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人细胞间粘附分子1(ICAM-1/CD54)ELISA KIT

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  • 产品名称:人细胞间粘附分子1(ICAM-1/CD54)ELISA KIT
  • 产品型号:BD-R10163
  • 产品展商:Biddy
  • 产品文档:无相关文档
  • 发布时间:2017-06-27
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简单介绍
本实验采用双抗体夹心ELISA法。所提供的ELISA Kit是典型的夹心法酶联**吸附测定试剂盒(ELISA)。预先包被的抗体为抗人IL-2单克隆抗体。检测相抗体为多克隆抗体,经生物素(biotin)标记。样品和生物素标记抗体先后加入酶标板孔反应后,PBS或TBS洗涤。随后加入过氧化物酶标记的亲和素反应;经过PBS或TBS的彻底洗涤后用底物TMB显色。TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成*终的黄色。颜色的深浅和样品中的待测因子呈正相关。
产品描述
公司简介:
南京比迪生物科技有限公司的产品在相当宽的领域得到广泛的应用,长期和各大高校、研究机构、工厂、企业等建立了深厚的合作关系,我们的企业文化是为树立行业的**地位而不懈努力,为科研事业贡献绵薄之力!公司的核心价值是诚信为本,****,为客户提供高品质的产品、为员工提供发展平台、为社会创造更多价值。主营产品:血清、抗体、酶免试剂盒、生物技术研发,实验室耗材、仪器仪表等。

人细胞间粘附分子1(ICAM-1/CD54)ELISA KIT 试剂盒的性能:
1.样品线性回归与预期浓度相关系数R值为0.92以上。
2.批内与批见应分别小于9%和15%

人细胞间粘附分子1(ICAM-1/CD54)ELISA KIT 操作方法:
1.从已平衡至室温的密封袋中取出试验所需板条,未用的板条和干燥剂请放回铝箔袋内封存于2-8℃。 
2.预留空白孔(若使用双波长读板,空白孔可以不设)。 
3.分别将标本或不同浓度人IL-2标准品(0pg/ml孔加标准品稀释液)加入相应孔中(100μl/孔),用封板胶纸封住反应孔,37℃孵箱孵育90分钟。 
4.提前30分钟制备生物素化人IL-2抗体工作液。 
5.洗板3次。 
6.加入生物素化人IL-2抗体工作液(100μl/孔)。用封板胶纸封住反应孔,37℃孵箱孵育60分钟。 
7.提前30分钟制备酶结合物工作液。室温避光放置。  
8.洗板3次。 
9.除空白孔外,加入酶结合物工作液(100μl/孔)。用封板胶纸封住反应孔,37℃孵箱,避光孵育30分钟。 
10.洗板5次。 
11.加入TMB显色工作液(包括空白孔)100μl/孔,37℃孵箱,避光孵育,当标准曲线高浓度的颜色较深,有明显的颜色梯度的时候,即可终止。试验显色反应请勿超过30分钟。 
12.加入终止液(包括空白孔)100μl/孔,混匀后即刻测量OD(450nm)值(10分钟内)。

人细胞间粘附分子1(ICAM-1/CD54)ELISA KIT 注意事项:
1.试剂盒使用前请保存在2-8℃。除复溶后的标准品,其他成分不可冻结。 
2.浓缩生物素化人IL-2抗体,浓缩酶结合物体积小,运输中颠簸和可能的倒置,会使液体沾到管壁或瓶盖。因此使用前请用手甩几下或1000rpm离心1分钟,以使附着管壁或瓶盖的液体沉积到管底。 
3.浓洗涤液可能会有结晶析出,稀释时可在水浴中加温助溶,使结晶完全溶解后再配制洗涤液。 
4.测试过程中,人IL-2冻干标准品为一次性使用,不得分装。因其浓度较低,溶解两小时候后,会迅速失活。 
5.操作严格按照说明书进行,本试剂不同批号组分不得混用。 
6.配制试剂时,要用旋涡混合仪混匀。加入孔内的试剂,充分混匀对测试结果尤为重要,*好使用微量振荡器(使用*低频率),如无微量振荡器,可在反应前手工轻轻晃动酶标板1分钟,例如做圆周动作,使加入孔中的反应液混匀。 
7.实验用酶标仪应严格按使用说明书规范操作,并在使用前充分预热。
8.酶免试验中人IL-2标准品和样本检测时建议作复孔。 
9.将不用的微孔板放进原铝箔袋中,置2-8℃保存。
10.显色液对光敏感,因此要避免直接暴露在光线下。
11.超过使用有效日期的试剂盒不能应用于实验中。
12.试验结果判定必须以酶标仪读数为准,使用双波长检测时,波长应该设置为450nm和630nm.
13.所有样品,洗涤液和各种废弃物都应按生物废弃物处理。终止液为2M硫酸,使用时必须注意**。
14.各步骤加样均应使用加样器,并经常校准其准确性,以避免试验误差。一次加样时间*好控制在5分钟内,如标本数量多,推荐使用排枪加样。
15.每次试验测定的同时做标准曲线,*好做复孔。如标本中待测物质含量过高(样本OD值大于标准品孔*高浓度的OD值),请先用样品稀释液稀释一定倍数(n倍)后再测定,计算时请*后乘以总稀释倍数(×n×5)。
16.不能检测含NaN3的样品,因NaN3抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。
17.以洗板机洗板时,每孔注液量不应少于350μl, 注意检查加样头是否堵塞。手工洗板时, 用带纸屑的吸水材料应慎重, 防止外源性过氧化物酶类似物或氧化还原物与显色剂发生反应。
18.用终止液终止反应后,请于10分钟内读取OD值。
19.进行复孔实验时,结果计算一定要求平均值。
20.标本溶血可能会有假阳性结果,因此溶血标本不宜进行此项检测。
21.试验时,应该将加过样品的板条放于密闭盒内,并保持湿度约60%左右。
22.为保证恒温箱内的温度为37℃,恒温箱的温度要经常校准。以确保实验温度保持恒定。
23.48T的试剂盒,所有组分均为96T的50%的量。

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