（一）基本原理
赖氨酸残基的游离e-氨基可与FITC(其激发波长为492nm,发射光波长为525nm)共价结合。与FITC结合的抗体可用为特异性的探针,以测定细胞相应抗原的存在。FITC具有很高的量子产量(发射光与吸收光的比值,0.85)形成的偶联物的稳定性很好。
（二）仪器和试剂
1.待偶联抗体；
2.碳酸氢钠缓冲液；
3.叠氮钠；
4.庵氰酸荧光素；
5.电磁搅拌器。
以下是蛋白质二硫键异构酶抗体价格的订购信息:
英文名称 Anti-PDI/P4HB/ERp57/PDIA3
中文名称 蛋白质二硫键异构酶抗体
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产品名称 |
英文名称 |
规 格 |
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蛋白质二硫键异构酶抗体价格 |
Anti-PDI/P4HB/ERp57/PDIA3 |
0.1ml/100μg 0.2ml/200μg |
浓 度 1mg/1ml
规 格 0.1ml/100μg 0.2ml/200μg
抗体来源 Rabbit
克隆类型 polyclonal
交叉反应 Human, Mouse, Rat, Chicken, Cow, Horse, Rabbit
产品类型 一抗
研究领域 细胞生物 信号转导 激酶和磷酸酶
蛋白分子量 predicted molecular weight: 55kDa
性 状 Lyophilized or Liquid
免 疫 原 KLH conjugated synthetic peptide derived from human PDI C-terminus
亚 型 IgG
纯化方法 affinity purified by Protein A
储 存 液 0.01M PBS, pH 7.4 with 10 mg/ml BSA and 0.1% Sodium azide
产品应用 WB=1:100-500 ELISA=1:500-1000 IP=1:20-100 IHC-P=1:100-500 IHC-F=1:100-500 IF=1:100-500
别 名 Protein Disulfide lsomerase; Pancreatic protein disulfide isomerase; PDI; PDIP; Protein disulfide isomerase A2; Protein disulfide isomerase; Protein disulfide isomerase family A member 2; P4HB; ERBA2L; PDIA1; PO4DB; Pdia3; Erp; ERp57; ERp60; ERp61; Grp58; PDI-Q2; PI-PLC; Plca; PLC[a]; PDIA1_HUMAN.
抗体的鉴定：
1）抗体的效价鉴定：不管是用于诊断还是用于,制备抗体的目的都是要求较高效价。不同的抗原制备的抗体,要求的效价不一。鉴定效价的方法很多,包括有试管凝集反应,琼脂扩散试验,酶联吸附试验等。常用的抗原所制备的抗体一般都有约成的鉴定效价的方法,以资比较。如制备抗抗体的效价,一般就采用琼脂扩散试验来鉴定。2）抗体的特异性鉴定：抗体的特异性是指与相应抗原或近似抗原物质的识别能力。抗体的特异性高,它的识别能力就强。衡量特异性通常以交叉反应率来表示。交叉反应率可用竞争抑制试验测定。以不同浓度抗原和近似抗原分别做竞争抑制曲线,计算各自的结合率,求出各自在IC50时的浓度,并按公式计算交叉反应率。
如果所用抗原浓度IC50浓度为pg/管,而一些近似抗原物质的IC50浓度几乎是无穷大时,表示这一抗血清与其他抗原物质的交叉反应率近似为0,即该血清的特异性较好。
3）的亲和力：是指抗体和抗原结合的牢固程度。亲和力的高低是由抗原分子的大小,抗体分子的结合位点与抗原决定簇之间立体构型的合适度决定的。有助于维持抗原抗体复合物稳定的分子间力有氢键,疏水键,侧链相反电荷基因的库仑力,范德华力和空间斥力。亲和力常以亲和常数K表示,K的单位是L/mol。抗体亲和力的测定对抗体的筛选,确定抗体的用途,验证抗体的均一性等均有重要意义。