动进入初始化。
2、初始化大约需要10分钟,内容包括: ①搜索零级光; ②建立基线; ③*后,当显示屏显示××nm时,表示仪器已完成初始化程序,可以进入检测状态。
3. 根据需要输入各种参数,选择相应的比色皿(玻璃或石英),将空白管、标准管和待测管依次放入比色皿架中,盖上比色皿盖。
4. 空管自动调零。
5、将样品槽一一移动到样品位置,待数据显示稳定后,按“START/STOP”键,打印机将自动打印测量数据,重复上述步骤,直到所有样品测试。
6、试验结束后,应及时将比色皿取出,清洗干净放回原处,同时关闭仪器电源开关和稳压器电源开关,并登记使用情况.
预防措施
1、仪器**次使用或长期使用(一般为一年)时,需要检查波长精度,以保证测试结果的可靠性。
2、长途运输或室内运输可能会造成光源位置偏移,导致亮电流漂移增大。此时,调整光源位置,直至达到相关技术指标。如果调整校正后波长精度、暗功率漂移和亮电流漂移三个关键指标不符合要求,请停止使用并通知相关技术人员维修。
3. 每次测试后,检查比色池中溶液是否溢出。如有溢出,请随时用滤纸吸去,以免造成测量误差或影响仪器使用寿命。
4、仪器每次使用时,应在灯室内放几袋硅胶(或其他干燥剂),防止反光罩受潮、发霉或沾染影响仪器使用,并盖住灯罩。同时防尘。
5、仪器室平时应保持清洁干燥。室温为5-35℃,相对温度不超过85%。有条件者,应在房间内配备空调和除湿机,以保证仪器的稳定性能。
6、仪器室内不得存放酸、碱、挥发性或腐蚀性物质,以免损坏仪器。
7、仪器长期不使用时,应定期通电预热,每周一次,每次30分钟,以确保仪器良好使用。
电泳仪:
电泳技术是分子生物学研究不可或缺的重要分析方法。电泳一般分为自由界面电泳和区带电泳两大类。自由界面电泳不需要支持,如等电聚焦电泳、等速电泳、密度梯度电泳、微电泳等。这种类型的电泳目前很少使用。 .在区带电泳中,需要各种类型的材料作为支持物。常用的支持物有滤纸、醋酸纤维素膜、非凝胶支持物、凝胶支持物和硅胶-G薄层等,分子生物学领域*常用的是琼脂糖凝胶电泳。所谓电泳是指带电粒子在电场中的运动。由于电荷和分子量不同,不同的物质在电场中以不同的速度移动。根据这一特点,可以利用电泳对不同物质进行定性或定量分析。 ,或某种混合物用于成分分析或单成分提取制备,在临
床试验或实验研究中具有极其重要的意义。电泳仪就是根据上述原理设计制造的。下面简单介绍一下它的用法和注意事项。
如何使用
1、先用导线将电泳槽的两个电极与电泳仪的直流输出端连接起来,注意不要接反。
2、将电泳仪电源开关调至关闭位置,电压旋钮调至*小,根据工作需要选择电压电流量程。
3. 打开电源,缓慢转动电压调节旋钮,直到达到所需电压,设置电泳终止时间,然后开始电泳。
4、工作完成后,转动旋钮开关至零位或关闭状态,拔出电泳插头。
预防措施
1、电泳仪通电进入工作状态后,严禁人体接触电极、电泳等可能带电的部位,也不得在电泳槽内取放东西。如有必要,请先关闭电源,以免触电。同时仪表必须有良好的接地端子,防止漏电。
2、仪器通电后,请勿临时加拔输出引线插头,以防短路。虽然仪器装有保险丝,但短路仍可能对仪器造成损坏。
3、由于不同介质支撑的电阻值不同,电泳时通过的电流量也不同,游泳速度和游到*后所需的时间也不同。因此,不同介质载体的电泳不应在同一台电泳仪上同时进行。
4、当总电流不超过仪器额定电流(*大电流量程)时,可多槽联合使用,但注意不要过载,否则容易影响仪器寿命。
5、在某些特殊情况下,当需要检查仪器的电泳输入时,允许在稳态下空载启动,但在稳态下,开机前必须连接负载,否则电压表指针会大幅度跳动,容易造成不必要的人为损坏。
6、在使用过程中如发现异常现象,如巨响、放电、异味等,必须立即切断电源进行维修,以免发生事故。
分析天平:
分析天平是定量分析工作中不可缺少的重要仪器。充分了解仪器的性能和熟练使用仪器是获得可靠分析结果的保证。分析天平的种类很多,包括普通分析天平、半自动/全自动光电投影阻尼分析天平和电子分析天平。下面介绍电子分析天平的使用方法及注意事项。
操作方法
1. 检查并调整天平至水平位置。
2、提前检查电源电压是否匹配(必要时配置稳压器),按仪器要求开机预热至所需时间。
3. 充分预热后开启天平开关时,天平会自动调整灵敏度和零点。显示稳定标志后,即可进行正式称重。
4、称量时,将干净的称量瓶或称量纸放在秤盘上,关闭侧门,轻按去皮按钮,天平自动校准零点,然后逐渐加入被称量物质,直至达到要求重量达到。
5、被称量物质的重量为显示屏左下角出现“→”符号时显示屏上显示的实际值。
6、称量完毕后,应及时取出称量瓶(纸),关闭侧门,切断电源,登记使用情况。
预防措施
1、天平应放在坚固稳定的水泥台或木台上。房间需要清洁、干燥和相对恒定的温度。同时,天平上应避免直射光。
2、称量时应从侧门取料,读数时应关闭门,防止气流引起天平摆动。前门仅用于维护或清 除残留材料。
3、电子分析天平长期不使用时,应定期通电预热,每周一次,每次2小时,以确保仪器始终处于良好使用状态。
4. 天平箱内应放置吸湿剂(如硅胶)。当吸湿剂吸水后变色时,应进行高温烘烤和更换,以保证吸湿性能。
5、挥发性、腐蚀性、强酸、强碱物质应在带盖的称量瓶中称量,以防腐蚀天平。
2、通电前,根据工作电源的要求检查电压是否符合要求。如果电源波动过大,应在交流稳压后连接到仪器上。
3、电源应布线良好,排除外界干扰。使用搅拌器时,务必将搅拌器外壳连接到仪器的接地端。
4、打开仪器电源,预热10分钟后,即可进行测量。