（一）基本原理
赖氨酸残基的游离e-氨基可与FITC(其激发波长为492nm,发射光波长为525nm)共价结合。与FITC结合的抗体可用为特异性的探针,以测定细胞相应抗原的存在。FITC具有很高的量子产量(发射光与吸收光的比值,0.85)形成的偶联物的稳定性很好。
（二）仪器和试剂
1.待偶联抗体；
2.碳酸氢钠缓冲液；
3.叠氮钠；
4.庵氰酸荧光素；
5.电磁搅拌器。
以下是重组蛋白G抗体供应商的订购信息:
别 名 IgG binding protein G; Immunoglobulin G binding protein G [Precursor]; spg.
英文名称 Anti-Protein G
中文名称 重组蛋白G抗体
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产品名称 |
重组蛋白G抗体供应商 |
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英文名称 |
Anti-Protein G |
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规 格 |
0.1ml/100μg 0.2ml/200μg |
浓 度 1mg/1ml
规 格 0.1ml/100μg 0.2ml/200μg
抗体来源 Rabbit
克隆类型 polyclonal
交叉反应 ProteinG
产品类型 一抗
研究领域 学
蛋白分子量 predicted molecular weight: 22kDa
性 状 Lyophilized or Liquid
免 疫 原 Recombinant protein G
亚 型 IgG
纯化方法 affinity purified by Protein A
储 存 液 0.01M PBS, pH 7.4 with 10 mg/ml BSA and 0.1% Sodium azide
产品应用 WB=1:100-500 ELISA=1:500-1000 IP=1:20-100 IHC-P=1:100-500 IHC-F=1:100-500 IF=1:100-500
重组蛋白G抗体供应商抗体的鉴定：
1）抗体的效价鉴定：不管是用于诊断还是用于,制备抗体的目的都是要求较高效价。不同的抗原制备的抗体,要求的效价不一。鉴定效价的方法很多,包括有试管凝集反应,琼脂扩散试验,酶联吸附试验等。常用的抗原所制备的抗体一般都有约成的鉴定效价的方法,以资比较。如制备抗抗体的效价,一般就采用琼脂扩散试验来鉴定。2）抗体的特异性鉴定：抗体的特异性是指与相应抗原或近似抗原物质的识别能力。抗体的特异性高,它的识别能力就强。衡量特异性通常以交叉反应率来表示。交叉反应率可用竞争抑制试验测定。以不同浓度抗原和近似抗原分别做竞争抑制曲线,计算各自的结合率,求出各自在IC50时的浓度,并按公式计算交叉反应率。
如果所用抗原浓度IC50浓度为pg/管,而一些近似抗原物质的IC50浓度几乎是无穷大时,表示这一抗血清与其他抗原物质的交叉反应率近似为0,即该血清的特异性较好。
MCF-7 [MCF7], 人癌细胞系 Human羟乙基磺酸铵盐AHES质量规格：>99%
CD2 Others Mouse 小鼠 CD2 / LY37 人细胞裂解液 (阳性对照) 羟乙基磺酸HES质量规格：>80%,粘状液体
少突胶质前体细胞培养基OPCMDIPSO.Na;3-[N-N-双(2-羟乙基)氨基]-2-羟基丙磺酸单钠盐DIPSO Monosodium质量规格：>98%
IGFBP2 Others
Cynomolgus 食蟹猴 IGFBP2 人细胞裂解液 (阳性对照) DIPSO; 3-[N-N-双(2-羟乙基)氨基]-2-羟基丙磺酸 DIPSO质量规格：>99%
大鼠气管和支气管上皮细胞完全培养基 100mL2,3-二巯基丙磺酸钠DMPS质量规格：>95%,一水合物
CCL1 Protein Mouse 重组小鼠 I-309 / CCL1 / TCA-3 蛋白 (Fc 标签)磺胺甲恶唑羟胺 Sulfamethoxazole Hydroxylamine质量规格：美国进口
RF/6A(猴视网膜血管内皮细胞) 5×106cells/瓶×2 甲型流感 H10N3 (A/mallard/Minnesota/Sg-00194/2007) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) 4-硝基磺胺甲恶唑4-Nitro
Sulfamethoxazole质量规格：美国进口
化大家鼠肺成纤维细胞;NRm2-羟基雌二醇2-hydroxy
Estradiol质量规格：美国进口
人心脏微血管内皮细胞 (HCMEC)( 5×105 )乙硫异烟胺亚砜Ethionamide Sulfoxide质量规格：美国进口
CL-0027AsPC-1(人胰腺癌细胞)5×106cells/瓶×2依曲韦林-d6Etravirine-d6质量规格：美国进口
NCI-H23人非小细胞肺癌细胞 NCI-H23 cells in human non small cell lung cancer
1640+10%FBS胃泌素释放肽-Lys（生物素），人质量规格：>95%,BRGastrin
Releasing Peptide-Lys(Biotin), human
NRG1 Protein Human 重组人 NRG1-beta 1 蛋白 (ECD, Fc 标签)胃饥饿素，人质量规格：>95%,BRGhrelin (human)
PATU8988(人胰腺癌细胞) 5×106cells/瓶×2 视网膜muller细胞Many types of cells包装：5 × 105方(1ml)生长**释放因子，大鼠质量规格：>95%,BRGHRF, rat
周细胞生长添加物PGS生长**释放因子（1-44），人质量规格：>95%,BRGHRF (1-44), human
SRPK3 Others Human 人 STK23 / MSSK1 / SRPK3 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) 维生素E质量规格：美国进口Vitamin E
3）的亲和力：是指抗体和抗原结合的牢固程度。亲和力的高低是由抗原分子的大小,抗体分子的结合位点与抗原决定簇之间立体构型的合适度决定的。有助于维持抗原抗体复合物稳定的分子间力有氢键,疏水键,侧链相反电荷基因的库仑力,范德华力和空间斥力。亲和力常以亲和常数K表示,K的单位是L/mol。抗体亲和力的测定对抗体的筛选,确定抗体的用途,验证抗体的均一性等均有重要意义。