5、注意温度和酸碱度
一般以硅胶为基质的色谱柱*高使用温度不超过60℃，以低于40℃为宜，特别是在流动相pH接近使用限度时，更应降低使用温度。
温度过高会加快键合相的水解和硅胶的溶解，从而使填料性质改变，柱床塌陷，降低柱效，改变峰形。
目前的键合硅胶色谱柱标示的pH适用范围可达2～10，但在实际使用时应避免极端的pH条件，特别是在偏碱性的条件（pH≥8）下使用 ，如必须要在极端的pH条件下使用时，可通过以下方法避免柱损害：
(1)在泵和进样阀之间加装预柱(饱和柱)来饱和流动相
(2)降低使用温度
(3)检验完毕后立即用与所使用的流动相互相混溶的“温和溶剂”彻底清洗。
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