（一）基本原理
赖氨酸残基的游离e-氨基可与FITC(其激发波长为492nm,发射光波长为525nm)共价结合。与FITC结合的抗体可用为特异性的探针,以测定细胞相应抗原的存在。FITC具有很高的量子产量(发射光与吸收光的比值,0.85)形成的偶联物的稳定性很好。
（二）仪器和试剂
1.待偶联抗体；
2.碳酸氢钠缓冲液；
3.叠氮钠；
4.庵氰酸荧光素；
5.电磁搅拌器。
以下是RAS家族关联结构域蛋白8抗体供应商的订购信息:
英文名称 Anti-RASSF8
中文名称 RAS家族关联结构域蛋白8抗体
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产品名称 |
英文名称 |
规 格 |
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RAS家族关联结构域蛋白8抗体供应商 |
Anti-RASSF8 |
0.2ml/200μg |
浓 度 1mg/1ml
规 格 0.2ml/200μg
抗体来源 Rabbit
克隆类型 polyclonal
交叉反应 Human, Mouse, Rat, Chicken, Dog, Pig, Cow, Horse
产品类型 一抗
研究领域 肿瘤 细胞生物 信号转导
蛋白分子量 predicted molecular weight: 48kDa
性 状 Lyophilized or Liquid
免 疫 原 KLH conjugated synthetic peptide derived from human RASSF8
亚 型 IgG
纯化方法 affinity purified by Protein A
储 存 液 0.01M PBS, pH 7.4 with 10 mg/ml BSA and 0.1% Sodium azide
产品应用 WB=1:100-500 ELISA=1:500-1000 IP=1:20-100 IHC-P=1:100-500 IHC-F=1:100-500 IF=1:100-500
别 名 C12orf2; Carcinoma associated HOJ 1; Carcinoma associated protein HOJ 1; HoJ 1; HoJ1; Ras association (RalGDS/AF 6) domain family (N terminal) member 8; Ras association (RalGDS/AF 6) domain family 8; Ras association domain containing protein 8; Ras association domain family 8; RASSF 8; RASF8_HUMAN.
杂交瘤(B类);Z51B3C10H12A12G2F7E7氯化银(>99%,BC)Silver chloride质量规格：>99%,BC
HAVCR1 Others
Human 人 KIM-1 / TIM1 / HAVCR1 人细胞裂解液 (阳性对照) 偏钒酸银(>98%,BR)Silver
metavanadate质量规格：>98%,BR
人心脏成纤维细胞-心室RNAHCF-av
miRNA5 μg银粉（200目）(>99.5%,EP)Silver powder质量规格：>99.5%,EP
大鼠肾脏管状上皮细胞(RRTEpiC)(5×105)5-硝基愈创木酚钠(>98%,BR)Sodium 5-nitroguaiacolate质量规格：>98%,BR
水牛皮肤成纤维样细胞;WB-S1苯亚磺酸钠(>98%,BR)Sodium
benzenesulfinate质量规格：>98%,BR
野生型人c-kit受体细胞株;A7d生育酚乙酸酯(标准品)质量规格：分析标准品Vitamin
E acetate
SERPINA7 Others
Mouse 小鼠 SerpinA7 / TBG 人细胞裂解液 (阳性对照) 1效唑(分析标准品97.5%)质量规格：分析标准品97.5%Uniconazole
大鼠纤维母细胞;1/EJ 1-1硬脂酸钠(>95%,BR)质量规格：>95%,BRSodium stearate
MERTK Others Human 人 MERTK / Mer (aa 578-872) 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) 硫代硫酸钠无水(>98.5%,BC)质量规格：>98.5%,BCSodium
thiosulfate anhydrous
肝窦内皮细胞Many types of cells包装：5 × 105方(1ml)Sulfo
NHS LC Biotin质量规格：BRSulfo NHS LC Biotin
HuH-6(人肝母细胞瘤细胞) 5×106cells/瓶×2苯氧乙酸(标准品)Phenoxyacetic acid质量规格：分析标准品
Promocell C-22010
Endothelial Cell Growth Medium, 内皮细胞生长培养基(即用型) 500ml菲(标准品)Phenanthrene质量规格：分析标准品,用于环境分析
人骨骼肌细胞裂解物HSkMCL芘(标准品)Pyrene质量规格：分析标准品
PRKCD Others Mouse 小鼠 PKC delta / PRKCD 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) (-)-盐酸东莨菪碱(标准品)(−)-Scopolamine hydrochloride质量规格：分析标准品,99.0%
小鼠畸胎瘤细胞;P19十四烷(标准品)Tetradecane质量规格：分析标准品,≥99.5%(GC)
2）抗体的特异性鉴定：抗体的特异性是指与相应抗原或近似抗原物质的识别能力。抗体的特异性高,它的识别能力就强。衡量特异性通常以交叉反应率来表示。交叉反应率可用竞争抑制试验测定。以不同浓度抗原和近似抗原分别做竞争抑制曲线,计算各自的结合率,求出各自在IC50时的浓度,并按公式计算交叉反应率。
如果所用抗原浓度IC50浓度为pg/管,而一些近似抗原物质的IC50浓度几乎是无穷大时,表示这一抗血清与其他抗原物质的交叉反应率近似为0,即该血清的特异性较好。
3）的亲和力：是指抗体和抗原结合的牢固程度。亲和力的高低是由抗原分子的大小,抗体分子的结合位点与抗原决定簇之间立体构型的合适度决定的。有助于维持抗原抗体复合物稳定的分子间力有氢键,疏水键,侧链相反电荷基因的库仑力,范德华力和空间斥力。亲和力常以亲和常数K表示,K的单位是L/mol。抗体亲和力的测定对抗体的筛选,确定抗体的用途,验证抗体的均一性等均有重要意义。