(一)基本原理
赖氨酸残基的游离e-氨基可与FITC(其激发波长为492nm,发射光波长为525nm)共价结合。与FITC结合的抗体可用为特异性的探针,以测定细胞相应抗原的存在。FITC具有很高的量子产量(发射光与吸收光的比值,0.85)形成的偶联物的稳定性很好。
(二)仪器和试剂
1.待偶联抗体;
2.碳酸氢钠缓冲液;
3.叠氮钠;
4.庵氰酸荧光素;
5.电磁搅拌器。
以下是核糖体蛋白L19抗体供应商的订购信息:
英文名称 Anti-RPL19
中文名称 核糖体蛋白L19抗体
产品名称 |
英文名称 |
规 格 |
核糖体蛋白L19抗体供应商 |
Anti-RPL19 |
0.2ml/200μg |
浓 度 1mg/1ml
规 格 0.2ml/200μg
抗体来源 Rabbit
克隆类型 polyclonal
交叉反应 Human, Mouse, Rat, Chicken, Dog, Pig, Cow, Horse, Rabbit, Sheep
产品类型 一抗
研究领域 肿瘤 细胞生物 细胞类型标志物 肿瘤细胞生物标志物 表观遗传学
蛋白分子量 predicted molecular weight: 23kDa
性 状 Lyophilized or Liquid
免 疫 原 KLH conjugated synthetic peptide derived from human RPL19 (31-80aa)
亚 型 IgG
纯化方法 affinity purified by Protein A
储 存 液 Preservative: 15mM Sodium Azide, Constituents: 1% BSA, 0.01M PBS, pH 7.4
产品应用 WB=1:100-500 ELISA=1:500-1000 IP=1:20-100 IHC-P=1:100-500 IHC-F=1:100-500 IF=1:100-500
别 名 60S ribosomal protein L19; DKFZp779D216; FLJ27452; HGNC:10312; MGC71997; Ribosomal Protein L19; Ribosomal protein L19, cytosolic, N terminus truncated; RL19_HUMAN.
CM-R038大鼠肝内胆管上皮细胞完全培养基100mL硫酸锂(>98%,BR)Lithium sulfate质量规格:>98%,BR
Ca Ski, 人细胞 非洲绿猴肾细胞,CV-1(M)细胞 PA-1(人卵巢畸胎瘤细胞)油酸钠(>98%,BR )Sodium oleate质量规格:>98%,BR
小鼠T**细胞;Cl.Ly1+2-/9四甲基氯化铵(>99%,BR)Tetramethylammonium chloride质量规格:>99%,BR
NAALADL1 Others
Human 人 NAALADL1 人细胞裂解液 (阳性对照) 1-辛烷磺酸钠(>98%,BC )1-Octanesulfonic acid, sodium
salt质量规格:>98%,BC
人细胞;Hela 229 [HeLa229]乙酸钙一水(>98%,BR)Calcium acetate, monohydrate质量规格:>98%,BR
成骨细胞Many types of cells包装:5 × 105方(1ml)醋酸泼尼(标准品)质量规格:HPLC>98%,标准品Prednisone
Acetate
人皮肤鳞癌细胞;A-431 [A431] 大鼠小肠粘膜上皮细胞完全培养基 100mL普瑞巴林质量规格:>99%,S构型Pregabalin
DCS 小鼠树突状细胞肉瘤细胞盐酸尼莫司汀质量规格:>97.0%,BR,可用于细胞培养Nimustine
HCl(ACNU)
EFNA2 Others Mouse 小鼠 EFNA2 / Ephrin-A2 人细胞裂解液 (阳性对照) BEZ235 (Dactolisib)质量规格:>98%;ATP竞争性PI3K和mTOR抑制剂NVP-BEZ 235
大鼠肝细胞瘤;H4-II-E-C3吡嘧司特钾质量规格:>98%Pemirolast
potassium
HCC38(人导管癌细胞) 5×106cells/瓶×2新橙皮苷二氢查尔酮(标准品)质量规格:HPLC≥98%,标准品Neosperidin dihydrochalcone
hPC-PL Pellet 人胎盘周细胞团块 > 1 mio.cells 人前列腺平滑肌细胞总RNAHPSMC
NA氧化苦参碱质量规格:≥98%,BROxymatrine
CM-M066小鼠膀胱成纤维细胞完全培养基100mL1酸氢二钠七水质量规格:>98%,BRSodium phosphate, dibasic,
heptahydrate
PDK4 Others Mouse 小鼠 PDK4 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) dATP溶液(100 mM)质量规格:>97%,BRdATP
100 mM solution
肺泡上皮细胞培养基AEpiCM-prf癸酸钠质量规格:>99%,进分Sodium decanoate
2)抗体的特异性鉴定:抗体的特异性是指与相应抗原或近似抗原物质的识别能力。抗体的特异性高,它的识别能力就强。衡量特异性通常以交叉反应率来表示。交叉反应率可用竞争抑制试验测定。以不同浓度抗原和近似抗原分别做竞争抑制曲线,计算各自的结合率,求出各自在IC50时的浓度,并按公式计算交叉反应率。
如果所用抗原浓度IC50浓度为pg/管,而一些近似抗原物质的IC50浓度几乎是无穷大时,表示这一抗血清与其他抗原物质的交叉反应率近似为0,即该血清的特异性较好。
3)的亲和力:是指抗体和抗原结合的牢固程度。亲和力的高低是由抗原分子的大小,抗体分子的结合位点与抗原决定簇之间立体构型的合适度决定的。有助于维持抗原抗体复合物稳定的分子间力有氢键,疏水键,侧链相反电荷基因的库仑力,范德华力和空间斥力。亲和力常以亲和常数K表示,K的单位是L/mol。抗体亲和力的测定对抗体的筛选,确定抗体的用途,验证抗体的均一性等均有重要意义。