1)将培养基在37℃水浴锅预热;准备一个15mL无菌的离心管,加入8mL预热培养基。
2)将冻存细胞从液氮罐中取出,快速放入37℃水浴锅中复温(可准备一洁净的烧杯,装满37℃的水,细胞冻存管取出后迅速放入烧杯内,再逐步转移到水浴锅中)。轻轻晃动冻存管,使细胞能在1~2min内完全解冻,使细胞能尽快通过易受损的温度段(-5~0℃)。注意冻存管管口不能没入水中,BRL(大鼠肝细胞)避免引起污染。
3)用75%酒精擦拭冻存管后再置于超净台内,将管内细胞转移至准备好的离心管内,轻轻吹打液体,使细胞均匀分散,降低DMSO浓度,吹打时避免产生气泡。用新鲜培养基洗管壁2次,均转移至离心管内。
4)800rpm离心5min,弃上清,加入新鲜的培养基,吹打制成细胞悬液。
5)将细胞悬液转移至T25细胞瓶内,补加适量的培养基,轻轻晃动细胞瓶使细胞分布均匀,放入温箱内培养。
6)**天观察细胞贴壁生长情况,换新鲜培养基以去除死细胞。继续培养,待细胞长至80~90%汇合时正常传代。一般刚复苏的细胞需经过2~3次传代,细胞活力恢复后才能进行后续的实验。
以下是仓鼠/小鼠杂交瘤细胞;145-2C11图片产品信息的认购信息:
细胞名称 仓鼠/小鼠杂交瘤细胞;145-2C11图片
形态特性 母细胞样
生长特性 悬浮生长
特征特性 杂交瘤细胞,用BM10-37小鼠CTL细胞克隆(抗H-2 Kb)**美国仓鼠,取脾细胞与Sp2/0-Ag14 骨髓瘤细胞融合得到;抗小鼠CD3,IgG型。
培养条件 IMDM: Iscove's Modiefied Dulbecco's Medium 10%FBS;4mM L-glutamine
传代方法 维持细胞浓度在0.1~1×106 cells/ml;2~3天换液1次。
传代情况
冻存条件 基础培养基+5%DMSO+20%FBS
支原体检测 培养法(-)
STR -
同工酶
染色体
注意事项:
1. 仓鼠/小鼠杂交瘤细胞;145-2C11图片接收到细胞,肉眼观察细胞培养基颜色,显微镜观察细胞生长情况,并对细胞进行不同倍数拍照(建议收到时的培养瓶拍一张照片,显微镜拍收到时的细胞100X,200X各一张)。
2.用75%的酒精(建议配置75%的酒精的水是过的)。
3.严格无菌操作,打开细胞培养瓶。
4.将细胞培养瓶内的培养基用吸管完全吸出(严禁直接倾倒),放入另一无菌容器中(建议换新的培养基培养细胞)。
5.用PBS 2-3ml/次轻轻洗细胞表面,洗3-4次遍,加入0.05%胰酶-EDTA1-1.5ml,显微镜下观察细胞变圆,轻轻拍打培养瓶直到细胞脱落,加入终止液终止。
6.1000rpm,5min离心,重悬细胞。
7.换新的细胞培养瓶,37℃,5%CO2培养。
细胞培养的优点:
1.仓鼠/小鼠杂交瘤细胞;145-2C11图片研究的对象是活细胞
在实验过程中,根据要求可始终保持细胞活力,并可长时间监控、检测甚至定量评估一部分活细胞的情况,包括活细胞的形态、结构、生命活动等。
2.研究条件可以人为控制
pH、温度、氧气、二氧化碳、张力等物理化学的条件,可以根据实际需要进行人为的控制,同时,可以施加化学、物理、生物等因素作为条件而进行实验观察,这些因素同样可以处于严格控制之下。
3.研究的样本可以达到比较均一性
通过细胞培养一定代数后,所得到的细胞系则可以达到均一性而属于同一类型的细胞,需要时,可采用克隆化等方法使细胞达到纯化。
4.研究内容便于观察、检测和记录
采用各种研究技术:如倒置生物显微镜、荧光显微镜、电子显微镜、流式细胞术、激光共焦显微镜、组织化学、原位杂交、同位素标记等各种仪器设备
记录方式可采用摄影照片、缩时电影、电视等多种手段。
5.研究的范围比较广泛
应用的学科领域较为宽广,如细胞学、学、肿瘤学、生物化学、遗传学、分子生物学等;
适用的对象范围广,从低等动物到高等动物,一种动物的不同年龄阶段以及不同组织,都可进行有针对性的研究。
6.研究的费用相对较经济
可提供大量、同一时期、重复性好的、生物学性状相似的实验对象。
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MAP4K6/MINK1 丝裂原活化蛋白激酶MAP4K6抗体 规格: 0.1ml
Cullin 7 泛素连接酶CUL7蛋白抗体 规格: 0.2ml
C21orf128 21号染色体开放阅读框128抗体 规格: 0.2mlBAAT 链脂肪酸酰基辅酶A水解酶抗体 规格: 0.2ml
Factor VII 凝因子7抗体 规格: 0.1ml
PTGER1 前列素EP1受体抗体 规格: 0.1mlNoggin 指(趾)关节粘连NOG蛋白抗体 0.2ml
EDNRB 内皮素受体B抗体 规格: 0.1ml
FBRSL1 乙型肝炎病毒X蛋白反转录蛋白9抗体 规格: 0.2ml
TNF-alpha 瘤坏死因子-α抗体 0.1ml
phospho-MEK5(Ser137) 磷酸化丝裂原活化蛋白激酶激酶5抗体 规格: 0.1ml
POC5 细胞中心粒蛋白抗体 规格: 0.2ml
C10orf63/Enkurin 10号染色体开放阅读框63抗体 规格: 0.2mlPXR 孤儿核受体PAR1抗体 规格: 0.2ml
菘蓝Isatis idigotica1-Methoxyindole-3-carboxylic acid1-甲氧基吲哚-3-羧酸91913-76-7C10H9NO3 ≥95%
光滑黄皮Clausena lenis1-Methyl-2-pentyl-4(1H)-quinolinone1-甲基-2-戊基-4(1H)-喹啉酮22048-98-2C15H19NO ≥98.5%
土瓜狼毒Euphorbia prolifera24-Methylenecycloartan-3-ol24-亚甲基环阿屯醇1449-09-8C31H52O ≥90%
仓鼠/小鼠杂交瘤细胞;145-2C11图片向天果Swietenia macrophylla24-Methylenecycloartanol acetatenone1259-94-5C33H54O2 ≥90%
大叶千斤拔Flemingia macrophylla2-C-Methyl-D-erythrono-1,4-lactone(3R,4R)-二氢-3,4-二羟基-3-甲基-2(3H)-呋喃酮18465-71-9C5H8O4 ≥95%
虎杖Polygonum cuspidatum2-Methoxystypandrone2-甲氧基-6-乙酰基-7-甲基胡桃酮85122-21-0C14H12O5 ≥98%
构树Broussonetia papyrifera2'-O-Methylbroussonin C1-(4-羟基-2-甲氧基基)-3-(4-羟基-3-异戊烯基基)丙烷376362-03-7C21H26O3 ≥95%
苏木Caesalpinia sappan2'-O-Methylisoliquiritigenin2''-O-甲基异甘草苷元51828-10-5C16H14O4 ≥98%
红豆蔻Alpinia galanga2'-O-Methylhelichrysetin4,4'-二羟基-2',6'-二甲氧基查尔酮123316-64-3C17H16O5 ≥95%
苦参Sophora flavescens2'-O-Methylkurarinonenone270249-38-2C27H32O6 ≥95%
滇西八角 Illicium merrillianum2'-O-Methylperlatolic acid2'-O-甲基配列地衣酸38968-07-9C26H34O7 ≥95%