1）将培养基在37℃水浴锅预热；准备一个15mL无菌的离心管，加入8mL预热培养基。
2）将冻存细胞从液氮罐中取出，快速放入37℃水浴锅中复温（可准备一洁净的烧杯，装满37℃的水，细胞冻存管取出后迅速放入烧杯内，再逐步转移到水浴锅中）。轻轻晃动冻存管，使细胞能在1~2min内完全解冻，使细胞能尽快通过易受损的温度段（-5~0℃）。注意冻存管管口不能没入水中，BRL(大鼠肝细胞)避免引起污染。
3）用75%酒精擦拭冻存管后再置于超净台内，将管内细胞转移至准备好的离心管内，轻轻吹打液体，使细胞均匀分散，降低DMSO浓度，吹打时避免产生气泡。用新鲜培养基洗管壁2次，均转移至离心管内。
4）800rpm离心5min，弃上清，加入新鲜的培养基，吹打制成细胞悬液。
5）将细胞悬液转移至T25细胞瓶内，补加适量的培养基，轻轻晃动细胞瓶使细胞分布均匀，放入温箱内培养。
6）**天观察细胞贴壁生长情况，换新鲜培养基以去除死细胞。继续培养，待细胞长至80~90%汇合时正常传代。一般刚复苏的细胞需经过2~3次传代，细胞活力恢复后才能进行后续的实验。
以下是人正常前列腺上皮细胞；RWPE-1图片产品信息的认购信息：
细胞名称 人正常前列腺上皮细胞；RWPE-1图片
形态特性 上皮细胞
生长特性 贴壁生长
特征特性 肿瘤抑制基因： p53 + [PubMed: 9214605] pRB + [PubMed: 9214605] 一位正常男性前列腺组织切片的周围区域的上皮细胞用单拷贝的人瘤病毒的18(HPV-18)进行转化，建立了RWPE-1 (ATCC CRL-11609) 细胞株 [PubMed: 9214605]. 在三维Matrigel培养时，在雄**作用下，RWPE-1细胞形成腺胞并向培养基中分泌PSA。[PubMed: 11170142]. 当与Matrigel或基质细胞混合注射雄性裸鼠时，RWPE
培养条件 这株细胞的基本培养基作为Invitrogen (GIBCO)提供的kit的部分： 角化细胞无血清培养基K-SFM，kit目录号17005-042。随kit提供这株细胞生长所需的两种添加剂（牛垂体提取物BPE及人重组表皮生长因子EGF）。 配制完全生长培养基，需添加以下成分： 0.05 mg/ml BPE – 随K-SFM提供 5 ng/ml EGF -随K-SFM提供。
传代方法 消化3-5分钟。1:2。3天内可长满。
传代情况 P(52+5)
冻存条件 完全培养基+8%DMSO
支原体检测 阴性
STR
同工酶
染色体
注意事项：
1. 人正常前列腺上皮细胞；RWPE-1图片接收到细胞，肉眼观察细胞培养基颜色，显微镜观察细胞生长情况，并对细胞进行不同倍数拍照（建议收到时的培养瓶拍一张照片，显微镜拍收到时的细胞100X,200X各一张）。
2.用75%的酒精（建议配置75%的酒精的水是过的）。
3.严格无菌操作，打开细胞培养瓶。
4.将细胞培养瓶内的培养基用吸管完全吸出（严禁直接倾倒），放入另一无菌容器中（建议换新的培养基培养细胞）。
5.用PBS 2-3ml/次轻轻洗细胞表面，洗3-4次遍，加入0.05%胰酶-EDTA1-1.5ml,显微镜下观察细胞变圆，轻轻拍打培养瓶直到细胞脱落，加入终止液终止。
6.1000rpm，5min离心，重悬细胞。
7.换新的细胞培养瓶，37℃，5%CO2培养。
细胞培养的优点：
1.人正常前列腺上皮细胞；RWPE-1图片研究的对象是活细胞
在实验过程中，根据要求可始终保持细胞活力，并可长时间监控、检测甚至定量评估一部分活细胞的情况，包括活细胞的形态、结构、生命活动等。
2.研究条件可以人为控制
pH、温度、氧气、二氧化碳、张力等物理化学的条件，可以根据实际需要进行人为的控制，同时，可以施加化学、物理、生物等因素作为条件而进行实验观察，这些因素同样可以处于严格控制之下。
3.研究的样本可以达到比较均一性
通过细胞培养一定代数后，所得到的细胞系则可以达到均一性而属于同一类型的细胞，需要时，可采用克隆化等方法使细胞达到纯化。
4.研究内容便于观察、检测和记录
采用各种研究技术：如倒置生物显微镜、荧光显微镜、电子显微镜、流式细胞术、激光共焦显微镜、组织化学、原位杂交、同位素标记等各种仪器设备
记录方式可采用摄影照片、缩时电影、电视等多种手段。
5.研究的范围比较广泛
应用的学科领域较为宽广，如细胞学、学、肿瘤学、生物化学、遗传学、分子生物学等；
适用的对象范围广，从低等动物到高等动物，一种动物的不同年龄阶段以及不同组织，都可进行有针对性的研究。
6.研究的费用相对较经济
可提供大量、同一时期、重复性好的、生物学性状相似的实验对象。
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4E-BP1 / EIF4EBP1 抗體 (PE), 鼠單抗 FCM 25 Test
MCM8 抗體, 兔多抗, 抗原親和純化 WB 50 µg
Phospho-PDGFRA(Tyr572) 磷酸化血小板源性生长因子受体α 0.1ml
Phospho-Numb (Ser276) 磷酸化膜相关蛋白Numb抗体 0.1ml
ANKRD9 锚蛋白重复结构域蛋白9抗体 0.2ml
NK-2R 神经激肽A受体/K物质受体抗体 0.1ml
EphB4 / HTK 抗體, 兔多抗 ELISA 400 µg
Neurobeachin 蛋白激酶锚定蛋白抗体 0.2ml
TRAIL R1 / CD261 / TNFRSF10A 抗體 (FITC), 鼠單抗 FCM 25 Test
phospho-VEGFR2 (Tyr1175) 磷酸化血管内皮生长因子受体2抗体 0.1ml
ITIH4 α胰蛋白酶重链H4抗体 0.2ml
夏枯草 英文名称 TLC法鉴别 规格: 20mg/支进口/国产 含量： 120993-200604
碳酸锌氢氧化物 进口、国产 英文名称: Zinc carbonate basic 含量: AR，40%
环酰菌胺 标准品 CAS号：126833-17-8 100mg 英文名称 规格: 20mg/支进口/国产 含量：
L-1,4'-甲基磺酰基-2-苯基乙基氯甲基酮 进口、国产 英文名称: TPCK 含量: BR，98%
人正常前列腺上皮细胞；RWPE-1图片苯二甲酸氢钾 进口、国产 英文名称: Potassium hydrogen phthalate 含量: CP，97%
高三尖杉酯碱 Homoharringtonine 进口/国产 规格: 20mg/支
烈香杜鹃油 英文名称 对照品 规格: 20mg/支进口/国产 含量： 鉴别
黄精(滇黄精) 英文名称 TLC法鉴别 规格: 20mg/支进口/国产 含量： 120998-200403
间甲基环己醇 进口、国产 英文名称: 3-Methylcyclohexanol 含量: GR，99.8%
延胡索乙素 英文名称 含量测定 规格: 20mg/支进口/国产 含量： 110726-200711
苦楝素 进口、国产 英文名称: Toosendanin 含量: 超纯，98%