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文件名称: | 羊金黄色葡萄球菌(SE)酶联免疫分析试剂盒使用说明书 |
公司名称: | 上海莼试生物技术有限公司 |
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羊金黄色葡萄球菌(SE)酶联免疫分析试剂盒使用说明书 本试剂盒仅供研究使用。 检测范围:96T 使用目的: 本试剂盒用于测定羊血清、血浆及相关液体样本中金黄色葡萄球菌(SE)表达。 实验原理 本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中羊金黄色葡萄球菌(SE)表达。用纯化的羊金黄色葡萄球菌(SE)抗体包被微孔板,制成固相抗体,可与样品中金黄色葡萄球菌(SE)相结合,经洗涤除去未结合的抗原和其他成分后再与HRP标记的金黄色葡萄球菌(SE)抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成终的黄色。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),与CUTOFF值相比较,从而判定标本中羊金黄色葡萄球菌(SE)的存在与否。 羊金黄色葡萄球菌(SE)酶联免疫分析试剂盒组成 标本要求 1.标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融 2.不能检测含NaN3的样品,因NaN3抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。 羊金黄色葡萄球菌(SE)酶联免疫分析试剂盒操作步骤 1.编号:将样品对应微孔按序编号,每板应设阴性对照2孔、阳性对照2孔、空白对照1孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同) 2.加样:分别在阴、阳性对照孔中加入阴性对照、阳性对照50μl。然后在待测样品孔先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品10μl。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀, 3.温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟。 4.配液:将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用 5.洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复5次,拍干。 6.加酶:每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外。 7.温育:操作同3。 8.洗涤:操作同5。 9.显色:每孔先加入显色剂A50μl,再加入显色剂B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色10分钟. 10.终止:每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。 11.测定:以空白空调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值)。 测定应在加终止液后15分钟以内进行。 羊金黄色葡萄球菌(SE)酶联免疫分析试剂盒操作程序总结: 计算和结果判定: 试验有效性:阳性对照孔平均值≥1.00; 阴性对照平均值≤0.10 临界值(CUT OFF)计算:临界值=阴性对照孔平均值+0.15 阴性判定:样品OD值< 临界值(CUT OFF)者为金黄色葡萄球菌(SE)阴性 阳性判定:样品OD值≥ 临界值(CUT OFF)者为金黄色葡萄球菌(SE)阳性 。 注意事项 1.操作严格按照说明书进行,本试剂不同批号组分不得混用。 2.试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用,酶标包被板开封后如未用完,板条应装入密封袋中保存。 3.浓洗涤液可能会有结晶析出,稀释时可在水浴中加温助溶,洗涤时不影响结果。 4.封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。 5.底物请避光保存。 6.试验结果判定必须以酶标仪读数为准,使用双波长检测时,参考波长为630nm 7.所有样品,洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。终止液为2M的硫酸,使用时必须注意安全。 保存条件及有效期 1.试剂盒保存:2-8℃。 2.有效期:6个月 |
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