（一）基本原理
赖氨酸残基的游离e-氨基可与FITC(其激发波长为492nm,发射光波长为525nm)共价结合。与FITC结合的抗体可用为特异性的探针,以测定细胞相应抗原的存在。FITC具有很高的量子产量(发射光与吸收光的比值,0.85)形成的偶联物的稳定性很好。
（二）仪器和试剂
1.待偶联抗体；
2.碳酸氢钠缓冲液；
3.叠氮钠；
4.庵氰酸荧光素；
5.电磁搅拌器。
以下是磷酸化RhoA蛋白抗体供应商的订购信息:
英文名称 Anti-Phospho-RhoA(Ser188)
中文名称 磷酸化RhoA蛋白抗体
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产品名称 |
英文名称 |
规 格 |
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磷酸化RhoA蛋白抗体供应商 |
Anti-Phospho-RhoA(Ser188) |
0.1ml/100μg |
浓 度 1mg/1ml
规 格 0.1ml/100μg
抗体来源 Rabbit
克隆类型 polyclonal
交叉反应 Human, Mouse, Rat, Chicken, Dog, Cow, Sheep
产品类型 一抗 磷酸化抗体
研究领域 学 信号转导 细胞凋亡 激酶和磷酸酶
蛋白分子量 predicted molecular weight: 21kDa
性 状 Lyophilized or Liquid
免 疫 原 KLH conjugated Synthesised phosphopeptide derived from human RhoA around the phosphorylation site of Ser188
亚 型 IgG
纯化方法 affinity purified by Protein A
储 存 液 0.01M PBS, pH 7.4 with 10 mg/ml BSA and 0.1% Sodium azide
产品应用 WB=1:100-500 ELISA=1:500-1000 IP=1:20-100 IHC-P=1:100-500 IHC-F=1:100-500 IF=1:100-500
别 名 RHOA(phospho S188); RhoA protein; Aplysia ras related homolog 12; ARH 12; ARH12; ARHA; H 12; Oncogene RHO H12; Ras homolog gene family member A; RHO 12; Rho A; RHO H12; RHO12; RHOH 12; RHOH12; Small GTP binding protein Rho A; Small GTP binding protein RhoA; Transforming protein Rho A; Transforming protein RhoA.
Promocell C-28052 DC
Generation Medium DXF,树突状细胞生成培养基DXF(即用型) 250ml芒果苷Mangiferin质量规格：≥90%,BR
人牙周膜成纤维细胞总RNAHPLF NA毛蕊异黄酮(标准品)Calycosin质量规格：HPLC≥98%,标准品
ITGAX & ITGB2
Others Human 人 ITGAX & ITGB2 Heterodimer 人细胞裂解液 (阳性对照) 毛蕊异黄酮苷（标准品）Calycosin-7-O-β-D-glucoside质量规格：HPLC≥98%，标准品
KYSE410 人食管癌细胞没食子儿茶素（标准品）GC;
(-)-gallocatechin质量规格：HPLC≥98%，标准品
CL-0337FO(小鼠骨髓瘤细胞)5×106cells/瓶×2没食子儿茶素没食子酸酯（标准品）GCG;(−)-Gallocatechin gallate质量规格：HPLC≥98%，标准品
人肠微血管内皮细胞(HIMEC)( 5×105 ) RSC, 大鼠雪旺细胞 RattusL-谷氨酰胺质量规格：>99%,BRL-Glutamine
单核细胞Many types of cells包装：5 × 105方(1ml)罗氟司特质量规格：含量≥99.0%(HPLC)Roflumilast
TNFRSF19 Others
Human 人 TNFRSF19 / OY 人细胞裂解液 (阳性对照) 左乙拉西坦质量规格：>99%,BR,USPLevetiracetam
人耐VP16绒癌细胞株;JEG-3/VP16左乙拉西坦（标准品）质量规格：HPLC>98%,标准品Levetiracetam
H293T细胞，人类胚胎肾脏表皮细胞 猫肾细胞,CRFK细胞 CL-0267CNE-2Z(人鼻咽癌细胞)5×106cells/瓶×2盐酸林可霉素质量规格：>850mcg/mg,BRLincomycin HCl
IGFBP5 Others
Cynomolgus 食蟹猴 IGFBP5 / IGFBP-5 人细胞裂解液 (阳性对照) 间甲基红质量规格：指示剂m-Methyl
red
人脂肪间充质干细胞HMSC-ad紫脲酸铵(IND)质量规格：INDMurexide
SK-MES-1细胞，人肺癌细胞 人膀胱鳞癌细胞,ScaBER细胞 人前脂肪细胞-皮下HPA-s卡立普多质量规格：>99%,USP,BRCarisoprodol
水貂肺上皮细胞;Mv.1.Lu(NBL-7)卡立普多（标准品）质量规格：HPLC>98%,标准品Carisoprodol
MICB Others Human 人 MICB 人细胞裂解液 (阳性对照) 卡维地洛质量规格：> 99%,EPCarvedilol
2）抗体的特异性鉴定：抗体的特异性是指与相应抗原或近似抗原物质的识别能力。抗体的特异性高,它的识别能力就强。衡量特异性通常以交叉反应率来表示。交叉反应率可用竞争抑制试验测定。以不同浓度抗原和近似抗原分别做竞争抑制曲线,计算各自的结合率,求出各自在IC50时的浓度,并按公式计算交叉反应率。
如果所用抗原浓度IC50浓度为pg/管,而一些近似抗原物质的IC50浓度几乎是无穷大时,表示这一抗血清与其他抗原物质的交叉反应率近似为0,即该血清的特异性较好。
3）的亲和力：是指抗体和抗原结合的牢固程度。亲和力的高低是由抗原分子的大小,抗体分子的结合位点与抗原决定簇之间立体构型的合适度决定的。有助于维持抗原抗体复合物稳定的分子间力有氢键,疏水键,侧链相反电荷基因的库仑力,范德华力和空间斥力。亲和力常以亲和常数K表示,K的单位是L/mol。抗体亲和力的测定对抗体的筛选,确定抗体的用途,验证抗体的均一性等均有重要意义。