Thermo 正相色谱柱使用和维护说明

发布时间：2018-08-28

1 、适用键合相
正相色谱柱键合相包括：Amino、Silica、Cyano 等。
2 、柱体积
色谱柱的柱体积可以通过以下公式估算：
V 为色谱柱柱体积（mL），r 为色谱柱内径（cm），L 为色谱柱长度（cm）。
3 、色谱柱柱效测试与保存
反相色谱柱出厂时都经过柱效测试，所用化合物为甲苯、邻-硝基苯胺、对-硝基苯胺、
间-硝基苯胺和硝基苯，如有不同，以柱效报告为准。
在条件允许情况下，请对新色谱柱进行柱效测试。
正相色谱柱出厂时均保存在正辛烷-乙醇溶液中（如有不同，以柱效报告上列明为准）。
4 、温度
所有硅胶基质色谱柱使用温度应低于 60℃。
5 、样品
* 好将样品溶解在流动相或极性相近的溶剂中。如果使用梯度洗脱，则需要将样品溶解
在初始流动相或极性相近的溶剂中。
样品溶液不应含有任何颗粒物，* 好使用 0.5μm 或更小粒径的滤膜过滤。同时建议在
色谱系统中使用在线过滤器。
样品溶液如果使用强溶剂（例如，流动相为正己烷，样品溶剂为乙醇），为达到较好峰
形，需要降低进样量（以 250x4.6mm 规格为例，小于 10μL）。
6 、流动相
正相色谱所用溶剂通常为氯仿、正己烷、乙腈、甲醇、乙醇等。严禁使用与色谱柱保存
溶液不互溶的溶剂作为流动相。
对于某些特殊的应用（例如亲水相互作用色谱），要使用与色谱柱保存溶剂不互溶的溶
剂（例如水）作为流动相时，须使用 20 倍柱体积的异丙醇冲洗色谱柱后，方可使用流动相
进行平衡。
所有流动相，* 好当日实验当日配制，并使用 2μm 滤膜过滤。
7 、色谱柱安装
请小心操作色谱柱。
不要摔、碰色谱柱，这样会损坏色谱柱床，使色谱柱性能下降。
使用合适的连接管路和接头，确保色谱柱连接处死体积降到* 低（使用不锈钢接头时需
要尤其注意）。我们建议使用 SLIPFREE 接头，此接头与 Thermo 色谱柱以及其他品牌色谱
柱均完美匹配。
8 、色谱柱平衡
在进行分析之前，请使用至少 20 倍柱体积的流动相冲洗色谱柱，以使色谱柱达到平衡。
Version 2
若需使用与色谱柱保存溶液不互溶的溶剂作为流动相，请在平衡前使用至少 20 倍柱体
积的异丙醇冲洗色谱柱。
9 、色谱柱保护
对于“脏”的样品以及组分未知的样品，请尽量使用在线滤器或保护柱，如果可能，使
用 SPE 小柱对样品进行前处理是更好的选择。上述做法可以有效延长色谱柱使用寿命。
10 、色谱柱清洗
常规清洗：
在储存色谱柱之前，请用强的溶剂冲洗色谱柱（去除强保留成分，正相色谱柱中通常使
用乙醇），然后使用合适的溶剂储存色谱柱。
清洗强保留污染物：
如果色谱柱柱效出现大幅下降，且柱效下降可能由于强保留物质聚积所导致时，使用如
下试剂依次清洗色谱柱
20 倍柱体积正己烷；
20 倍柱体积异丙醇；
20 倍柱体积乙腈；
20 倍柱体积水；
20 倍柱体积乙腈；
20 倍柱体积异丙醇；
20 倍柱体积正己烷。
11 、色谱柱保存
正相相色谱柱，保存溶剂通常是含乙醇的正己烷，也可在常规清洗后直接保存在乙醇中。
如果需要长时间储藏，则需要注意色谱柱密封，避免保存溶液挥发。
注意：如果违反上述规程，可能使色谱柱失去保修。

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