（一）基本原理
赖氨酸残基的游离e-氨基可与FITC(其激发波长为492nm,发射光波长为525nm)共价结合。与FITC结合的抗体可用为特异性的探针,以测定细胞相应抗原的存在。FITC具有很高的量子产量(发射光与吸收光的比值,0.85)形成的偶联物的稳定性很好。
（二）仪器和试剂
1.待偶联抗体；
2.碳酸氢钠缓冲液；
3.叠氮钠；
4.庵氰酸荧光素；
5.电磁搅拌器。
以下是ras癌基因家族RAB8B抗体供应商的订购信息:
英文名称 Anti-RAB8B
中文名称 ras癌基因家族RAB8B抗体
别 名 GTPase Rab8b; 5930437D16; FLJ38125; RAB 8b protein; RAB44; Rab8b; RAB8B, member RAS oncogene family; RAB8B_HUMAN; Ras-related protein Rab-8B.
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产品名称 |
英文名称 |
规 格 |
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ras癌基因家族RAB8B抗体供应商 |
Anti-RAB8B |
0.2ml/200μg |
浓 度 1mg/1ml
规 格 0.2ml/200μg
抗体来源 Rabbit
克隆类型 polyclonal
交叉反应 Human, Mouse, Rat, Dog, Horse
产品类型 一抗
研究领域 肿瘤 细胞生物 染色质和核信号 信号转导 G蛋白偶联受体
蛋白分子量 predicted molecular weight: 23kDa
性 状 Lyophilized or Liquid
免 疫 原 KLH conjugated synthetic peptide derived from human RAB8B
亚 型 IgG
纯化方法 affinity purified by Protein A
储 存 液 0.01M PBS, pH 7.4 with 10 mg/ml BSA and 0.1% Sodium azide
产品应用 WB=1:100-500 ELISA=1:500-1000 IP=1:20-100 IHC-P=1:100-500 IHC-F=1:100-500 IF=1:100-500
抗体的鉴定：
1）抗体的效价鉴定：不管是用于诊断还是用于,制备抗体的目的都是要求较高效价。不同的抗原制备的抗体,要求的效价不一。鉴定效价的方法很多,包括有试管凝集反应,琼脂扩散试验,酶联吸附试验等。常用的抗原所制备的抗体一般都有约成的鉴定效价的方法,以资比较。如制备抗抗体的效价,一般就采用琼脂扩散试验来鉴定。2）抗体的特异性鉴定：抗体的特异性是指与相应抗原或近似抗原物质的识别能力。抗体的特异性高,它的识别能力就强。衡量特异性通常以交叉反应率来表示。交叉反应率可用竞争抑制试验测定。以不同浓度抗原和近似抗原分别做竞争抑制曲线,计算各自的结合率,求出各自在IC50时的浓度,并按公式计算交叉反应率。
如果所用抗原浓度IC50浓度为pg/管,而一些近似抗原物质的IC50浓度几乎是无穷大时,表示这一抗血清与其他抗原物质的交叉反应率近似为0,即该血清的特异性较好。
大鼠嗜碱性粒细胞性白血病细胞;RBL-2H3 肝癌细胞，BEL-7404细胞 CEL细胞，鸡胚原代肝细胞玫红酸(AR)Rosolic acid质量规格：AR
RBE, 人肝胆管癌细胞 Human玫红酸(指示剂级)Rosolic
acid质量规格：指示剂级
CST2 Others Human 人 CST2 / Cystatin-2 / Cystatin-SA 人细胞裂解液 (阳性对照) 草酸钠容量分析用溶液标准物质Sodium oxalate solution for volumetric
analysis质量规格：分析标准品,99.96%
人羊膜间充质基质细胞HAMSC百里香酚蓝(IND)Thymolblue质量规格：IND
FGFR3 Others Cynomolgus 食蟹猴 FGFR3 人细胞裂解液 (阳性对照) 百里香酚蓝(ACS reagent,95 %)Thymolblue质量规格：ACS reagent,95 %
杂交瘤(B类);Z172A4C4C6F3G12
Butt's **瘤细胞，Raji细胞 HBZY-1细胞，大鼠肾小球系膜细胞EC(HBZY-1)维生素B6,盐酸吡哆醇Vitamin B6 Hydrochloride质量规格：>98%,BR
UM-UC-3, 人膀胱移行细胞癌 Human维生素B6（标准品）vitamin
B6质量规格：HPLC≥99%，标准品
LILRB3 Others Human 人 LILRB3 / LIR3 / ILT5 / CD85a 人细胞裂解液 (阳性对照) (+)-5-反式氯前列醇(+)-5-trans
Cloprostenol质量规格：美国进口
动物星形胶质细胞培养基AM-a(+/-)-氯前列醇钠盐水合物(+/-)-Cloprostenol
sodium salt hydrate质量规格：美国进口
IFNA4 Others Cynomolgus 食蟹猴 FGFR4 / FGF Receptor 4 人细胞裂解液 (阳性对照) (+)-氯前列醇(+)-Cloprostenol质量规格：美国进口
IL10 Protein
Feline 重组猫 IL10 / Ierleukin-10 蛋白5-乙酰氧基阿那格雷质量规格：美国进口5-Acetoxy Anagrelide
SK-CO-1(人结直肠腺癌细胞) 5×106cells/瓶×2 LoVo(人结肠癌细胞)伪伐地那非质量规格：美国进口Pseudo Vardenafil
CL-0044C2C12(小鼠成肌细胞)5×106cells/瓶×2N-去乙基伐地那非质量规格：美国进口N-Desethyl Vardenafil
GPNMB Others Human 人 GPNMB / Osteoactivin 人细胞裂解液 (阳性对照) 伐地那非二盐酸质量规格：美国进口Vardenafil Dihydrochloride Salt
肌细胞分离液MDS乙二醇双[4-(乙氧羰基)苯基](>98.0%(GC))质量规格：>98.0%(GC)Ethylene Glycol Bis[4-(ethoxycarbonyl)phenyl] Ether
3）的亲和力：是指抗体和抗原结合的牢固程度。亲和力的高低是由抗原分子的大小,抗体分子的结合位点与抗原决定簇之间立体构型的合适度决定的。有助于维持抗原抗体复合物稳定的分子间力有氢键,疏水键,侧链相反电荷基因的库仑力,范德华力和空间斥力。亲和力常以亲和常数K表示,K的单位是L/mol。抗体亲和力的测定对抗体的筛选,确定抗体的用途,验证抗体的均一性等均有重要意义。