荧光定量PCR的影响:
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真鲷虹彩病毒探针法荧光定量PCR试剂盒说明书
Red Sea Bream Iridovirus(RSIV)
CP924740
1.实时荧光定量PCR无需内标实时荧光定量PCR技术有效地解决了传统定量只能终点检测的局限,实现了每一轮循环均检测一次荧光信号的强度,并记录在电脑软件之中,通过对每个样品Ct值的计算,根据标准曲线获得定量结果。因此,实时荧光定量PCR无需内标是建立在两个基础之上的:
1)Ct值的重现性PCR循环在到达Ct值所在的循环数时,刚刚进入真正的指数扩增期(对数期),此时微小误差尚未放大,因此Ct值的重现性极好,即同一模板不同时间扩增或同一时间不同管内扩增,得到的Ct值是恒定的。
2)Ct值与起始模板的线性关系由于Ct值与起始模板的对数存在线性关系,可利用标准曲线对未知样品进行定量测定,因此,实时荧光定量PCR是一种采用外标准曲线定量的方法。
2.内标对实时荧光定量PCR的影响若在待测样品中加入已知起始拷贝数的内标,则PCR反应变为双重PCR,双重PCR反应中存在两种模板之间的干扰和竞争,尤其当两种模板的起始拷贝数相差比较大时,这种竞争会表现得更为显著。但由于待测样品的起始拷贝数是未知的,所以无法加入合适数量的已知模板作为内标。也正是这个原因,传统定量方法虽然加入内标,但仍然只是一种半定量的方法。
注意事项:
1.基础程序;
2.扩增温度和延伸温度;
3.反应时间;
4.循环次数;
5.PCR 反应液的配制;
6.PCR技术的基本原理;
7.PCR的反应动力学;
8.PCR扩增产物;
9.PCR反应体系与反应条件。
技术服务内容:
1、RNA抽提与定量;
2、引物设计及荧光定量PCR、数据分析;
3、技术服务实验报告提交。
4、严谨的实验设计,每个样品至少三个平行对照,保证实验结果的准确性。
5、后,分析溶解曲线,保证产物的特异性。
概述:
荧光定量PCR的基本原理就是在PCR扩增过程中,随着PCR循环数的递增,PCR产物不断积累,荧光信号也会相应的增加,这样就可以通过荧光强度的变化来对PCR反应进行实时的监测。本公司根据您的科研需求可以提供SYBR Green染料法和TaqMan探针法。通过对DNA或RNA的荧光定量PCR监测, 实现基因的相对定量、定量和定性分析。
产品特点:
1. 使用化学修饰的热启动聚合酶,反应特异性高,*程度地避免了非特异扩增;
2. 反应缓冲液经充分优化,反应灵敏快速,40个循环只需20多分钟;
3. 抗干扰能力强,反应重复性高,适合对土壤、粪便、肿瘤和血液来源的复杂样本中的靶基因进行检测分析。
在PCR反应体系中加入荧光基团,利用荧光信号积累实时监测整个PCR进程,zui后通过标准曲线对未知模板进行定量分析的方法。
特异性荧光标记:
TaqMan法
TaqMan探针的特性:
(1)5′端标记有报告基团(Reporter, R),如FAM、VIC等
(2)3′端标记有荧光淬灭基团 (Quencher, Q)
(3)探针完整,R所发射的荧光能量被Q基团吸收 ,无荧光, R与Q分开,发荧光
(4)Taq酶有 5′→3′外切核酸酶活性,可水解探针
相对定量通过内标定量:
内标(Endogenous Control)通常是β-actin、GAPDH基因等看家基因,在细胞中的表达量或在基因组中的拷贝数恒定,受环境因素影响小,内标定量结果代表了样本中所含细胞或基因组数量。
BACE1/ASP2 β分泌酶抗体 特价促销 0.1ml Fluorescein
phospho-BACE1(Ser498) 磷β分泌酶抗体 特价促销 0.1ml Calcein
Phospho-Bad(Ser118) 磷相关死亡促进因子抗体 特价促销 0.1ml Wright's stain
Phospho-Bad(Ser134) 磷相关死亡促进因子抗体 特价促销 0.1ml Giemsa stain
phospho-BAD(Ser99) 磷相关死亡促进因子抗体 特价促销 0.1ml 6-Carboxyfluorescein N-hydroxysuccinimide ester
Bad 相关死亡促进因子Bad抗体 特价促销 0.1ml 6-Carboxyfluorescein
phospho-BAD(Ser128) 磷相关死亡促进因子抗体 特价促销 0.1ml 5-Carboxyfluorescein
Phospho-Bad(Ser136) 磷相关死亡促进因子抗体 特价促销 0.1ml Nigrosine water soluble
泼尼松龙琥珀半酯标准品Human CCL7 ELISA Kit纯度:0.999
醋泼尼松龙标准品Human CCL3 ELISA Kit纯度:0.999
泼尼松龙标准品Human CCL26 ELISA Kit纯度:0.995
泼尼卡酯标准品Human CCL24 ELISA Kit纯度:0.975
盐唑嗪标准品Human CCL24 ELISA Kit纯度:0.999
喹标准品Human CCL22 ELISA Kit纯度:0.983
标准品Human CCL21 ELISA Kit纯度:0.999
中文名:
别名:
分子式:C25H26O6
性状:Powder
纯度:%
真鲷虹彩病毒探针法荧光定量PCR试剂盒说明书CAS No.:154992-17-3