1. 使用设备：深圳普分科技双泵液相色谱仪
2. 药剂：1):甲醇10瓶（色谱纯500ml）； 2):乙腈10瓶（色谱纯500ml）3):庚烷磺酸钠1瓶；4):冰乙酸1瓶；5):三乙胺1瓶； 6):碳酸钠1瓶； 7):磷酸二氢钾1瓶； 8):季胺盐1瓶；9):烟酸标准品1盒(3~5瓶/盒，20mg/瓶)； 10): 吡啶-3-磺酸标准品1瓶(500g)
2.色谱条件：1):C18色谱柱：5μm 250mm×4.6mm；2):检测波长为：261nm；3):流动相：0.01mol/L的磷酸二氢钾溶液（用磷酸调节pH值至3.0）为流动相A，甲醇为流动相B，按下表梯度进行洗脱； 4)溶剂：流动相A；5):流速：1.0ml/min。
3.梯度如下表：
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时间（分钟）
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流动相A（%）
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流动相B（%）
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0
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100
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0
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7
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100
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0
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7.1
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10
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90
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9
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10
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90
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9.1
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100
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0
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20
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100
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0
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4.具体试验操作：
取适量试样，精密称定，置50ml量瓶中，加流动相A适量，振摇，使充分溶解，加流动相A稀释至刻度，摇匀，滤过，取续滤液作为供试品溶液。另取工作对照品适量，精密称定，加流动相A溶解并稀释制成每1ml中约含吡啶-3-磺酸2.5µg的溶液，作为对照品溶液。以0.05mol/L的磷酸二氢钾溶液（用磷酸调节pH值至3.0）为流动相A，甲醇为流动相B，按上表梯度进行洗脱，检测波长为261nm。取对照品溶液、供试品溶液各20μl注入液相色谱仪，记录色谱图。
5.配置
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高效液相色谱仪配置
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名称
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规格
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数量
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备注
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紫外检测器
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190-700nm
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1台
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高压输液泵
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0-10ml/min
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2台
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梯度混合器
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1套
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手动进样阀
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配20ul定量环
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1套
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C18色谱柱
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250mm*4.6
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1根
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溶剂托盘
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1台
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色谱工作站
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反控型
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1套
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梯度工具包
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1套
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超声波清洗机
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1台
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溶剂过滤器
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1套
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无油真空泵
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1台
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有机滤膜
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0.45um
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1包
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水系滤膜
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0.45um
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1包
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有机滤器
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0.45um
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1盒
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水系滤器
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0.45um
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1盒
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辅助仪器
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名称
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规格
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数量
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备注
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分析天平
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0.1mg
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1台
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移液枪
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单道，可调，容量1-10ml，精度0.1ml
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1只
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移液枪枪头
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1ml、2ml、5ml、10ml
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各一包
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电脑
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台式机，带PCI扩展槽
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1套
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打印机
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1套
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