1、人美洲商陆素(PWM)elisa检测试剂盒原理用缓冲液将抗体稀释至1-10ug/ml。在反应孔中加0.1ml,4℃ 过夜。次日,弃去孔内溶液,用洗涤缓冲液洗3次。
2、加样:加一定稀释的待检样品0.05ml于上述已包被之反应孔中,置37℃ 孵育1小时。然后洗涤(同时做空白孔,阴性对照孔及阳性对照孔)。
3、加酶标抗体:在各反应孔中,加入新鲜稀释的酶标抗体(经滴定后的稀释度)0.05ml。37℃ 孵育0.5~1小时,洗涤。
4、加底物液显色:在各反应孔中加入临时配制的TMB底物溶液0.1ml,37℃ 10~30分钟。
5、终止反应:在每孔中加入1滴终止液混匀
6、结果判定:在450mm处测光值,直接用肉眼观察结果:反应孔内颜色越深,阳性程度越强,阴性反应为无色或极浅,依据所呈颜色的深浅,以“+”、“-”号表示。也可测OD值:在ELISA检测仪上,于450nm(若以ABTS显色,则410nm)处,以空白对照孔调零后测各孔OD值,若大于规定的阴性对照OD值的2.1倍,即为阳性。
人美洲商陆素(PWM)elisa检测试剂盒原理的服务承诺:
一、产品质量保证,有问题免费包换
二、提供免费代测服务(为客户提供来样检测服务,限度实验结果的有效性)
三、提供全程技术指导
产品名称:人美洲商陆素(PWM)elisa检测试剂盒原理
英文名称:Human pokeweed mitogen, PWM Elisa Kit
规格:48孔(T)/96孔(T)
品牌:上海莼试
代测服务:全程ELISA实验技术指导,免费代做实验(从标本收集、保存、预试验、实验、数据分析等全实验过程提供完整的技术指导。)
运输:快递(生物干冰或冰袋运输)2-3天。
样本:血清、血浆、细胞上清液、尿液、体液、灌洗液、脑脊髓、心房水、胸房水、组织等。
保存条件:2~8℃,佳温度6摄氏度,有效期6个月。
上海莼试“质量是企业是生命之源”,选购人美洲商陆素(PWM)elisa检测试剂盒原理势如下:
1)原装进口抗体——高效、灵敏、特异
2)规范包**作——吸附均匀、吸附性好、空白值低、空底透明度高
3)先进的优化方案——回收利用率高、可靠性强
4)适用于体液、组织匀浆,细胞培养上清液、尿液等各种类型的样本。
5)可检测指标齐全:生长因子、炎症因子、脂肪因子、基质金属蛋白酶等等X
人美洲商陆素(PWM)elisa检测试剂盒原理操作流程如下:
(1)待测样品孔中每孔加入待测样品100μl,每种样品设3个平行孔;设两个阴性对照孔,每孔加未处理组的细胞裂解液100μl;另设一个空白对照孔,加入纯细胞裂解液100μl。
(2)酶标板置4℃,包被过夜。
(3)洗板:吸干孔内反应液,用洗涤液过洗一遍(将洗涤液注满板孔后,即甩去),之后将洗涤液注满板孔,浸泡1-2分钟,间歇摇动。甩去孔内液体后在吸水纸上拍干。重复洗涤3-4次。
(4)阴性对照孔每孔加入PBS 50μl,样品孔及空白孔每孔加入1:500稀释的兔抗人AIF抗体工作液50μl。
(5)酶标板置37℃培养箱的湿盒内,孵育60min。
(6)洗板,同(4)。
(7)每孔加1:5000稀释的HRP-标记的山羊抗兔抗体工作液 100μl。
(8)酶标板置37℃培养箱的湿盒内,孵育60min。
(9)洗板,同(4)。
(10)每孔加TMB显色液 100μl,轻轻混匀10s,置37℃暗处反应15-20min。
(11)每孔加100μl 2mol/L H2SO4终止反应。
(12)分别测450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2,终测得的OD值为两者之差(W1-W2),以减少由容器上的划痕或指印等造成的光干扰。
(13)数据处理:在得出标本(S)和阴性对照(N)的 OD值后,计算S/N值。S/N≥2.1为阳性判定标准。
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ADP核糖基化因子相关蛋白1
磷酸化丝裂原活化蛋白激酶磷酸酶p38γ抗体
凋亡诱导受体PLEKHG5抗体
粘蛋白7抗体