1)将培养基在37℃水浴锅预热;准备一个15mL无菌的离心管,加入8mL预热培养基。
2)将冻存细胞从液氮罐中取出,快速放入37℃水浴锅中复温(可准备一洁净的烧杯,装满37℃的水,细胞冻存管取出后迅速放入烧杯内,再逐步转移到水浴锅中)。轻轻晃动冻存管,使细胞能在1~2min内完全解冻,使细胞能尽快通过易受损的温度段(-5~0℃)。注意冻存管管口不能没入水中,BRL(大鼠肝细胞)避免引起污染。
3)用75%酒精擦拭冻存管后再置于超净台内,将管内细胞转移至准备好的离心管内,轻轻吹打液体,使细胞均匀分散,降低DMSO浓度,吹打时避免产生气泡。用新鲜培养基洗管壁2次,均转移至离心管内。
4)800rpm离心5min,弃上清,加入新鲜的培养基,吹打制成细胞悬液。
5)将细胞悬液转移至T25细胞瓶内,补加适量的培养基,轻轻晃动细胞瓶使细胞分布均匀,放入温箱内培养。
6)**天观察细胞贴壁生长情况,换新鲜培养基以去除死细胞。继续培养,待细胞长至80~90%汇合时正常传代。一般刚复苏的细胞需经过2~3次传代,细胞活力恢复后才能进行后续的实验。
以下是人咽鳞癌细胞;FaDu图片产品信息的认购信息:
细胞名称 人咽鳞癌细胞;FaDu图片
形态特性 上皮细胞
生长特性 贴壁生长
特征特性 1968年从一位印度下咽骨肿瘤患者的钻孔活组织切片中建立了FaDu细胞株。 在建立的细胞株中发现细胞质中含有成束的细丝,并且细胞分界上的桥粒特别突出。
培养条件 MEM-EBSS: Minimum Essential Medium (MEM Eagles with Earle's Balanced Salts) 上等胎牛血清,10%
传代方法 消化3-5分钟。1:2。3天内可长满。
传代情况 P(116+5)
冻存条件 完全培养基+8%DMSO
支原体检测 阴性
STR Amelogenin:;CSF1PO:12;D13S317:8,9;D16S539:11;D18S51:16;D19S433:14,16;D21S11:31.2;D2S1338:19;D3S1358:17,18;D5S818:12;D7S820:11,12;D8S1179:13;FGA:25;TH01:8;TPOX:11;vWA:15,17
同工酶
染色体
注意事项:
1. 人咽鳞癌细胞;FaDu图片接收到细胞,肉眼观察细胞培养基颜色,显微镜观察细胞生长情况,并对细胞进行不同倍数拍照(建议收到时的培养瓶拍一张照片,显微镜拍收到时的细胞100X,200X各一张)。
2.用75%的酒精(建议配置75%的酒精的水是过的)。
3.严格无菌操作,打开细胞培养瓶。
4.将细胞培养瓶内的培养基用吸管完全吸出(严禁直接倾倒),放入另一无菌容器中(建议换新的培养基培养细胞)。
5.用PBS 2-3ml/次轻轻洗细胞表面,洗3-4次遍,加入0.05%胰酶-EDTA1-1.5ml,显微镜下观察细胞变圆,轻轻拍打培养瓶直到细胞脱落,加入终止液终止。
6.1000rpm,5min离心,重悬细胞。
7.换新的细胞培养瓶,37℃,5%CO2培养。
细胞培养的优点:
1.人咽鳞癌细胞;FaDu图片研究的对象是活细胞
在实验过程中,根据要求可始终保持细胞活力,并可长时间监控、检测甚至定量评估一部分活细胞的情况,包括活细胞的形态、结构、生命活动等。
2.研究条件可以人为控制
pH、温度、氧气、二氧化碳、张力等物理化学的条件,可以根据实际需要进行人为的控制,同时,可以施加化学、物理、生物等因素作为条件而进行实验观察,这些因素同样可以处于严格控制之下。
3.研究的样本可以达到比较均一性
通过细胞培养一定代数后,所得到的细胞系则可以达到均一性而属于同一类型的细胞,需要时,可采用克隆化等方法使细胞达到纯化。
4.研究内容便于观察、检测和记录
采用各种研究技术:如倒置生物显微镜、荧光显微镜、电子显微镜、流式细胞术、激光共焦显微镜、组织化学、原位杂交、同位素标记等各种仪器设备
记录方式可采用摄影照片、缩时电影、电视等多种手段。
5.研究的范围比较广泛
应用的学科领域较为宽广,如细胞学、学、肿瘤学、生物化学、遗传学、分子生物学等;
适用的对象范围广,从低等动物到高等动物,一种动物的不同年龄阶段以及不同组织,都可进行有针对性的研究。
6.研究的费用相对较经济
可提供大量、同一时期、重复性好的、生物学性状相似的实验对象。
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ITGB1BP2/CHORDC3 整合素β1结合蛋白2抗体 0.2ml
Goat Anti-Mouse IgG/APC APC标记的羊抗小鼠IgG 0.1ml
SPARCL1/Ecm2 细胞外基质蛋白2抗体 0.2ml
phospho-FANCD2(Ser222) 磷酸化FANCD2抗体 0.1ml
KDM1 组蛋白赖氨酸特异性脱甲基酶1抗体 0.1ml
HN protein 鸡新城疫血凝素-神经氨酸酶抗体 1ml
C1ORF111 1号染色体开放阅读框111抗体 0.2ml
Neurturin 神经生长因子抗体 0.1ml
Rabbit Anti-horse IgM/Alexa Fluor 647 Alexa Fluor 647标记的兔抗马IgM 0.1ml
LRRC15 富含亮氨酸重复蛋白15抗体 0.2ml
GPR172B G蛋白偶联受体172B抗体 0.2ml
莲心碱;Liensinine CAS 2586-96-1 规格: 20mg 订购|咨询
白鲜碱 CAS 规格: HPLC≥98%;20mg/支 订购|咨询
野麦畏;纯品型;标准品;有证书 CAS 2303-17-5 规格: 0.1g 订购|咨询
木蝴蝶苷B; 木蝴蝶甙B CAS Oroxin B 规格: HPLC≥98%,20mg/支 订购|咨询
人咽鳞癌细胞;FaDu图片山麦冬皂苷B CAS 规格: 20mg 订购|咨询
紫杉醇 CAS 33069-62-4 规格: 20mg 订购|咨询
红景天 CAS 规格: 2.5g 订购|咨询
细辛脂素;(-)-asarinin CAS 133-04-0 规格: 20mg 订购|咨询
右旋奎宁酸 CAS 77-95-2 规格: ≥98%,20mg/vial 订购|咨询
5,7-二羟基色原 CAS 31721-94-5 规格: 10mg 订购|咨询
竹红菌乙素 CAS 123940-54-5 规格: HPLC≥97%;20mg 订购|咨询
甲氧苄啶 CAS 规格: 100mg 订购|咨询