（一）基本原理
赖氨酸残基的游离e-氨基可与FITC(其激发波长为492nm,发射光波长为525nm)共价结合。与FITC结合的抗体可用为特异性的探针,以测定细胞相应抗原的存在。FITC具有很高的量子产量(发射光与吸收光的比值,0.85)形成的偶联物的稳定性很好。
（二）仪器和试剂
1.待偶联抗体；
2.碳酸氢钠缓冲液；
3.叠氮钠；
4.庵氰酸荧光素；
5.电磁搅拌器。
以下是磷酸化帕金蛋白抗体供应商的订购信息:
别 名 PARK2(phospho S378); AR JP; E3 ubiquitin protein ligase parkin; FRA6E; LPRS 2; LPRS2; PARK 2; PARK2; Parkinson disease (autosomal recessive juvenile) 2; Parkinson disease protein 2; Parkinson juvenile disease protein 2; PDJ; PRKN 2; PRKN; PRKN2; Ubiquitin E3 ligase PRKN.
英文名称 Anti-phospho-PARK2(Ser378)
中文名称 磷酸化帕金蛋白抗体
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产品名称 |
磷酸化帕金蛋白抗体供应商 |
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英文名称 |
Anti-phospho-PARK2(Ser378) |
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规 格 |
0.1ml/100μg |
浓 度 1mg/1ml
规 格 0.1ml/100μg
抗体来源 Rabbit
克隆类型 polyclonal
交叉反应 Human, Pig, Guinea Pig
产品类型 一抗 磷酸化抗体
研究领域 学 神经生物学
蛋白分子量 predicted molecular weight: 51kDa
性 状 Lyophilized or Liquid
免 疫 原 KLH conjugated Synthesised phosphopeptide derived from human PARK2 around the phosphorylation site of Ser378
亚 型 IgG
纯化方法 affinity purified by Protein A
储 存 液 0.01M PBS, pH 7.4 with 10 mg/ml BSA and 0.1% Sodium azide
产品应用 WB=1:100-500 ELISA=1:500-1000 IP=1:20-100 IHC-P=1:100-500 IHC-F=1:100-500 IF=1:100-500
GFRA1 Others Rat 大鼠 GFRA1 / GFR alpha-1 人细胞裂解液 (阳性对照) 萘酚ASNaphtholAS质量规格：0.97
人侵袭性脉络膜色素瘤细胞;MuM-2C蒽酮(AR)Anthrone质量规格：AR
9204细胞，人肝癌细胞 大鼠嗜碱性细胞白血病细胞,RBL-2H3细胞 山羊肾上皮样细胞;DG-K1硫代米氏酮Thiomichler's ketone质量规格：AR
MDA-MB-231(人癌细胞) 5×106cells/瓶×2茚三酮，一水Ninhydrin 质量规格：>98%,AR
Promocell C-22120
Endothelial Cell GrowthMedium MV KIT, 内皮细胞生长培养基MV套装 500ml菲尼酮Phenidone质量规格：>98%,BR
MERTK Others Mouse 小鼠 MERTK / Mer 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) 氯代丁二乙(>98%,BR)NCS,
N-Chlorosuccinimide质量规格：>98%,BR
CL-0233THP-1(人髓系白血病单核细胞)5×106cells/瓶×2n-Dodecyl-b-D-thiomaltosiden-Dodecyl-b-D-thiomaltoside质量规格：BR
HUM, 正常人主动脉平滑肌细胞 小鼠成纤维细胞，Y2细胞 NK-92MI(人恶性非霍奇金**瘤患者的自然杀伤细胞)1,5-二氨基萘(>98%,BR)1,5-Diaminonaphthalene质量规格：>98%,BR
人急性T**细胞性白血病细胞;I
2.1(CRL-2572)1,5-二羟基萘(>97%,BR)1,5-Dihydroxynaphthalene质量规格：>97%,BR
DDR1 Others Human 人 DDR1 Kinase / MCK10 / CD167 人细胞裂解液 (阳性对照) 1,6-二羟基萘(>98%,BR)1,6-Dihydroxynaphthalene质量规格：>98%,BR
JEG-3/VP16细胞，人绒癌细胞耐药株 新生牛眼Tenon's囊成纤维细胞,NBTF细胞 人羊膜间充质基质细胞HAMSC罗丹明123质量规格：用于荧光标记Rhodamine
123
IM-9(人外周血B**细胞) 5×106cells/瓶×2曲美布汀碱质量规格：>98%,BRTrimebutine base
95-D(人高转移肺癌细胞) 5×106cells/瓶×2 CM-H099人真皮**上皮细胞完全培养基100mL 人胚肺成纤维细胞;CCC-HPF-1环草隆(标准品)质量规格：分析标准品Siduron
CM-R039大鼠胃粘膜上皮细胞完全培养基100mL西玛津(标准品)质量规格：分析标准品Simazine
HA Others H7N9 甲型流感 H7N9 (A/Shanghai/1/2013) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) 西玛津标准溶液(10μg/ml,u=5%)质量规格：10μg/ml,u=5%Simazine
solution
2）抗体的特异性鉴定：抗体的特异性是指与相应抗原或近似抗原物质的识别能力。抗体的特异性高,它的识别能力就强。衡量特异性通常以交叉反应率来表示。交叉反应率可用竞争抑制试验测定。以不同浓度抗原和近似抗原分别做竞争抑制曲线,计算各自的结合率,求出各自在IC50时的浓度,并按公式计算交叉反应率。
如果所用抗原浓度IC50浓度为pg/管,而一些近似抗原物质的IC50浓度几乎是无穷大时,表示这一抗血清与其他抗原物质的交叉反应率近似为0,即该血清的特异性较好。
3）的亲和力：是指抗体和抗原结合的牢固程度。亲和力的高低是由抗原分子的大小,抗体分子的结合位点与抗原决定簇之间立体构型的合适度决定的。有助于维持抗原抗体复合物稳定的分子间力有氢键,疏水键,侧链相反电荷基因的库仑力,范德华力和空间斥力。亲和力常以亲和常数K表示,K的单位是L/mol。抗体亲和力的测定对抗体的筛选,确定抗体的用途,验证抗体的均一性等均有重要意义。