介绍
在基础研究和工业生产中发现的支原体污染是一个严重的问题，感染了87%的细胞系。与细菌和真菌污染不同，细胞培养状态下的支原体污染很难通过视觉和嗅觉来了解。正常情况下，支原体存在于培养细胞中，水平为 1 x 10e6 ~ 1 x 10e8 cfu/ml，但不能用倒置显微镜观察。支原体感染会改变真核细胞的生长和形状，影响细胞功能，因此实验结果差异很大。因此，定期使用支原体检测试剂盒检查支原体的存在非常重要。
PlasmoTest™ - 基于细胞的色彩反应性产品
[原理]
PlasmoTest™ 是一种基于细胞的比色测定法，它利用 Toll 样受体 2 （TLR2） 识别支原体的能力。如果培养基中存在支原体，则 HEK-Blue-2™ 细胞表面的 TLR2 被激活，从而激活 NF-κB 和 AP-1。这些转录因子*终诱导 SEAP（分泌的胚胎碱性磷酸酶）的分泌，导致含有 HEKBlue™ 检测的培养基出现紫色/蓝色变化。因此，支原体感染的存在可以用肉眼或OD 620-655nm确定。
[特征]
-灵敏度：在培养物中检测高达5*10^2 ~5*10^5 cfu/ml-特异性：检测各种可能被污染的粘原体-快速：处理时间小于1小时，O/N孵育后可确认
结果-简单 ：细胞培养上清液可以通过
变色进行检查-可靠：无假阳性
[商品包括]
-
PlasmoTest™ comprises the HEK-Blue™-2 cells (3-7x 10e6 cells)
-
HEK-Blue™ Selection (250X, 2 ml)
-
HEK-Blue™ Detection (1ea/50 ml)
-
HEK-Blue™ water (60 ml)
-
Normocin™ (500X, 1 ml)
-
Positive control & negative control (1 tube each)
[如何使用PlasmoTest™]
-
细胞培养上清液收集500μl用于支原体测试
-
100°C，热处理15分钟
-
通过将 HEK-Blue 检测溶解在 50 ml HEK-Blue™™ 水中（使用前过滤）制备
-
将热处理的样品以50μl的增量转移到96孔板中
-
所包含的对照品也以50μl的增量转移到96孔板中
-
在预热的 HEK-Blue™ 检测培养基中制备 HEK-Blue-2™ 细胞悬液（剩余的 HEK-Blue-2™ 细胞在细胞储存后*多可使用 30 次传代）
-
每孔加入 200 μl（~50,000 个细胞）细胞悬液
-
在37°C的CO 2培养箱中过夜（16-24小时）
-
支原体的存在可以用肉眼确认，也可以通过OD 620-655nm的显色来确认
[表格 1.] 敏感性
订购信息
|
产品名称
|
规格
|
货号
|
|
PlasmoTest™
|
1 kit (250 samples)
|
rep-pt1
|
|
PlasmoTest™ Reagent Kit
|
Refill kit (500 samples)
|
rep-ptrk
|
|
HEK-Blue™ Detection
|
5 pouches
|
hb-det2
|
|
HEK-Blue™ Selection
|
10 x 1 ml
|
hb-sel
|
|
Normocin™
|
500 mg
|
ant-nr-1
|
|
PlasmoTest™ Controls
|
200 tests
|
pt-ctr2
|
** 购买单个 PlasmoTest™ 后，您可以购买补充试剂盒，即[rep-ptrk] PlasmoTest™ Reagent Kit.