（一）基本原理
赖氨酸残基的游离e-氨基可与FITC(其激发波长为492nm,发射光波长为525nm)共价结合。与FITC结合的抗体可用为特异性的探针,以测定细胞相应抗原的存在。FITC具有很高的量子产量(发射光与吸收光的比值,0.85)形成的偶联物的稳定性很好。
（二）仪器和试剂
1.待偶联抗体；
2.碳酸氢钠缓冲液；
3.叠氮钠；
4.庵氰酸荧光素；
5.电磁搅拌器。
以下是黑色素瘤优先表达抗原抗体厂家的订购信息:
别 名 MAPE; Melanoma antigen preferentially expressed in tumors; OIP 4; OIP-4; OIP4; OPA interacting protein 4; Opa interacting protein OIP4; OPA-interacting protein 4; PRAME; PRAME_HUMAN; Preferentially expressed antigen in melanoma; Preferentially expressed antigen of melanoma; RP23-250F8.3.
英文名称 Anti-PRAME
中文名称 黑色素瘤优先表达抗原抗体
|
产品名称 |
黑色素瘤优先表达抗原抗体厂家 |
|
英文名称 |
Anti-PRAME |
|
规 格 |
0.2ml/200μg |
浓 度 1mg/1ml
规 格 0.2ml/200μg
抗体来源 Rabbit
克隆类型 polyclonal
交叉反应 Human
产品类型 一抗
研究领域 肿瘤 细胞生物 信号转导 肿瘤细胞生物标志物 表观遗传学
蛋白分子量 predicted molecular weight: 56kDa
性 状 Lyophilized or Liquid
免 疫 原 KLH conjugated synthetic peptide derived from human PRAME (174-210aa)
亚 型 IgG
纯化方法 affinity purified by Protein A
储 存 液 Preservative: 15mM Sodium Azide, Constituents: 1% BSA, 0.01M PBS, pH 7.4
产品应用 WB=1:100-500 ELISA=1:500-1000 IP=1:20-100 IHC-P=1:100-500 IHC-F=1:100-500 ICC=1:100-500 IF=1:100-500
小鼠结缔组织L细胞株929克隆;L-929 [L929]欧前胡素（标准品）Imperatorin质量规格：HPLC≥98%，标准品
ULBP1 Others Human 人 ULBP1 / N2DL1 人细胞裂解液 (阳性对照) α-蒎1α-pinene质量规格：GC≥97%，标准品
人支气管上皮细胞裂解物HBEpiCLβ-蒎1（标准品）β-pinene质量规格：HPLC≥99%，标准品
IL23R Others
Cynomolgus 食蟹猴 IL23R / IL23 Receptor 人细胞裂解液 (阳性对照) 七叶胆苷XVII(标准品)Gypenoside XVII质量规格：HPLC≥98%，标准品
人神经星形胶质细胞完全培养基 100mL七叶皂苷钠（标准品）Sodium
Aescinate质量规格：HPLC≥98%，标准品
人胚肺成纤维细胞;WI-38 [WI38]9-溴蒽(>99.0%(GC)(HPLC))9-Bromoanthracene质量规格：>99.0%(GC)(HPLC)
HYOU1 Others Human 人 HYOU1 / HSP12A 人细胞裂解液 (阳性对照) 2-溴-9,10-二苯基蒽(>95.0%(GC))2-Bromo-9,10-diphenylanthracene质量规格：>95.0%(GC)
肝动脉内皮细胞Many types of cells包装：5 × 105方(1ml)1-溴-4-正辛基苯(>99.0%(GC)(T))trans-4-Butylcyclohexanecarboxylic
Acid质量规格：>99.0%(GC)(T)
GPX7 Others Human 人 GPX7 / Glutathione Peroxidase 7 人细胞裂解液 (阳性对照) 1-溴-4-壬基苯(>95.0%(GC))1-Bromo-4-nonylbenzene质量规格：>95.0%(GC)
大鼠表皮角化细胞完全培养基 100mL1-溴-4-戊苯(>90.0%(GC))1-Bromo-4-pentylbenzene质量规格：>90.0%(GC)
MAP2K1 Others
Mouse 小鼠 MEK1 / MAP2K1 / MKK1 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) 去[5-(2-二甲氨基)乙基]地尔硫卓质量规格：美国进口Des[5-(2-dimethylamino)ethyl] Diltiazem
肠静脉内皮细胞Many types of cells包装：5 × 105方(1ml)N,N-去二甲基地尔硫卓盐酸盐质量规格：美国进口N,N-Didesmethyl Diltiazem Hydrochloride
人少突胶质细胞 人肺癌细胞，SK-MES-1细胞 P3X63Ag8.653(骨髓瘤细胞)O-去乙酰-N-去甲基地尔硫卓质量规格：美国进口O-Desacetyl-N-desmethyl Diltiazem
人结直肠腺癌细胞;Caco-2N-去甲基地尔硫卓盐酸盐质量规格：美国进口N-Desmethyl Diltiazem Hydrochloride
SERPINA11 Others
Mouse 小鼠 SERPINA11 / Serpina11 人细胞裂解液 (阳性对照) 去氧紫草素(标准品)质量规格：HPLC≥98%,标准品Deoxyshikonin
2）抗体的特异性鉴定：抗体的特异性是指与相应抗原或近似抗原物质的识别能力。抗体的特异性高,它的识别能力就强。衡量特异性通常以交叉反应率来表示。交叉反应率可用竞争抑制试验测定。以不同浓度抗原和近似抗原分别做竞争抑制曲线,计算各自的结合率,求出各自在IC50时的浓度,并按公式计算交叉反应率。
如果所用抗原浓度IC50浓度为pg/管,而一些近似抗原物质的IC50浓度几乎是无穷大时,表示这一抗血清与其他抗原物质的交叉反应率近似为0,即该血清的特异性较好。
3）的亲和力：是指抗体和抗原结合的牢固程度。亲和力的高低是由抗原分子的大小,抗体分子的结合位点与抗原决定簇之间立体构型的合适度决定的。有助于维持抗原抗体复合物稳定的分子间力有氢键,疏水键,侧链相反电荷基因的库仑力,范德华力和空间斥力。亲和力常以亲和常数K表示,K的单位是L/mol。抗体亲和力的测定对抗体的筛选,确定抗体的用途,验证抗体的均一性等均有重要意义。