Compound 401 是一种合成的 DNA-PK (IC50=0.28 μM) 抑制剂，在体外也靶向作用于 mTOR，但对 PI3K 没有抑制效果。
1、产品物理参数：
常用名
化合物401
英文名
Compound 401
CAS号
168425-64-7
分子量
281.309
密度
1.4±0.1 g/cm3
沸点
456.9±55.0 °C at 760 mmHg
分子式
C16H15N3O2
熔点
无资料
闪点
230.1±31.5 °C
2、技术资料：
体外研究
化合物401是DNA-PK的有效抑制剂（IC 50 =0.28μM）。据报道，化合物401在体外是PI3K，ATM和ATR的不佳抑制剂，但它对mTOR具有活性。化合物401显示针对mTOR的活性（IC 50 =5.3μM）但不显示针对p110α/p85αPI3K的活性（IC 50>100μM）。用化合物401处理细胞阻断由mTOR-Raptor和mTOR-Rictor复合物（分别为核糖体蛋白S6激酶1 Thr389和Akt Ser473）修饰的位点的磷酸化。相反，没有直接抑制Akt Thr308磷酸化，这取决于PI3K。在缺乏DNA-PK的细胞中也观察到类似的效果。化合物401在Raptor免-疫沉淀物中抑制免-疫沉淀的表位标记的mTOR或内源性mTOR。在两种情况下，分别在5μM或10μM化合物401下获得67％或78％的抑制。相反，剂量响应曲线显示在这些浓度下化合物401很难抑制p110α/p85α或p110β/p85αPI3K复合物。在化合物401存在下，TSC1 - / - 成纤维细胞的增殖受到抑制，但TSC1 + / +细胞具有抗性[1]。
激酶实验
用293fectin用AU1-mTOR的cDNA转染FreeStyle 293-F细胞。两天后，裂解细胞并使用AU1抗体制备mTOR免-疫沉淀物。或者，使用Raptor抗体从未转染的细胞中免-疫沉淀mTORC1复合物。使用**表达的谷胱甘肽S-转移酶（GST）-4E-BP1作为底物，在载体（DMSO）或化合物401（1,5和10μM）存在下测定免-疫沉淀物中的激酶活性。通过在SDS样品缓冲液中煮沸来终止激酶反应，并对样品进行SDS-PAGE。通过放射自显影检测磷酸化的4E-BP1。通过闪烁计数[1]量化条带中的放射性。