1）将培养基在37℃水浴锅预热；准备一个15mL无菌的离心管，加入8mL预热培养基。
2）将冻存细胞从液氮罐中取出，快速放入37℃水浴锅中复温（可准备一洁净的烧杯，装满37℃的水，细胞冻存管取出后迅速放入烧杯内，再逐步转移到水浴锅中）。轻轻晃动冻存管，使细胞能在1~2min内完全解冻，使细胞能尽快通过易受损的温度段（-5~0℃）。注意冻存管管口不能没入水中，BRL(大鼠肝细胞)避免引起污染。
3）用75%酒精擦拭冻存管后再置于超净台内，将管内细胞转移至准备好的离心管内，轻轻吹打液体，使细胞均匀分散，降低DMSO浓度，吹打时避免产生气泡。用新鲜培养基洗管壁2次，均转移至离心管内。
4）800rpm离心5min，弃上清，加入新鲜的培养基，吹打制成细胞悬液。
5）将细胞悬液转移至T25细胞瓶内，补加适量的培养基，轻轻晃动细胞瓶使细胞分布均匀，放入温箱内培养。
6）**天观察细胞贴壁生长情况，换新鲜培养基以去除死细胞。继续培养，待细胞长至80~90%汇合时正常传代。一般刚复苏的细胞需经过2~3次传代，细胞活力恢复后才能进行后续的实验。
以下是小鼠胚胎成纤维细胞(来自NIH3T3)；PA12图片产品信息的认购信息：
细胞名称 小鼠胚胎成纤维细胞(来自NIH3T3)；PA12图片
形态特性 成纤维细胞样
生长特性 贴壁生长
特征特性 该细胞来自NIH/3T3，可作逆转录病毒的包装细胞。
培养条件 DMEM-H: Dulbecco＇s Modified Eagle＇s Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose) 10%FBS
传代方法 1:3传代；3~4天1次。
传代情况 C5
冻存条件 基础培养基+5%DMSO+20%FBS
支原体检测 培养法（-）
STR -
同工酶
染色体
注意事项：
1. 小鼠胚胎成纤维细胞(来自NIH3T3)；PA12图片接收到细胞，肉眼观察细胞培养基颜色，显微镜观察细胞生长情况，并对细胞进行不同倍数拍照（建议收到时的培养瓶拍一张照片，显微镜拍收到时的细胞100X,200X各一张）。
2.用75%的酒精（建议配置75%的酒精的水是过的）。
3.严格无菌操作，打开细胞培养瓶。
4.将细胞培养瓶内的培养基用吸管完全吸出（严禁直接倾倒），放入另一无菌容器中（建议换新的培养基培养细胞）。
5.用PBS 2-3ml/次轻轻洗细胞表面，洗3-4次遍，加入0.05%胰酶-EDTA1-1.5ml,显微镜下观察细胞变圆，轻轻拍打培养瓶直到细胞脱落，加入终止液终止。
6.1000rpm，5min离心，重悬细胞。
7.换新的细胞培养瓶，37℃，5%CO2培养。
细胞培养的优点：
1.小鼠胚胎成纤维细胞(来自NIH3T3)；PA12图片研究的对象是活细胞
在实验过程中，根据要求可始终保持细胞活力，并可长时间监控、检测甚至定量评估一部分活细胞的情况，包括活细胞的形态、结构、生命活动等。
2.研究条件可以人为控制
pH、温度、氧气、二氧化碳、张力等物理化学的条件，可以根据实际需要进行人为的控制，同时，可以施加化学、物理、生物等因素作为条件而进行实验观察，这些因素同样可以处于严格控制之下。
3.研究的样本可以达到比较均一性
通过细胞培养一定代数后，所得到的细胞系则可以达到均一性而属于同一类型的细胞，需要时，可采用克隆化等方法使细胞达到纯化。
4.研究内容便于观察、检测和记录
采用各种研究技术：如倒置生物显微镜、荧光显微镜、电子显微镜、流式细胞术、激光共焦显微镜、组织化学、原位杂交、同位素标记等各种仪器设备
记录方式可采用摄影照片、缩时电影、电视等多种手段。
5.研究的范围比较广泛
应用的学科领域较为宽广，如细胞学、学、肿瘤学、生物化学、遗传学、分子生物学等；
适用的对象范围广，从低等动物到高等动物，一种动物的不同年龄阶段以及不同组织，都可进行有针对性的研究。
6.研究的费用相对较经济
可提供大量、同一时期、重复性好的、生物学性状相似的实验对象。
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Cytokeratin 5/CK5 细胞角蛋白5抗体 规格: 0.1ml
phospho-GAB2 (Tyr643) 磷酸化接蛋白Gab2抗体 规格: 0.1ml
RRAS2 畸胎瘤基因RAS相关病毒抗体 规格: 0.2ml
Cathepsin Z 组织蛋白酶z抗体 规格: 0.1mlEntactin/Nidogen 巢蛋白1抗体 规格: 0.2ml
Defensin β1 防御素β1抗体 规格: 0.1ml
UCN2/Urotensin II 尾加压素2抗体 规格: 0.1ml
CCDC46 卷曲螺旋结构域蛋白46抗体 规格: 0.2ml
CD170/Siglec-5 唾液酸结合性球蛋白样凝集素5抗体 规格: 0.1ml
MEF2D 肌细胞特异性增强因子2D抗体 规格: 0.2ml
phospho-NFKB p65(Thr254) 磷酸化细胞核因子抗体 规格: 0.1mlCDC2L6 细胞分裂周期2样蛋白激酶6抗体 规格: 0.2ml
Rabbit Anti-Goat IgM/Alexa Fluor 488 Alexa Fluor 488标记的兔抗羊IgM 规格: 0.1ml
北细辛 Asarum heterotropoides Fr.Schmidt var.mandshuricumMethyl eugenol甲基丁香酚93-15-2C11H14O2 ≥98%
大百部Stemona tuberosaMethyl ferulate阿魏酸甲酯22329-76-6C11H12O4 ≥95%
栾树Koelreuteria paniculata LaxmMethyl gallate没食子酸甲酯99-24-1C8H8O5 ≥98%
枸橘Poncirus trifoliata (L.)Methyl hesperidin甲基橙皮甙11013-97-1C29H36O15 ≥98%
小鼠胚胎成纤维细胞(来自NIH3T3)；PA12图片六棱菊Laggera alataMethyl isocostate异肋骨甲酯132342-55-3C16H24O2≤80%
水蓼Polygonum hydropiperMethyl isodrimeninol(1R,5aS,9aS,9bR)-1,3,5,5a,6,7,8,9,9a,9b-十氢-1-甲氧基-6,6,9a-**基萘并[1,2-c]呋喃442851-27-6C16H26O2 ≥96%
催吐萝芙木Rauvolfia vomitoriaMethyl levulinate乙酰丙酸甲酯624-45-3C6H10O3 ≥95%
垂枝石松Lycopodium phlegmariaMethyl lycernuate Anone56218-46-3C31H50O4 ≥95%
羽叶白头树Garuga pinnataMethyl L-pyroglutamateL-焦谷氨酸甲酯4931-66-2C6H9NO3 ≥95%
红背桂花Excoecaria cochinchinensisMethyl orsellinate苔色酸甲酯3187-58-4C9H10O4 ≥95%
**松Pseudolarix kaempferiMethyl pseudolarate A土槿甲酸甲酯 A82508-33-6C23H30O6 ≥95%