（一）基本原理
赖氨酸残基的游离e-氨基可与FITC(其激发波长为492nm,发射光波长为525nm)共价结合。与FITC结合的抗体可用为特异性的探针,以测定细胞相应抗原的存在。FITC具有很高的量子产量(发射光与吸收光的比值,0.85)形成的偶联物的稳定性很好。
（二）仪器和试剂
1.待偶联抗体；
2.碳酸氢钠缓冲液；
3.叠氮钠；
4.庵氰酸荧光素；
5.电磁搅拌器。
以下是视网膜色素变性蛋白1抗体厂家的订购信息:
英文名称 Anti-RP1/DCDC4A
中文名称 视网膜色素变性蛋白1抗体
别 名 DCDC4A; ORP1; Oxygen-regulated protein 1; Retinitis pigmentosa 1 protein; Retinitis pigmentosa RP1 protein; RP1; RP1_HUMAN.
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产品名称 |
英文名称 |
规 格 |
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视网膜色素变性蛋白1抗体厂家 |
Anti-RP1/DCDC4A |
0.2ml/200μg |
浓 度 1mg/1ml
规 格 0.2ml/200μg
抗体来源 Rabbit
克隆类型 polyclonal
交叉反应 Human, Mouse, Rat, Dog, Horse, Rabbit
产品类型 一抗
研究领域 发育生物学 神经生物学 细胞粘附分子 细胞骨架
蛋白分子量 predicted molecular weight: 241kDa
性 状 Lyophilized or Liquid
免 疫 原 KLH conjugated synthetic peptide derived from human RP1/DCDC4A
亚 型 IgG
纯化方法 affinity purified by Protein A
储 存 液 Preservative: 15mM Sodium Azide, Constituents: 1% BSA, 0.01M PBS, pH 7.4
产品应用 ELISA=1:500-1000 IP=1:20-100 IHC-P=1:100-500 IHC-F=1:100-500 ICC=1:100-500 IF=1:100-500
HUVEC 人脐静脉血管内皮细胞甲基反亚油酸甲酯(分析标准品)Methyl linolelaidate质量规格：分析标准品
CM-H123人神经小胶质细胞完全培养基100mL肉豆蔻酸甲酯(分析标准品,≥99.5%(GC))Methyl myristate质量规格：分析标准品,≥99.5%(GC)
PANC-1, 人胰腺癌细胞棕榈酸甲酯(分析标准品,≥99.0%(GC))Methyl
palmitate质量规格：分析标准品,≥99.0%(GC)
人前列腺癌细胞;DU 145 [DU145;DU-145] 人小脑颗粒细胞完全培养基 100mL亚麻酸甲酯(标准品)Methyl
linolenate质量规格：分析标准品
人前列腺平滑肌细胞cDNAHPSMC cDNA十一酸甲酯(标准品)Methyl undecanoate质量规格：分析标准品
成纤维细胞生长添加物FGS多潘立酮质量规格：>99%,EP5.0Domperidone
Hs 578Bst细胞，人成纤维细胞 表达SV40T抗原人胚肾上皮细胞,293FT细胞 胰腺星状细胞Many types of cells包装：5 × 105方(1ml)多潘立酮（标准品）质量规格：HPLC>99%,标准品Domperidone
盘羊皮肤细胞;ASHS2双甘氨二肽质量规格：>99%,BRGly-Gly
S100A2 Others
Human 人 S100A2 人细胞裂解液 (阳性对照) 重组人胰岛素质量规格：效价测定Human recombinant Insulin
T-108A胶原酶(含10mL酶解缓冲液)1mL人胰岛素质量规格：**测定用Human Insulin
CM-R076大鼠主动脉平滑肌细胞完全培养基100mL9-氨基米诺环素盐酸盐质量规格：>97.0%（HPLC）9-Amino-minocycline HCl
ADCYAP1R1 Others
Human 人 ADCYAP1R1 人细胞裂解液 (阳性对照) 阿法替尼质量规格：>99%,BR,可用于细胞培养Afatinib/BIBW2992
小鼠皮肤肥大细胞完全培养基 100mL奈比洛尔盐酸盐;奈必洛尔质量规格：>99%,BRNebivolol hydrochloride
SP2/0小鼠骨髓瘤细胞 Mouse myeloma cell line SP2/0 RPMI-1640(GIBCO)+10%FBS奈必洛尔(标准品)质量规格：HPLC>99%,标准品Nebivolol hydrochloride
IL12B Protein
Human 重组人 IL12B / P40 蛋白 (His 标签)核固红质量规格：BSNuclear fast red
2）抗体的特异性鉴定：抗体的特异性是指与相应抗原或近似抗原物质的识别能力。抗体的特异性高,它的识别能力就强。衡量特异性通常以交叉反应率来表示。交叉反应率可用竞争抑制试验测定。以不同浓度抗原和近似抗原分别做竞争抑制曲线,计算各自的结合率,求出各自在IC50时的浓度,并按公式计算交叉反应率。
如果所用抗原浓度IC50浓度为pg/管,而一些近似抗原物质的IC50浓度几乎是无穷大时,表示这一抗血清与其他抗原物质的交叉反应率近似为0,即该血清的特异性较好。
3）的亲和力：是指抗体和抗原结合的牢固程度。亲和力的高低是由抗原分子的大小,抗体分子的结合位点与抗原决定簇之间立体构型的合适度决定的。有助于维持抗原抗体复合物稳定的分子间力有氢键,疏水键,侧链相反电荷基因的库仑力,范德华力和空间斥力。亲和力常以亲和常数K表示,K的单位是L/mol。抗体亲和力的测定对抗体的筛选,确定抗体的用途,验证抗体的均一性等均有重要意义。