操作步骤:
1)人胚肾二倍体细胞;HEK-2哪里有卖贴壁细胞传代:提前将培养基、PBS放入37℃水浴锅内预热,用75%酒精擦拭后再放入超净台内,吸除或倒掉细胞瓶内旧培养液,加少量PBS润洗细胞,加入适量胰酶,使胰酶的量能盖住细胞,37℃孵育,每隔2~3min显微镜下观察,待贴壁细胞间间隙变大、细胞趋于圆形但还未漂起时弃去胰酶,加入新鲜培养基,晃动细胞瓶,终止胰酶作用,用吸管小心吹打贴壁的细胞,制成细胞悬液。控制吹打的力度,避免产生大量的气泡,将细胞悬液分别接种到另外的2~3个细胞瓶内,加入新鲜培养基,置37℃温箱培养,隔天观察贴壁生长情况。
2)悬浮细胞传代:将细胞悬液转移到无菌离心管内,1000rpm离心5min,弃去上清,加入新鲜的培养基,用吸管小心吹散沉淀,制成细胞悬液,将细胞悬液分别接种到另外的2~3个细胞瓶内,加入新鲜培养基,置37℃温箱培养。
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1. 人胚肾二倍体细胞;HEK-2哪里有卖细胞纯度高:原代分离得到的目的细胞*高纯度可达到95%以上;
2. 细胞活力强:原代分离的细胞一般不能长久传代,提供P0-P3代的细胞,活力达80%以上,无污染;
3. 多种鉴定方式:可根据需求提供流式细胞检测、细胞化学、Realtime PCR及蛋白印迹等多种检测方法。
细胞名称 人胚肾二倍体细胞;HEK-2哪里有卖
形态特性 上皮细胞样
生长特性 贴壁生长
特征特性 该细胞系来自一女性胎儿的正常肾组织。中国科学院昆明细胞库于1986年建立。
培养条件 DMEM-H: Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose) 10%FBS
传代方法 1:2传代;3-4天一次
传代情况 P4
冻存条件 基础培养基+5%DMSO+20%FBS
支原体检测 荧光法(-)
STR
同工酶
染色体
冻存:
人胚肾二倍体细胞;HEK-2哪里有卖对培养的细胞进行冻存的*佳方法是将细胞置于含有(DMSO)等冷冻保护剂的完全培养基中于液氮中储存。冷冻保护剂可降低培养基的冰点,并可减缓冷却速度吗,大大降低冰晶形成的危险 (冰晶可损伤细胞,导致细胞死亡)。
注:DMSO 可促进有机分子进入组织。操作含DMSO的试剂时,应采用与此类物质**危害相适应的设备和操作规范,并应按照当地法规处置此类试剂。
细胞冻存指导原则
冻存细胞系以备将来之用时,必须遵守以下原则。与其他细胞培养操作一样,我们建议您严格遵守您所用细胞系附带的操作说明,以便获得*佳结果。
1)在高细胞浓度情况下进行培养细胞的冻存,并且细胞传代次数尽可能少。确保冻存前活细胞百分比至少为90%。请注意*佳冻存条件取决于所用细胞系。
2)细胞应缓慢冷冻,可使用可控制降温速度的低温冰箱或者低温冷冻容器使温度每分钟大约降低1°C。
3)必须使用推荐的冻存培养基。冻存培养基中应含有 DMSO 或者甘油等冷冻保护剂
4)将冷冻的细胞于 -70°C 以下温度储存;温度高于 -50°C 时,冷冻的细胞将开始变质。
5)必须使用无菌冻存管储存冷冻的细胞。装有冷冻细胞的冻存管可浸于液氮或者在液氮上方的气相空间内保存
6)必须穿戴个人防护设备。
7)所有与细胞接触的溶液和设备均应为无菌状态。必须采用正确的无菌技术,并且在层流通风橱内进行。
动物细胞培养,大致的步骤是这样:
1.人胚肾二倍体细胞;HEK-2哪里有卖从动物胚胎或者一些刚出生的动物的器官或者组织上取得细胞,配制成细胞悬浮液.把细胞液放到培养瓶中,在培养箱里培养--------原代培养.
但是,不要以为这样就能一直无限培养下去.
因为【已通过STR鉴定】在那个瓶壁上生长的时候,如果大量增殖,细胞之间会彼此相碰,细胞细胞就会停止分裂增殖,出现一种接触抑制.
2.我们为了它们能继续增殖,就用胰蛋白酶再把它们分开,然后再配制成细胞悬浮液,分开装到好几个瓶子里继续培养--------传代培养.
4.它们都是传代培养里面的概念.都是10代以后的
5.细胞株是传代培养里10~50(不同物种不同组织细胞有差别吧)代,细胞系是50代以后的;
6.对于细胞繁殖而言,传到10代就很不容易了,所以细胞株是极少数的细胞
7.50代以后,细胞繁殖会出现另一个危机,基本上没有什么细胞能再传下去了.但是,有细胞发生了基因突变,像一个癌细胞一样无限地分裂下去,这就是细胞系.
以下是人胚肾二倍体细胞;HEK-2哪里有卖的相关产品。
HSP47 热休克蛋白-47抗体 0.1ml
Rabbit Anti-horse IgG/APC APC标记的兔抗马IgG 0.1ml
Goat Anti-Guinea pig IgG/PE-CY5 PE-CY5标记的羊抗豚鼠IgG 0.1ml
SARS S-protein 抗冠状病毒表面S蛋白抗体 0.1ml
phospho-c-Jun(Thr249) 磷酸化原癌基因c-Jun抗体 0.1ml
phospho-HDAC6 (Ser22) 磷酸化组蛋白去乙酰化酶6抗体 0.1ml
Integrin alpha 2/CD49b 整合素α2抗体 0.1ml
BAG2 Bcl-2结合抑凋亡蛋白2抗体 0.1ml
GRM3 促代谢型谷氨酸受体M3抗体 0.2ml
BIN1 桥连整合因子蛋白抗体 0.1ml
MAS1L G蛋白偶联受体MAS相关蛋白抗体 0.2ml
硫氢化钠水合物 进口、国产 英文名称: Sodium hydrosulfide hydrate 含量: 3.5N,200-250目
邻位 英文名称 对照品 规格: 20mg/支进口/国产 含量: GC法含量测定用
Pfu DNA聚合酶 进口、国产 英文名称: Pfu DNA Polymerase 含量: BR,200u/mg,兔肌,粉末
β-异亚硝基丙烷 进口、国产 英文名称: Acetoxime 含量: LR,96%
人胚肾二倍体细胞;HEK-2哪里有卖垂体后叶 效价测定 进口/国产 2-8℃,避光 规格: 约30mg
2,3,5,4-四羟基二-2-O-β-D-葡萄糖苷 英文名称 对照品 规格: 20mg/支进口/国产 含量: 含量测定
马兜铃酸A 英文名称 Aristolohic Acid A 规格: 20mg/支进口/国产 含量: ≥95%
烟酰胺 英文名称 Nicotinamide 规格: 20mg/支进口/国产 含量: HPLC≥99.5%
醋酯 英文名称 含量测定 规格: 20mg/支进口/国产 含量: 111746-200501
氨基紫色酸 进口、国产 英文名称: Murexide 含量: BS
α-萘喹啉 进口、国产 英文名称: 7,8-Benzoquinoline 含量: CP,98.5%