1)将培养基在37℃水浴锅预热;准备一个15mL无菌的离心管,加入8mL预热培养基。
2)将冻存细胞从液氮罐中取出,快速放入37℃水浴锅中复温(可准备一洁净的烧杯,装满37℃的水,细胞冻存管取出后迅速放入烧杯内,再逐步转移到水浴锅中)。轻轻晃动冻存管,使细胞能在1~2min内完全解冻,使细胞能尽快通过易受损的温度段(-5~0℃)。注意冻存管管口不能没入水中,BRL(大鼠肝细胞)避免引起污染。
3)用75%酒精擦拭冻存管后再置于超净台内,将管内细胞转移至准备好的离心管内,轻轻吹打液体,使细胞均匀分散,降低DMSO浓度,吹打时避免产生气泡。用新鲜培养基洗管壁2次,均转移至离心管内。
4)800rpm离心5min,弃上清,加入新鲜的培养基,吹打制成细胞悬液。
5)将细胞悬液转移至T25细胞瓶内,补加适量的培养基,轻轻晃动细胞瓶使细胞分布均匀,放入温箱内培养。
6)**天观察细胞贴壁生长情况,换新鲜培养基以去除死细胞。继续培养,待细胞长至80~90%汇合时正常传代。一般刚复苏的细胞需经过2~3次传代,细胞活力恢复后才能进行后续的实验。
以下是小鼠抗人IgA杂交瘤细胞;mAbhIgA-495图片产品信息的认购信息:
细胞名称 小鼠抗人IgA杂交瘤细胞;mAbhIgA-495图片
形态特性 母细胞样
生长特性 半贴壁生长
特征特性
培养条件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 10%FBS
传代方法 保持细胞密度在1×105~1×106 cells/ml之间,每周换液2~3次
传代情况
冻存条件 基础培养基+8%DMSO+20%FBS
支原体检测 培养法(-)
STR -
同工酶
染色体
注意事项:
1. 小鼠抗人IgA杂交瘤细胞;mAbhIgA-495图片接收到细胞,肉眼观察细胞培养基颜色,显微镜观察细胞生长情况,并对细胞进行不同倍数拍照(建议收到时的培养瓶拍一张照片,显微镜拍收到时的细胞100X,200X各一张)。
2.用75%的酒精(建议配置75%的酒精的水是过的)。
3.严格无菌操作,打开细胞培养瓶。
4.将细胞培养瓶内的培养基用吸管完全吸出(严禁直接倾倒),放入另一无菌容器中(建议换新的培养基培养细胞)。
5.用PBS 2-3ml/次轻轻洗细胞表面,洗3-4次遍,加入0.05%胰酶-EDTA1-1.5ml,显微镜下观察细胞变圆,轻轻拍打培养瓶直到细胞脱落,加入终止液终止。
6.1000rpm,5min离心,重悬细胞。
7.换新的细胞培养瓶,37℃,5%CO2培养。
细胞培养的优点:
1.小鼠抗人IgA杂交瘤细胞;mAbhIgA-495图片研究的对象是活细胞
在实验过程中,根据要求可始终保持细胞活力,并可长时间监控、检测甚至定量评估一部分活细胞的情况,包括活细胞的形态、结构、生命活动等。
2.研究条件可以人为控制
pH、温度、氧气、二氧化碳、张力等物理化学的条件,可以根据实际需要进行人为的控制,同时,可以施加化学、物理、生物等因素作为条件而进行实验观察,这些因素同样可以处于严格控制之下。
3.研究的样本可以达到比较均一性
通过细胞培养一定代数后,所得到的细胞系则可以达到均一性而属于同一类型的细胞,需要时,可采用克隆化等方法使细胞达到纯化。
4.研究内容便于观察、检测和记录
采用各种研究技术:如倒置生物显微镜、荧光显微镜、电子显微镜、流式细胞术、激光共焦显微镜、组织化学、原位杂交、同位素标记等各种仪器设备
记录方式可采用摄影照片、缩时电影、电视等多种手段。
5.研究的范围比较广泛
应用的学科领域较为宽广,如细胞学、学、肿瘤学、生物化学、遗传学、分子生物学等;
适用的对象范围广,从低等动物到高等动物,一种动物的不同年龄阶段以及不同组织,都可进行有针对性的研究。
6.研究的费用相对较经济
可提供大量、同一时期、重复性好的、生物学性状相似的实验对象。
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Ube2L6 泛素载体蛋白L6抗体 规格: 0.2ml
Rabbit Anti-mouse IgG-Fc/PE-Cy7 PE-Cy7标记的兔抗小鼠IgG-Fc 规格: 0.1ml
ADH/AVP 抗**/管升压素抗体(和肽素) 0.1ml
Bcr Bcr抗体 规格: 0.2ml
MMRN1/ECM 内皮细胞MMRN1蛋白抗体 规格: 0.2mlRabbit Anti-human IgG/FITC FITC标记的兔抗人IgG 规格: 0.3ml
RAB20 ras基因家族RAB20抗体 规格: 0.2ml
BNIP2 Bcl2相互作用蛋白2抗体 规格: 0.1mlRabbit Anti-human IgG F(ab')2/Cy3 Cy3标记的兔抗人IgG F(ab')2 规格: 0.1ml
FAM98A FAM98A蛋白抗体 规格: 0.2ml
S100A14 S100A14/15抗体 规格: 0.1ml
VMAT1/VAT1 嗜铬颗粒胺转运蛋白VAT1抗体 规格: 0.1ml
FAM150A FAM150A蛋白抗体 规格: 0.2ml
半边旗Pteris semipinnataent-9-Hydroxy-15-oxokaur-16-en-19-oic acid等效-9-羟基-15-氧代-16-贝壳杉烯-19-酸77658-39-0C20H28O4 ≥98.5%
半边旗Pteris semipinnataent-9-Hydroxy-15-oxokauran-19-oic acid等效-9-羟基-15-氧代-19-异贝壳杉烷酸77658-45-8C20H30O4 ≥98%
美味牛肝Boletus calopusO-Acetylcyclocalopin A(1S,2'R,3'AR,4'S,6S,7'AS)-REL-(-)- 6-(乙酰氧基)-3'A,4',5',7'A-四氢-2'-羟基-2',4,4'-**基螺[3-环己烯-1,3'(2'H)-[7H]呋喃并[2,3-C]吡喃]-5,7'-二酮486430-93-7C17H22O7 ≥95%
小鼠抗人IgA杂交瘤细胞;mAbhIgA-495图片黄柏 Phellodendron amucrense RuprObacunone黄柏酮751-03-1C26H30O7 ≥98%
防己科植物蝙蝠葛MenispermumO-BenzyldauricineO-苄基蝙蝠葛碱2748-99-4C45H50N2O6 ≥98%
木防己Cocculus orbiculatusOblongine(S)-1,2,3,4-四氢-8-羟基-1-[(4-羟基基)甲基]-7-甲氧基-2,2-二甲基异喹啉60008-01-7C19H24NO3 ≥95%
辛氏龙树Dracaena sanderianaObtucarbamate A4-甲基苯-1,3-二氨基甲酸二甲酯6935-99-5C11H14N2O4 ≥95%
决明子Catsia tora LinnObtusifolin美决明子素477-85-0C16H12O5 ≥98%
辛氏龙树Dracaena sanderianaObtucarbamate B2-甲基-1,3-苯二氨基甲酸二甲酯20913-18-2C11H14N2O4 ≥95%
决明子Catsia tora LinnObtusin决明素70588-05-5C18H16O7 ≥98%
忍冬 Lonicera japonica ThumbOchnaflavone似梨木双黄酮-7-O-β-D -吡喃葡萄糖苷50276-96-5C30H18O10 ≥98%