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高效液相色谱仪测定茶叶中***含量

高效液相色谱仪测定茶叶中***含量

1 原理

茶叶中***经沸水和氧化镁混合提取后，经高效液相色谱仪、C18分离柱、紫外检测器检测，与标准系列比较定量。

2 仪器和用具

实验室常规仪器及下列各项：

2.1 高效液相色谱仪。

2.2 紫外检测器：检测波长 280 nm

2.3 分析柱：C18 (ODS柱)。

2.4 分析天平：感量 0. 000 1 kg

3 试剂和溶液

甲醇为色谱纯，水为重蒸馏水。

3.1 氧化镁：分析纯。

3.2 高效液相色谱仪流动相：取 600mL甲醇倒人 1400ml，重蒸馏水，混匀，脱气。

3. 3 ***标准液：称取 125mg***(纯度不低于 99%)加乙醇：水(1:4)溶解，定容至 250ml。

使用时，待标准液至室温后，取 2ml工加水至 100mL作为工作液。

4 操作方法

4.1 取样

按 GB/T 8302的规定。

4.2 试样制备

按 GB/T 8303的规定。

4.3 测定步骤

4.3.1 试液制备

称取 1.0g(准确至0. 0001 g)磨碎茶样,置于500ml,烧瓶中.加4.5g氧化镁及300ml沸水，于沸水浴中加热，浸提 20min每隔5min摇动一次)，浸提完毕后立即趁热减压过滤，滤液移入500mL容量瓶中，冷却后，用水定容至刻度，混匀。取一部分试液，通过。0.45um滤膜过滤，待用。

4.3.2 色谱条件

4.3.2.1 检测波长：紫外检测器，波长 280nm。

4.3.2.2 流动相：水：甲醇的体积分数为 7:3。

4.3.2.3 流速：0.5mL/min一1.5mL/min

4.3.2.4 柱温；40 C。

4.3.2. 5 进样量：10 uL~20ul

4.3.3 测定

准确吸取制备液10uL-20ul，注人高效液相色谱仪，并用***标准液制作标准曲线，进行色谱测定。

5 结果计算

比较试样和标准样的峰面积，按式(1)计算：

……… … (1)

式中：

C1一一测定液中***含量ug;

L1一一样品总体积mL;

L2— 进样体积uL;

M 一一试验的质量，g;

m1.— 试样干物质含量，% 。

取两次测定的算术平均值作为结果，结果保留小数点后一位。

高效液相色谱仪测定茶叶中***含量

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