（一）基本原理
赖氨酸残基的游离e-氨基可与FITC(其激发波长为492nm,发射光波长为525nm)共价结合。与FITC结合的抗体可用为特异性的探针,以测定细胞相应抗原的存在。FITC具有很高的量子产量(发射光与吸收光的比值,0.85)形成的偶联物的稳定性很好。
（二）仪器和试剂
1.待偶联抗体；
2.碳酸氢钠缓冲液；
3.叠氮钠；
4.庵氰酸荧光素；
5.电磁搅拌器。
以下是磷酸化P73肿瘤抑制基因抗体供应商的订购信息:
别 名 p73(Phospho-Tyr99); TP73(phospho Y99); p53 like transcription factor; p53 Related Protein; p73; TP 73; TP73; Tumor Protein p73; P73_HUMAN.
英文名称 Anti-Phospho-p73(Tyr99)
中文名称 磷酸化P73肿瘤抑制基因抗体
|
产品名称 |
磷酸化P73肿瘤抑制基因抗体供应商 |
|
英文名称 |
Anti-Phospho-p73(Tyr99) |
|
规 格 |
0.1ml/100μg |
浓 度 1mg/1ml
规 格 0.1ml/100μg
抗体来源 Rabbit
克隆类型 polyclonal
交叉反应 Human, Mouse, Rat
产品类型 一抗 磷酸化抗体
研究领域 肿瘤 学 信号转导 细胞凋亡 转录调节因子 激酶和磷酸酶
蛋白分子量 predicted molecular weight: 70kDa
性 状 Lyophilized or Liquid
免 疫 原 KLH conjugated Synthesised phosphopeptide derived from human p73 around the phosphorylation site of Tyr99 [SP(p-Y)AQ]
亚 型 IgG
纯化方法 affinity purified by Protein A
储 存 液 0.01M PBS, pH 7.4 with 10 mg/ml BSA and 0.1% Sodium azide
产品应用 WB=1:100-500 ELISA=1:500-1000 IP=1:20-100 IHC-P=1:100-500 IHC-F=1:100-500 IF=1:100-500
LAYN Others Rat 大鼠 Layilin / LAYN 人细胞裂解液 (阳性对照) 拟人参皂苷F11(标准品)Pseudoginsenoside F11质量规格：HPLC≥98%，标准品
CM-H042人肝内胆管上皮细胞完全培养基100mL拟人参皂苷RT5(标准品)Pseudoginsenoside
RT5质量规格：HPLC≥98%，标准品
HCT116细胞，人结直肠癌细胞 人色素瘤细胞,HME1细胞 人胚肺二倍体细胞;KMB-17尿囊素（标准品）Allantoin质量规格：HPLC≥98%，标准品
GBC-SD(人胆囊癌细胞) 5×106cells/瓶×2柠檬苦素；吴茱萸内酯(标准品,吴茱萸提取)Limonin质量规格：HPLC≥98%，标准品,吴茱萸提取
BACE1 Others Mouse 小鼠 BACE-1 人细胞裂解液 (阳性对照) 柠檬苦素，黄柏内酯(标准品,橙皮提取) Limonin质量规格：HPLC≥98%,标准品,橙皮提取
MET Others
Cynomolgus 食蟹猴 / 恒河猴 c-MET /
HGFR 人细胞裂解液 (阳性对照) FCLA 自由酸[化学发光试剂]FCLA Free Acid质量规格：化学发光试剂
人成骨肉瘤细胞;MG-63红-CLA(含氮量：9.00-10.30 %)Red-CLA质量规格：含氮量：9.00-10.30
%
豚鼠心肌细胞;GP-H1 EBV 转化的绒猴白细胞，B95-8细胞 MEL细胞，小鼠红白血病细胞13-乙基-18,19-二去甲基-17α-pregn-4-en-20-yn-17-ol(左炔诺孕酮杂质D)13-Ethyl-18,19-dinor-17α-pregn-4-en-20-yn-17-ol(Levonorgestrel Impurity D)质量规格：美国进口
人胚肺成纤维细胞;MRC-513-乙基-17-羟基-18,19-dinor-17α-pregn-5(10)-en-20-yn-3-one(左炔诺孕酮杂质B)13-Ethyl-17-hydroxy-18,19-dinor-17α-pregn-5(10)-en-20-yn-3-one(Levonorgestrel Impurity B)质量规格：美国进口
SIRPA Others Human 人 SIRPA / CD172A 人细胞裂解液 (阳性对照) 17-去乙酰基诺孕酯17-Desacetyl
Norgestimate质量规格：美国进口
LAYN Others Rat 大鼠 Layilin / LAYN 人细胞裂解液 (阳性对照) 洋川芎内酯I(标准品)质量规格：HPLC≥98%,标准品Senkyunolide I
成骨细胞Many types of cells包装：5 × 105方(1ml)洋川芎内酯H(标准品)质量规格：HPLC≥98%,标准品Senkyunolide H
HCC-9204细胞，肝癌细胞 人细胞,HeLa细胞 人角膜上皮细胞cDNAHCEpiC cDNAINCB28060质量规格：>98,ATP竞争性的c-MET抑制剂INCB-28060
非洲绿猴肾细胞;BS-C-1氨芬酸钠质量规格：>99%Amfenac
Sodium
CSF3R Others Human 人 CD114 / G-CSFR / GCSFR 人细胞裂解液 (阳性对照) 桑皮苷A（标准品）质量规格：HPLC≥98%，标准品Mulberroside
A
2）抗体的特异性鉴定：抗体的特异性是指与相应抗原或近似抗原物质的识别能力。抗体的特异性高,它的识别能力就强。衡量特异性通常以交叉反应率来表示。交叉反应率可用竞争抑制试验测定。以不同浓度抗原和近似抗原分别做竞争抑制曲线,计算各自的结合率,求出各自在IC50时的浓度,并按公式计算交叉反应率。
如果所用抗原浓度IC50浓度为pg/管,而一些近似抗原物质的IC50浓度几乎是无穷大时,表示这一抗血清与其他抗原物质的交叉反应率近似为0,即该血清的特异性较好。
3）的亲和力：是指抗体和抗原结合的牢固程度。亲和力的高低是由抗原分子的大小,抗体分子的结合位点与抗原决定簇之间立体构型的合适度决定的。有助于维持抗原抗体复合物稳定的分子间力有氢键,疏水键,侧链相反电荷基因的库仑力,范德华力和空间斥力。亲和力常以亲和常数K表示,K的单位是L/mol。抗体亲和力的测定对抗体的筛选,确定抗体的用途,验证抗体的均一性等均有重要意义。