静脉血离体后至完全凝固所需的时间即为凝血时间,它是反映内源性凝血系统各凝血因子活性的筛选实验。在凝血酶作用下,待测血浆中的纤维蛋白原转变为纤维蛋白,当待测血浆中抗凝物质增多时,凝血酶时间会相应延长。
凝血酶试剂盒用于检测人、动物血浆凝血酶时间,凝血酶时间延长见于肝素增多或类肝素抗凝物质存在,纤维蛋白(原)降解产物(FDP)增多以及低(无)纤维蛋白原血症;凝血酶时间缩短见于血样本有微小凝血块或存在钙离子。该试剂盒仅用于科研领域,不宜用于临床诊断或其他用途。 操作步骤(仅供参考):
1、制备待测血浆∶取新鲜待测静脉血1.8ml,与0.2ml柠檬酸钠抗凝剂(109mM)按9:1混合,轻轻颠倒混匀。(或用含有1/10体积的柠檬酸钠抗凝剂的塑料管或硅化玻璃管采血)
2、3000rpm(或2500g)离心10~15min,收集上层液(缺乏血小板的血浆),转移至塑料试管或离心管,以防止血小板被激活;同时应设正常对照血浆。
3、取待测抗凝血浆0.1ml,置于37℃水浴中,温育5min。
4、加入凝血酶溶液0.1ml,记录凝固时间。重复2~3次取平均值。
参考区间:10~16s,若超过正常对照3s以上者为异常。
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