1）将培养基在37℃水浴锅预热；准备一个15mL无菌的离心管，加入8mL预热培养基。
2）将冻存细胞从液氮罐中取出，快速放入37℃水浴锅中复温（可准备一洁净的烧杯，装满37℃的水，细胞冻存管取出后迅速放入烧杯内，再逐步转移到水浴锅中）。轻轻晃动冻存管，使细胞能在1~2min内完全解冻，使细胞能尽快通过易受损的温度段（-5~0℃）。注意冻存管管口不能没入水中，BRL(大鼠肝细胞)避免引起污染。
3）用75%酒精擦拭冻存管后再置于超净台内，将管内细胞转移至准备好的离心管内，轻轻吹打液体，使细胞均匀分散，降低DMSO浓度，吹打时避免产生气泡。用新鲜培养基洗管壁2次，均转移至离心管内。
4）800rpm离心5min，弃上清，加入新鲜的培养基，吹打制成细胞悬液。
5）将细胞悬液转移至T25细胞瓶内，补加适量的培养基，轻轻晃动细胞瓶使细胞分布均匀，放入温箱内培养。
6）**天观察细胞贴壁生长情况，换新鲜培养基以去除死细胞。继续培养，待细胞长至80~90%汇合时正常传代。一般刚复苏的细胞需经过2~3次传代，细胞活力恢复后才能进行后续的实验。
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细胞名称 非洲绿猴肾细胞系/HCV-NS5A；Vero-HCV-NS5A图片
形态特性 上皮样细胞
生长特性 贴壁生长
特征特性 Vero-HCV-NS5A细胞整合有丙型肝炎病毒的NS5A基因，能稳定表达NS5A蛋白，是HCV基础研究的极好摸型。它由武汉大学病毒学国家重点实验室郭佳博士于2008年构建并保存。
培养条件 DMEM-H: Dulbecco＇s Modified Eagle＇s Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose) 10%FBS
传代方法 1:3传代,2-3天传一代
传代情况 C35
冻存条件 基础培养基+5%DMSO+20%FBS
支原体检测 阴性
STR
同工酶 同工酶鉴定
染色体
注意事项：
1. 非洲绿猴肾细胞系/HCV-NS5A；Vero-HCV-NS5A图片接收到细胞，肉眼观察细胞培养基颜色，显微镜观察细胞生长情况，并对细胞进行不同倍数拍照（建议收到时的培养瓶拍一张照片，显微镜拍收到时的细胞100X,200X各一张）。
2.用75%的酒精（建议配置75%的酒精的水是过的）。
3.严格无菌操作，打开细胞培养瓶。
4.将细胞培养瓶内的培养基用吸管完全吸出（严禁直接倾倒），放入另一无菌容器中（建议换新的培养基培养细胞）。
5.用PBS 2-3ml/次轻轻洗细胞表面，洗3-4次遍，加入0.05%胰酶-EDTA1-1.5ml,显微镜下观察细胞变圆，轻轻拍打培养瓶直到细胞脱落，加入终止液终止。
6.1000rpm，5min离心，重悬细胞。
7.换新的细胞培养瓶，37℃，5%CO2培养。
细胞培养的优点：
1.非洲绿猴肾细胞系/HCV-NS5A；Vero-HCV-NS5A图片研究的对象是活细胞
在实验过程中，根据要求可始终保持细胞活力，并可长时间监控、检测甚至定量评估一部分活细胞的情况，包括活细胞的形态、结构、生命活动等。
2.研究条件可以人为控制
pH、温度、氧气、二氧化碳、张力等物理化学的条件，可以根据实际需要进行人为的控制，同时，可以施加化学、物理、生物等因素作为条件而进行实验观察，这些因素同样可以处于严格控制之下。
3.研究的样本可以达到比较均一性
通过细胞培养一定代数后，所得到的细胞系则可以达到均一性而属于同一类型的细胞，需要时，可采用克隆化等方法使细胞达到纯化。
4.研究内容便于观察、检测和记录
采用各种研究技术：如倒置生物显微镜、荧光显微镜、电子显微镜、流式细胞术、激光共焦显微镜、组织化学、原位杂交、同位素标记等各种仪器设备
记录方式可采用摄影照片、缩时电影、电视等多种手段。
5.研究的范围比较广泛
应用的学科领域较为宽广，如细胞学、学、肿瘤学、生物化学、遗传学、分子生物学等；
适用的对象范围广，从低等动物到高等动物，一种动物的不同年龄阶段以及不同组织，都可进行有针对性的研究。
6.研究的费用相对较经济
可提供大量、同一时期、重复性好的、生物学性状相似的实验对象。
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TBX培养基 TBX Agar 1000(ML)
不完全琼脂培养基 Incomplete Agar Medium 250g
高盐度脑心浸液肉汤 2ml*20支
EEM培养基 EEM medium 250g
胆汁液态培养基 Bile broth 250g
PAC斜面培养基 Plate Count Agar 250g
HBI副溶血性弧菌生化鉴定条（新国标） 5条/盒
瑞氏染色液 5ml*8
SB培养基 SB Medium 250g
石蕊牛奶培养基 Litmus Milk Medium 250g
3%NaCl甘露醇 20支
亚硒酸盐增菌液(SF) Selenite Enrichment Medium 250g
D-(+)-Xylose D-(+)-木糖 58-86-6 20mg
金樱子 英文名称：Cherokee rose 规格：：2g 保存：：-20℃，避光
Cytosine 胞嘧啶 71-30-7 50mg
鱼腥草 英文名称：Houttuynia cordata Thunb 规格：：1g 保存：：-20℃，避光
L-Isoleucine L-异亮氨酸 73-32-5 200mg
非洲绿猴肾细胞系/HCV-NS5A；Vero-HCV-NS5A图片红参 英文名称：Red ginseng 规格：：1g 保存：：-20℃，避光
无粉一次性PVC手套 (50双/盒) 小号 盒
全蝎 英文名称：Scorpion 规格：：0.5g 保存：：-20℃，避光
Mineraloil 矿物油(液体石蜡) 1000ml 瓶
石榴皮 英文名称：Pomegranate peel 规格：：1g 保存：：-20℃，避光
Ferulic acid 阿魏酸 5g 瓶
甘遂 英文名称：Euphorbia kansui 规格：：1g 保存：：-20℃，避光
Glutathione Sepharose H.P. 谷胱甘肽-琼脂糖凝胶 H.P. 10mL 瓶
女贞子 英文名称：Ligustrum lucidum 规格：：1g 保存：：-20℃，避光