1)将培养基在37℃水浴锅预热;准备一个15mL无菌的离心管,加入8mL预热培养基。
2)将冻存细胞从液氮罐中取出,快速放入37℃水浴锅中复温(可准备一洁净的烧杯,装满37℃的水,细胞冻存管取出后迅速放入烧杯内,再逐步转移到水浴锅中)。轻轻晃动冻存管,使细胞能在1~2min内完全解冻,使细胞能尽快通过易受损的温度段(-5~0℃)。注意冻存管管口不能没入水中,BRL(大鼠肝细胞)避免引起污染。
3)用75%酒精擦拭冻存管后再置于超净台内,将管内细胞转移至准备好的离心管内,轻轻吹打液体,使细胞均匀分散,降低DMSO浓度,吹打时避免产生气泡。用新鲜培养基洗管壁2次,均转移至离心管内。
4)800rpm离心5min,弃上清,加入新鲜的培养基,吹打制成细胞悬液。
5)将细胞悬液转移至T25细胞瓶内,补加适量的培养基,轻轻晃动细胞瓶使细胞分布均匀,放入温箱内培养。
6)**天观察细胞贴壁生长情况,换新鲜培养基以去除死细胞。继续培养,待细胞长至80~90%汇合时正常传代。一般刚复苏的细胞需经过2~3次传代,细胞活力恢复后才能进行后续的实验。
以下是人结直肠腺癌细胞;LS 174T [LS174T]图片产品信息的认购信息:
细胞名称 人结直肠腺癌细胞;LS 174T [LS174T]图片
形态特性 上皮细胞
生长特性 贴壁生长
特征特性 LS 174T是LS 180 (ATCC CL 187)结肠腺癌细胞株的胰蛋白酶化变种。 它比亲本更易传代,象LS 180一样生成大量的癌胚抗原(CEA)。 电镜研究表明有丰富的微丝和细胞质粘液素液泡。 直肠抗原3阳性。 p53抗原表达阴性,但mRNA表达阳性。 与ATCC CL-187来源于同一个肿瘤。LS 174T细胞角蛋白染色阳性。 癌基因c-myc, N-myc, H-ras, N-ras, Myb, 和 fos的表达呈阳性。 癌基因k-ras和sis的表达未做检测。
培养条件 DMEM-H: Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose) 优胎牛血清,10%
传代方法 消化3-5分钟。1:2。3天内可长满。
传代情况 PN5
冻存条件 完全培养基+8%DMSO
支原体检测 阴性
STR Amelogenin:X;CSF1PO:10,13;D13S317:10;D16S539:11,13;D18S51:11,13,14;D19S433:14,15;D21S11:29,31;D2S1338:18,22;D3S1358:15,16,17;D5S818:11,16;D7S820:10.3,11;D8S1179:12,16;FGA:21,22;TH01:6,7;TPOX:8,9;vWA:15,17
同工酶
染色体
注意事项:
1. 人结直肠腺癌细胞;LS 174T [LS174T]图片接收到细胞,肉眼观察细胞培养基颜色,显微镜观察细胞生长情况,并对细胞进行不同倍数拍照(建议收到时的培养瓶拍一张照片,显微镜拍收到时的细胞100X,200X各一张)。
2.用75%的酒精(建议配置75%的酒精的水是过的)。
3.严格无菌操作,打开细胞培养瓶。
4.将细胞培养瓶内的培养基用吸管完全吸出(严禁直接倾倒),放入另一无菌容器中(建议换新的培养基培养细胞)。
5.用PBS 2-3ml/次轻轻洗细胞表面,洗3-4次遍,加入0.05%胰酶-EDTA1-1.5ml,显微镜下观察细胞变圆,轻轻拍打培养瓶直到细胞脱落,加入终止液终止。
6.1000rpm,5min离心,重悬细胞。
7.换新的细胞培养瓶,37℃,5%CO2培养。
细胞培养的优点:
1.人结直肠腺癌细胞;LS 174T [LS174T]图片研究的对象是活细胞
在实验过程中,根据要求可始终保持细胞活力,并可长时间监控、检测甚至定量评估一部分活细胞的情况,包括活细胞的形态、结构、生命活动等。
2.研究条件可以人为控制
pH、温度、氧气、二氧化碳、张力等物理化学的条件,可以根据实际需要进行人为的控制,同时,可以施加化学、物理、生物等因素作为条件而进行实验观察,这些因素同样可以处于严格控制之下。
3.研究的样本可以达到比较均一性
通过细胞培养一定代数后,所得到的细胞系则可以达到均一性而属于同一类型的细胞,需要时,可采用克隆化等方法使细胞达到纯化。
4.研究内容便于观察、检测和记录
采用各种研究技术:如倒置生物显微镜、荧光显微镜、电子显微镜、流式细胞术、激光共焦显微镜、组织化学、原位杂交、同位素标记等各种仪器设备
记录方式可采用摄影照片、缩时电影、电视等多种手段。
5.研究的范围比较广泛
应用的学科领域较为宽广,如细胞学、学、肿瘤学、生物化学、遗传学、分子生物学等;
适用的对象范围广,从低等动物到高等动物,一种动物的不同年龄阶段以及不同组织,都可进行有针对性的研究。
6.研究的费用相对较经济
可提供大量、同一时期、重复性好的、生物学性状相似的实验对象。
以下是人结直肠腺癌细胞;LS 174T [LS174T]图片的相关产品,点击进入了解更多人正常组织来源细胞。
细胞转录因子ELK1抗原 ELK1 进口/国产 规格: 0.5mg
CD3 epsilon(抗原) CD3 epsilon peptide 特价促销 规格: 0.5mg
人肺泡上皮细胞裂解物 规格: 200 µg 400 µg 英文名称: HPAEpiCL
人前脂肪细胞-内脏微小RNA 规格: 1 µg 2 µg 5 µg 英文名称: HPA-v miRNA
3%氯化钠碱性蛋白胨水 进口、国产 250克 Alkaline Peptone Water 副溶血性弧的选择性增培养
晚期糖基化终末产物AGEs AGEs 特价促销 规格: 50mg
周期素依赖性激酶8抗原 CDK8(Cyclin Dependent Kinase 8) 现货供应 规格: 0.5mg
人肾皮质上皮细胞总RNA 规格: 10 µg 英文名称: HRCEpiC tRNA
小鼠成纤维细胞 规格: 5 x 10^5 cells/vial 英文名称: MLF
人结膜成纤维细胞总RNA 规格: 10 µg 英文名称: HConF tRNA
PEA 琼脂 进口、国产 用于从含革兰氏阴性的标本中分离培养革兰氏阳性 PEA Agar 250g
硝草胺 标准品 CAS号:40487-42-1 100mg 英文名称 规格: 20mg/支进口/国产 含量:
咪唑酮 标准品 CAS号:161326-34-7 100mg 英文名称 规格: 20mg/支进口/国产 含量:
α-细辛脑 英文名称 含量测定 规格: 20mg/支进口/国产 含量: 100298-201002
人结直肠腺癌细胞;LS 174T [LS174T]图片四聚乙醛 标准品 CAS号:108-62-3 1g 英文名称 规格: 20mg/支进口/国产 含量:
厚朴酚 英文名称 对照品 规格: 20mg/支进口/国产 含量: 含量测定
辛酸乙酯 进口、国产 英文名称: Ethyl octanoate 含量: CP,98%
舍雷肽酶 鉴别 进口/国产 -20℃,避光 规格: 25mg
氧化槐果碱 英文名称 规格: 20mg/支进口/国产 含量: Oxysophocarpine
水杨酸 英文名称 对照品 规格: 20mg/支进口/国产 含量: HPLC法含量测定用
▲咪达唑英文名称 HPLC法含量测定 规格: 20mg/支进口/国产 含量: 171265-201001
沙丁胺醇 英文名称 含量测定 规格: 20mg/支进口/国产 含量: 100204-200702