荧光定量PCR的影响:
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痒螨通用探针法荧光定量PCR试剂盒免费代测
Psoroptes spp.
CP924729
1.实时荧光定量PCR无需内标实时荧光定量PCR技术有效地解决了传统定量只能终点检测的局限,实现了每一轮循环均检测一次荧光信号的强度,并记录在电脑软件之中,通过对每个样品Ct值的计算,根据标准曲线获得定量结果。因此,实时荧光定量PCR无需内标是建立在两个基础之上的:
1)Ct值的重现性PCR循环在到达Ct值所在的循环数时,刚刚进入真正的指数扩增期(对数期),此时微小误差尚未放大,因此Ct值的重现性极好,即同一模板不同时间扩增或同一时间不同管内扩增,得到的Ct值是恒定的。
2)Ct值与起始模板的线性关系由于Ct值与起始模板的对数存在线性关系,可利用标准曲线对未知样品进行定量测定,因此,实时荧光定量PCR是一种采用外标准曲线定量的方法。
2.内标对实时荧光定量PCR的影响若在待测样品中加入已知起始拷贝数的内标,则PCR反应变为双重PCR,双重PCR反应中存在两种模板之间的干扰和竞争,尤其当两种模板的起始拷贝数相差比较大时,这种竞争会表现得更为显著。但由于待测样品的起始拷贝数是未知的,所以无法加入合适数量的已知模板作为内标。也正是这个原因,传统定量方法虽然加入内标,但仍然只是一种半定量的方法。
注意事项:
1.基础程序;
2.扩增温度和延伸温度;
3.反应时间;
4.循环次数;
5.PCR 反应液的配制;
6.PCR技术的基本原理;
7.PCR的反应动力学;
8.PCR扩增产物;
9.PCR反应体系与反应条件。
技术服务内容:
1、RNA抽提与定量;
2、引物设计及荧光定量PCR、数据分析;
3、技术服务实验报告提交。
4、严谨的实验设计,每个样品至少三个平行对照,保证实验结果的准确性。
5、后,分析溶解曲线,保证产物的特异性。
概述:
荧光定量PCR的基本原理就是在PCR扩增过程中,随着PCR循环数的递增,PCR产物不断积累,荧光信号也会相应的增加,这样就可以通过荧光强度的变化来对PCR反应进行实时的监测。本公司根据您的科研需求可以提供SYBR Green染料法和TaqMan探针法。通过对DNA或RNA的荧光定量PCR监测, 实现基因的相对定量、定量和定性分析。
产品特点:
1. 使用化学修饰的热启动聚合酶,反应特异性高,*程度地避免了非特异扩增;
2. 反应缓冲液经充分优化,反应灵敏快速,40个循环只需20多分钟;
3. 抗干扰能力强,反应重复性高,适合对土壤、粪便、肿瘤和血液来源的复杂样本中的靶基因进行检测分析。
在PCR反应体系中加入荧光基团,利用荧光信号积累实时监测整个PCR进程,zui后通过标准曲线对未知模板进行定量分析的方法。
特异性荧光标记:
TaqMan法
TaqMan探针的特性:
(1)5′端标记有报告基团(Reporter, R),如FAM、VIC等
(2)3′端标记有荧光淬灭基团 (Quencher, Q)
(3)探针完整,R所发射的荧光能量被Q基团吸收 ,无荧光, R与Q分开,发荧光
(4)Taq酶有 5′→3′外切核酸酶活性,可水解探针
相对定量通过内标定量:
内标(Endogenous Control)通常是β-actin、GAPDH基因等看家基因,在细胞中的表达量或在基因组中的拷贝数恒定,受环境因素影响小,内标定量结果代表了样本中所含细胞或基因组数量。
TRAP220/MED1 甲状腺受体相关蛋白220抗体 特价促销 0.2ml Fast Red RL Salt
phospho-TRAP220/MED1(Thr1457) 磷甲状腺受体相关蛋白220抗体 特价促销 0.1ml Fast Red Violet LB Salt
HOMER2 HOMER2抗体 特价促销 0.2ml Amaranth
BNIP3 促凋亡调节蛋白BNIP3抗体 特价促销 0.1ml Brilliant ponceau 5R
HOMER3 HOMER3蛋白抗体 特价促销 0.2ml Phenosafranine
UGT1A9 尿苷二磷葡萄糖醛转移酶1A9 特价促销 0.2ml Sirius Rose BB
ATF2 活复制因子2抗体 特价促销 0.1ml Ruthenium Red
phospho-HOMER3(Thr36) 磷HOMER3蛋白抗体 特价促销 0.1ml Erythrosin B
瑞美松龙标准品Human Interleukin-3,IL-3 ELISA KIT纯度:0.997
盐金刚乙标准品Human Interleukin-2 soluble receptor alpha chain,IL-2sRβ ELISA kit纯度:0.98
利鲁唑相关物质A标准品Human Interleukin-2 soluble receptor alpha chain,IL-2sRα ELISA kit纯度:0.999
利鲁唑标准品human Interleukin27 ELISA Kit纯度:0.999
利福平醌标准品Human Interleukin23 ELISA Kit纯度:0.997
利福平标准品Human Interleukin-2 ELISA kit纯度:0.95
利福布标准品Human Interleukin-1 receptorI(IL-1sRI) ELISA kit纯度:0.984
中文名:
别名:
分子式:C17H16O5
性状:Powder
纯度:%
痒螨通用探针法荧光定量PCR试剂盒免费代测CAS No.:66568-97-6